- Nephelometry คืออะไร?
- การกระจายของรังสีโดยอนุภาคในสารละลาย
- เนฟีโลมิเตอร์
- ถึง.
- ข.
- ค.
- ง.
- และ.
- การเบี่ยงเบน
- ลักษณะทางมาตรวิทยา
- การประยุกต์ใช้งาน
- การตรวจหาภูมิคุ้มกันที่ซับซ้อน
- End Point Nephelometry:
- การเคลื่อนไหวของเนฟีโลเมตรี
- แอพอื่น ๆ
- อ้างอิง
เดิมมาเกี่ยวข้องกับการวัดรังสีที่เกิดจากอนุภาค (ในการแก้ปัญหาหรือ Suspension) และการวัดการใช้พลังงานของรังสีที่มีฝนฟ้าคะนองกระจายที่มุมกับทิศทางของรังสีเหตุการณ์ที่เกิดขึ้นด้วย
เมื่ออนุภาคแขวนลอยโดนลำแสงจะมีส่วนของแสงที่สะท้อนออกไปอีกส่วนหนึ่งจะถูกดูดซับอีกส่วนหนึ่งจะเบี่ยงเบนและส่วนที่เหลือจะถูกส่งผ่านไป นี่คือเหตุผลที่เมื่อแสงกระทบตัวกลางโปร่งใสซึ่งมีอนุภาคของแข็งแขวนลอยอยู่สารแขวนลอยจะขุ่น
Nephelometry คืออะไร?
การกระจายของรังสีโดยอนุภาคในสารละลาย
ในขณะที่ลำแสงกระทบอนุภาคของสารแขวนลอยทิศทางการแพร่กระจายของลำแสงจะเปลี่ยนทิศทาง ผลกระทบนี้ขึ้นอยู่กับสิ่งต่อไปนี้:
1. ขนาดของอนุภาค (ขนาดและรูปร่าง)
2. ลักษณะของสารแขวนลอย (ความเข้มข้น)
3. ความยาวคลื่นและความเข้มของแสง
4. ระยะแสงบังเอิญ
5. มุมตรวจจับ
6. ดัชนีหักเหของตัวกลาง
เนฟีโลมิเตอร์
เนฟีโลมิเตอร์เป็นเครื่องมือที่ใช้วัดอนุภาคแขวนลอยในตัวอย่างของเหลวหรือในก๊าซ ดังนั้นตาแมวที่วางไว้ที่มุม 90 °กับแหล่งกำเนิดแสงจะตรวจจับรังสีจากอนุภาคที่อยู่ในสารแขวนลอย
ในทำนองเดียวกันแสงที่อนุภาคสะท้อนไปยังโฟโตเซลล์ขึ้นอยู่กับความหนาแน่นของอนุภาค แผนภาพที่ 1 นำเสนอส่วนประกอบพื้นฐานที่ประกอบขึ้นเป็นเนฟีโลมิเตอร์:
รูปที่ 1. ส่วนประกอบพื้นฐานของเนฟีโลมิเตอร์
ถึง.
ในการวัดเนฟีโลเมตรีมีความสำคัญอย่างยิ่งที่จะต้องมีแหล่งกำเนิดรังสีที่มีแสงสว่างสูง มีหลายประเภทตั้งแต่หลอดไฟซีนอนและหลอดไอปรอทหลอดฮาโลเจนทังสเตนรังสีเลเซอร์และอื่น ๆ
ข.
ระบบนี้ตั้งอยู่ระหว่างแหล่งกำเนิดรังสีและคูเวตดังนั้นด้วยวิธีนี้จึงหลีกเลี่ยงการแผ่รังสีที่มีความยาวคลื่นต่างกันเมื่อเทียบกับรังสีที่ต้องการบนคูเวตต์
มิฉะนั้นปฏิกิริยาการเรืองแสงหรือผลกระทบจากความร้อนในสารละลายจะทำให้เกิดการเบี่ยงเบนการวัด
ค.
โดยทั่วไปเป็นภาชนะทรงกระบอกหรือทรงกระบอกและอาจมีขนาดแตกต่างกัน นี่คือทางออกที่อยู่ระหว่างการศึกษา
ง.
เครื่องตรวจจับตั้งอยู่ในระยะทางที่กำหนด (โดยทั่วไปจะอยู่ใกล้กับ cuvette มาก) และมีหน้าที่ตรวจจับการแผ่รังสีที่กระจัดกระจายโดยอนุภาคในสารแขวนลอย
และ.
โดยทั่วไปจะเป็นเครื่องอิเล็กทรอนิกส์ที่รับแปลงและประมวลผลข้อมูลซึ่งในกรณีนี้เป็นการวัดที่ได้จากการศึกษาที่ดำเนินการ
การเบี่ยงเบน
ทุกการวัดขึ้นอยู่กับเปอร์เซ็นต์ของข้อผิดพลาดซึ่งส่วนใหญ่กำหนดโดย:
เซลล์ที่ปนเปื้อน : ในเซลล์ตัวแทนใด ๆ ที่อยู่ภายนอกของสารละลายที่อยู่ระหว่างการศึกษาไม่ว่าจะเป็นภายในหรือภายนอกเซลล์จะลดแสงที่ส่องสว่างระหว่างทางไปยังเครื่องตรวจจับ (เซลล์ที่มีข้อบกพร่องฝุ่นที่เกาะอยู่ตามผนังของเซลล์)
การรบกวน : การปรากฏตัวของสิ่งปนเปื้อนจุลินทรีย์หรือความขุ่นจะกระจายพลังงานที่เปล่งประกายเพิ่มความเข้มของการกระจายตัว
สารประกอบเรืองแสง : เป็นสารประกอบที่เมื่อได้รับความตื่นเต้นจากรังสีที่ตกกระทบทำให้การอ่านค่าความหนาแน่นกระจัดกระจายผิดพลาดและสูง
การจัดเก็บรีเอเจนต์ : อุณหภูมิของระบบที่ไม่เพียงพออาจทำให้เกิดสภาวะการศึกษาที่ไม่พึงประสงค์และอาจนำไปสู่การปรากฏตัวของรีเอเจนต์ที่มีเมฆมากหรือตกตะกอน
ความผันผวนของพลังงานไฟฟ้า : เพื่อป้องกันการแผ่รังสีจากเหตุการณ์ที่เกิดจากความผิดพลาดขอแนะนำให้ใช้ตัวปรับแรงดันไฟฟ้าสำหรับการแผ่รังสีที่สม่ำเสมอ
ลักษณะทางมาตรวิทยา
เนื่องจากพลังการแผ่รังสีของรังสีที่ตรวจพบนั้นแปรผันโดยตรงกับความเข้มข้นของมวลอนุภาคการศึกษาแบบเนฟีโลเมตริกจึงมีความไวทางมาตรวิทยาสูงกว่าวิธีการอื่นที่คล้ายคลึงกัน (เช่นการวัดความขุ่น)
นอกจากนี้เทคนิคนี้ต้องใช้สารละลายเจือจาง สิ่งนี้ช่วยให้ปรากฏการณ์การดูดกลืนและการสะท้อนลดลง
การประยุกต์ใช้งาน
การศึกษาแบบ Nephelometric เป็นตำแหน่งที่สำคัญมากในห้องปฏิบัติการทางคลินิก การใช้งานมีตั้งแต่การกำหนดอิมมูโนโกลบูลินและโปรตีนระยะเฉียบพลันการเสริมและการแข็งตัว
การตรวจหาภูมิคุ้มกันที่ซับซ้อน
เมื่อตัวอย่างทางชีววิทยามีแอนติเจนที่น่าสนใจจะถูกผสม (ในสารละลายบัฟเฟอร์) กับแอนติบอดีเพื่อสร้างภูมิคุ้มกันที่ซับซ้อน
Nephelometry วัดปริมาณแสงที่กระจัดกระจายโดยปฏิกิริยาแอนติเจน - แอนติบอดี (Ag-Ac) และด้วยวิธีนี้จะตรวจพบภูมิคุ้มกันเชิงซ้อน
การศึกษานี้สามารถทำได้สองวิธี:
End Point Nephelometry:
เทคนิคนี้สามารถใช้สำหรับการวิเคราะห์จุดสิ้นสุดซึ่งแอนติบอดีของตัวอย่างทางชีววิทยาที่ศึกษาจะถูกบ่มเป็นเวลายี่สิบสี่ชั่วโมง
คอมเพล็กซ์ Ag-Ac ถูกวัดโดยใช้เนฟีโลมิเตอร์และเปรียบเทียบปริมาณแสงที่กระจัดกระจายกับการวัดเดียวกันก่อนที่จะเกิดคอมเพล็กซ์
การเคลื่อนไหวของเนฟีโลเมตรี
ในวิธีนี้จะมีการตรวจสอบอัตราการก่อตัวที่ซับซ้อนอย่างต่อเนื่อง อัตราการเกิดปฏิกิริยาขึ้นอยู่กับความเข้มข้นของแอนติเจนในตัวอย่าง ที่นี่การวัดจะถือเป็นฟังก์ชันของเวลาดังนั้นการวัดครั้งแรกจะเกิดขึ้นที่เวลา "ศูนย์" (t = 0)
Kinetic nephelometry เป็นเทคนิคที่ใช้กันอย่างแพร่หลายเนื่องจากการศึกษาสามารถทำได้ใน 1 ชั่วโมงเมื่อเทียบกับระยะเวลาที่ยาวนานของวิธีจุดสิ้นสุด อัตราส่วนการกระจายจะถูกวัดหลังจากเติมรีเอเจนต์
ดังนั้นตราบใดที่รีเอเจนต์คงที่ปริมาณแอนติเจนที่มีอยู่จะถือว่าเป็นสัดส่วนโดยตรงกับอัตราการเปลี่ยนแปลง
แอพอื่น ๆ
โดยทั่วไปแล้ว Nephelometry จะใช้ในการวิเคราะห์คุณภาพทางเคมีในน้ำเพื่อตรวจสอบความชัดเจนและเพื่อควบคุมกระบวนการบำบัด
นอกจากนี้ยังใช้ในการวัดมลพิษทางอากาศซึ่งความเข้มข้นของอนุภาคจะถูกกำหนดจากการกระจายตัวที่เกิดขึ้นในแสงตกกระทบ
อ้างอิง
- บริแทนนิกา, E. (nd). Nephelometry และ turbidimetry กู้คืนจาก britannica.com
- Al-Saleh, M. (nd). Turbidimetry & Nephelometry สืบค้นจาก pdfs.semanticscholar.org
- Bangs Laboratories, Inc. (nd) กู้คืนจาก technochemical.com
- โมราอิส, IV (2549). Turbidimetric และ Nephelometric Flow Analysis ดึงมาจาก repository.ucp.p
- Sasson, S. (2014). หลักการของเนฟีโลเมตรีและความขุ่น กู้คืนจาก notesonimmunology.files.wordpress.com
- สแตนลีย์, J. (2002). Essentials of Immunology & Serology ออลบานีนิวยอร์ก: การเรียนรู้ของทอมป์สัน ได้มาจาก books.google.co.ve
- วิกิพีเดีย (เอสเอฟ) Nephelometry (ยา) สืบค้นจาก en.wikipedia.org