สเมียร์เป็นเครื่องมือวินิจฉัยวัณโรคปอดที่ใช้งานอยู่ เป็นเทคนิคในห้องปฏิบัติการที่ช่วยให้สามารถตรวจจับและวัดผลของแบคทีเรียที่มีความเป็นกรดเร็วเช่น Mycobacterium tuberculosis เป็นวิธีการที่ใช้กันอย่างแพร่หลายทั่วโลกในการวินิจฉัยวัณโรคปอดที่ใช้งานอยู่ในชุมชนและเพื่อประเมินประโยชน์ของการรักษา
วัณโรคปอดเป็นโรคติดเชื้อที่เกิดจากเชื้อ Mycobacterium tuberculosis ซึ่งติดเชื้อในปอด แต่อาจส่งผลต่ออวัยวะและระบบอื่น ๆ ทั่วโลกมีผู้ป่วยวัณโรคปอด (TB) มากกว่า 6 ล้านคน
M. tuberculosis cells ในเสมหะ smear (ที่มา: Microrao / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0) ผ่าน Wikimedia Commons)
Mycobacterium tuberculosis และ Mycobacterium สายพันธุ์อื่น ๆ ที่ไม่ใช่วัณโรคมีการเคลือบไขมันบนผนังเซลล์ที่อุดมไปด้วยกรดไมโคลิกซึ่งทนต่อการเปลี่ยนสีของกรดแอลกอฮอล์หลังจากย้อมด้วยสีพื้นฐาน
ดังนั้นจึงใช้วิธีการย้อมสีพิเศษเช่นวิธี Ziehl-Neelsen วิธีการที่เรียบง่ายและราคาไม่แพงเหล่านี้ช่วยให้ผนังสามารถเก็บคราบได้เมื่อตัวอย่างถูกล้างด้วยสารละลายกรดและผนัง Mycobacterium จะเปลี่ยนเป็นสีแดงเมื่อเทียบกับแบคทีเรียอื่น ๆ ที่เปลี่ยนเป็นสีน้ำเงิน
ในการทำกล้องจุลทรรศน์แบบสเมียร์จำเป็นต้องมีตัวอย่างเสมหะโดยเฉพาะอย่างยิ่งถ่ายในตอนเช้าเมื่อคุณตื่นนอน นอกจากนี้ยังสามารถใช้ตัวอย่างเนื้อเยื่อหรือตัวอย่างของเหลวในร่างกายได้
กระบวนการ
ตัวอย่างที่ต้องดำเนินการสำหรับกล้องจุลทรรศน์สเมียร์ ได้แก่ ตัวอย่างเสมหะตัวอย่างเนื้อเยื่อหรือตัวอย่างของเหลวในร่างกาย ตัวอย่างเนื้อเยื่อสามารถสกัดได้ด้วยหลอดลมหรือโดยการตรวจชิ้นเนื้อของต่อมน้ำเหลืองหรือเนื้อเยื่ออื่น ๆ
เนื่องจากวัณโรคสามารถส่งผลกระทบต่ออวัยวะหรือระบบใด ๆ ตัวอย่างอาจแตกต่างกันไปมาก ได้แก่ ตัวอย่างปัสสาวะน้ำไขสันหลังน้ำเยื่อหุ้มปอดน้ำในช่องท้องเลือดหนองจากช่องเปิดการตรวจชิ้นเนื้อ ฯลฯ
นอกจากนี้ควรนำตัวอย่างแผลนอกปอดมาทำการเพาะเชื้อ ตัวอย่างเสมหะจะถูกเก็บในเวลาเช้าเมื่อเพิ่มขึ้น
สามารถเก็บตัวอย่างได้หลายครั้งติดต่อกันหรือติดต่อกันหลายวัน ตัวอย่างควรติดฉลากในขวดปากกว้างแบบปิด ควรมีข้อมูลของผู้ป่วยประเภทของตัวอย่างและวันที่เก็บตัวอย่าง
ขั้นตอนทางเทคนิค
- เมื่อได้ตัวอย่างแล้วสามารถปั่นแยกเพื่อให้เข้มข้นหรือใช้โดยตรง ขั้นตอนเริ่มต้นประกอบด้วยการวางตัวอย่างไม่กี่หยดและกระจายลงบนสไลด์
- ตัวอย่างถูกปกคลุมด้วยฟูซินกรอง (น้ำยาย้อมสี)
- จากนั้นจะถูกทำให้ร้อนจนได้รับการปล่อยไอสีขาวประมาณสาม
- รอห้านาทีเพื่อให้ตัวอย่างเย็นลงและล้างออกด้วยน้ำ
- ปิดทับด้วยน้ำยาฟอกขาว (กรดแอลกอฮอลล์) เป็นเวลา 2 นาที
- ล้างอีกครั้งด้วยน้ำ
- ตัวอย่างถูกปกคลุมด้วยเมทิลีนบลูและปล่อยให้ยืนได้หนึ่งนาที
- ล้างออกด้วยน้ำ
- ปล่อยให้แห้งในอากาศและทำการสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์
ภาพถ่ายจากกล้องจุลทรรศน์ (ภาพโดย Konstantin Kolosov ที่ www.pixabay.com)
ขั้นตอนนี้รวดเร็วง่ายราคาไม่แพงและช่วยให้เซลล์ Mycobacterium tuberculosis เปื้อนสีแดง เทคนิคนี้เรียกว่าเทคนิคการย้อมสี Ziehl-Neelsen
การสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์ประกอบด้วยการระบุการมีอยู่ของบาซิลลัสที่เป็นกรดเร็วและการหาปริมาณตามสนาม
เซลล์ Mycobacterium tuberculosis ปรากฏเป็นแท่งสีแดงเม็ดโค้งบนพื้นสีน้ำเงิน สามารถแยกจับคู่หรือจัดกลุ่มได้ การสังเกตควรทำตามภาคสนามและควรตรวจสอบอย่างน้อย 100 ช่องสำหรับการละเลง
ผลลัพธ์จะถือว่าเป็นบวกเมื่อมีเซลล์วัณโรคมากกว่า 10 M. ในแต่ละสาขา สิ่งนี้สอดคล้องกับ 5,000 ถึง 100,000 บาซิลลีสำหรับตัวอย่างแต่ละมิลลิลิตร
ในกรณีเหล่านี้ถือว่าเป็นผลดีสำหรับ Mycobacterium tuberculosis เนื่องจาก Mycobacterium ที่ไม่เป็นเชื้อแบคทีเรียหรือแบคทีเรียที่ทนต่อกรดอื่น ๆ มีรูปแบบที่แตกต่างกันและโดยทั่วไปปริมาณที่สังเกตได้ต่อสนามจะน้อยกว่า 10
ผู้ตรวจสอบตัวอย่างจะต้องมีประสบการณ์หรือความเชี่ยวชาญในการตรวจจับและจดจำจุลินทรีย์เหล่านี้เนื่องจากอาจมีผลลบเท็จหรือผลบวกปลอมอยู่ในผลลัพธ์
มีเทคนิคการส่องกล้องอื่น ๆ ที่ไวกว่า แต่มีราคาแพงกว่ามาก หนึ่งในเทคนิคดังกล่าวใช้การย้อมสี Auramine-O เพื่อให้ได้สารเรืองแสงสีเขียวหรือการย้อมสี Auramine O / Rhodamine B เพื่อสังเกตการเรืองแสงสีเหลือง / ส้ม
โดยทั่วไปกรณีที่เป็นบวกจะดำเนินการเพื่อการเพาะเชื้อและการใช้ยาปฏิชีวนะเพื่อยืนยันการวินิจฉัยและการเลือกการรักษาที่เหมาะสม
กล้องจุลทรรศน์สเมียร์มีไว้ทำอะไร?
วัณโรคเป็นโรคติดเชื้อที่มีผลต่อปอดและอวัยวะอื่น ๆ และระบบอวัยวะของร่างกาย เป็นโรคติดต่อที่ก่อให้เกิดการบาดเจ็บร้ายแรงต่อระบบทางเดินหายใจซึ่งหากไม่ได้รับการรักษาอย่างถูกต้องอาจทำให้ผู้ป่วยเสียชีวิตได้
วัณโรคจะถูกส่งผ่านทางละอองที่ลอยอยู่ในอากาศจากการคาดหวังของผู้ป่วยที่ติดเชื้อวัณโรคปอด ละอองขนาดเล็กเหล่านี้สามารถคงอยู่ในอากาศและมีความสามารถในการติดเชื้อจากผู้ที่หายใจเข้าไป
M. tuberculosis cells (ที่มา: NIAID / CC BY (https://creativecommons.org/licenses/by/2.0) ผ่าน Wikimedia Commons)
การติดเชื้อต้องใช้เวลาติดต่อเป็นเวลานานกับผู้ป่วยที่ติดเชื้อซึ่งพ่นบาซิลลัสอย่างต่อเนื่องในสภาพแวดล้อมที่มีการระบายอากาศไม่ดี ผู้ที่มีภูมิคุ้มกันบกพร่องมีแนวโน้มที่จะติดเชื้อ
ผู้ป่วยที่ติดเชื้อเอชไอวีมีแนวโน้มที่จะเกิดการติดเชื้อทางเดินหายใจที่รุนแรงรวมทั้งวัณโรคปอด ดังนั้นความสำคัญของกล้องจุลทรรศน์แบบสเมียร์จึงเป็นวิธีการวินิจฉัยวัณโรคที่รวดเร็วและราคาไม่แพง
กล้องจุลทรรศน์แบบสเมียร์ช่วยให้สามารถวินิจฉัยวัณโรคด้วยแบคทีเรียได้อย่างไรก็ตามผลบวกต้องได้รับการยืนยันด้วยการศึกษาอื่น ๆ
การศึกษาที่ยืนยันการวินิจฉัยวัณโรค ได้แก่ การตรวจทางรังสีวิทยาที่แสดงภาพลักษณะเฉพาะในกลีบบนของปอดการทดสอบวัณโรคในเชิงบวกและการเพาะเลี้ยงตัวอย่างที่เป็นบวก
ละเลงลบ
กล้องจุลทรรศน์สเมียร์ลบไม่จำเป็นต้องแยกแยะการวินิจฉัยวัณโรคเนื่องจากโดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อตัวอย่างเป็นเสมหะการกำจัดแบคทีเรียจะไม่คงที่ ดังนั้นในกรณีเหล่านี้เมื่อสงสัยการวินิจฉัยจึงจำเป็นต้องมีตัวอย่างแบบอนุกรม
smear บวก
กล้องจุลทรรศน์สเมียร์ที่เป็นบวกบ่งบอกถึงวัณโรคและต้องได้รับการยืนยันด้วยการศึกษาเสริมอื่น ๆ เมื่อใดก็ตามที่ผลออกมาเป็นบวกควรทำการเพาะเชื้อและให้ยาปฏิชีวนะ
เมื่อสร้างการรักษาแล้วการลดลงอย่างต่อเนื่องของระดับ positivity ของกล้องจุลทรรศน์ smear จนกว่าจะได้ผลลัพธ์ที่เป็นลบจะช่วยให้สามารถควบคุมผลประโยชน์ของการรักษาได้
อ้างอิง
- อาซิซ, แมสซาชูเซตส์ (2002). การประเมินคุณภาพภายนอกสำหรับ AFB smear microscopy
- เดสิกัน, ป. (2556). Sputum smear microscopy ในวัณโรค: ยังเกี่ยวข้องหรือไม่. วารสารการวิจัยทางการแพทย์ของอินเดีย, 137 (3), 442
- Fauci, AS, Kasper, DL, Hauser, SL, Jameson, JL และ Loscalzo, J. (2012) หลักการแพทย์ภายในของแฮร์ริสัน (ฉบับ 2555) DL Longo (Ed.) นิวยอร์ก: Mcgraw-hill
- Ngabonziza, JCS, Ssengooba, W. , Mutua, F. , Torrea, G. , Dushime, A. , Gasana, M. , … & Muvunyi, CM (2016). ประสิทธิภาพการวินิจฉัยของกล้องจุลทรรศน์สเมียร์และผลผลิตที่เพิ่มขึ้นของ Xpert ในการตรวจหาวัณโรคปอดในรวันดา BMC โรคติดเชื้อ, 16 (1), 660.
- Sardiñas, M. , García, G. , Rosarys, MM, Díaz, R. , & Mederos, LM (2016). ความสำคัญของการควบคุมคุณภาพของ bacilloscopy ในห้องปฏิบัติการที่ทำการวินิจฉัยวัณโรค วารสารโรคติดเชื้อของชิลี: อวัยวะอย่างเป็นทางการของสมาคมโรคติดเชื้อชิลี, 33 (3), 282-286
- Sequeira de Latini, MD, & Barrera, L. (2008). คู่มือการวินิจฉัยวัณโรคแบคทีเรีย: มาตรฐานและคำแนะนำทางเทคนิค: ตอนที่ 1 กล้องจุลทรรศน์สเมียร์ ในคู่มือการวินิจฉัยวัณโรคแบคทีเรีย: มาตรฐานและคู่มือทางเทคนิค: ตอนที่ 1 กล้องจุลทรรศน์สเมียร์ (หน้า 64-64)