- มูลนิธิและวัสดุ
- วัสดุ
- ขั้นตอน
- การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์และกล้องจุลทรรศน์
- เทคนิค Faust ดั้งเดิม
- เทคนิคเฟาสต์โดยการหมุนเหวี่ยง
- ความได้เปรียบ
- ข้อเสีย
- อ้างอิง
เทคนิคเฟาสต์เป็นวิธีการที่ช่วยให้ความเข้มข้นของไข่บางส่วนและ / หรือตัวอ่อนของพยาธิที่มีอยู่ในอุจจาระโดยลอยได้ ใช้เมื่อการทดสอบ coproparasitological โดยตรงเป็นลบหรือเมื่อคุณต้องการได้ตัวอย่างที่สะอาดปราศจากเศษผง
วิธีการให้ความเข้มข้นสำหรับการตรวจด้วยโคโพรปาราซิโทโลยีมีสามประเภท: โดยการลอยโดยการตกตะกอนหรือโดยวิธีการที่รวมสองวิธีก่อนหน้านี้ วิธีการเหล่านี้เพิ่มโอกาสในการได้ผลลัพธ์ในเชิงบวก

การวิเคราะห์อุจจาระ
วิธีเฟาสต์ประกอบด้วยการผสมส่วนหนึ่งของตัวอย่างอุจจาระด้วยสารที่หนาแน่นกว่าไข่หรือพยาธิให้เข้มข้น สิ่งนี้ทำให้มีความหนาแน่นน้อยกว่าจึงลอยอยู่บนผิวน้ำ ของเหลวเหนือธรรมชาติจะถูกรวบรวมและดูภายใต้กล้องจุลทรรศน์เพื่อระบุและหาปริมาณ
วิธีนี้ใช้เพื่อให้เห็นภาพไข่ของหนอนพยาธิ ในขณะเดียวกันก็พิสูจน์แล้วว่าเป็นวิธีการที่ละเอียดอ่อนมากในการวินิจฉัย Giardia lamblia ซึ่งเป็นโปรโตซัวที่มีลักษณะเป็นแฟลเจลซึ่งแพร่หลายไปทั่วโลก ไม่แนะนำให้ใช้วิธีการลอยตัวสำหรับไข่พยาธิที่มีน้ำหนักมากเช่นพยาธิตัวตืดและพยาธิใบไม้
ปรสิตเป็นหนึ่งในการติดเชื้อในลำไส้ที่แพร่หลายที่สุดทั่วโลกโดยเฉพาะในประเทศยากจนที่มีมาตรการสุขอนามัยที่ไม่ดี ด้วยเหตุนี้การมีวิธีการที่ละเอียดอ่อนในการระบุและหาปริมาณปรสิตเหล่านี้จึงมีประโยชน์มากสำหรับการวินิจฉัยและการรักษา
มูลนิธิและวัสดุ
เทคนิคนี้ขึ้นอยู่กับการดำรงอยู่ของความโน้มถ่วงเฉพาะที่แตกต่างกันของไข่พยาธิซีสต์ตัวอ่อนและเศษซากโดยใช้สารละลายสังกะสีซัลเฟตเป็นวิธีการลอย
เหตุผลเบื้องหลังเทคนิคนี้คือการผสมตัวอย่างกับสารละลายสังกะสีซัลเฟตที่มีความหนาแน่นมากกว่าไข่ที่มีน้ำหนักเบาตัวอ่อนหรือปรสิต
สิ่งนี้ช่วยให้องค์ประกอบที่หนักกว่าตกตะกอนและองค์ประกอบที่เบากว่าลอยตัวซึ่งปรากฏในส่วนเหนือตะกอนหลังจากการหมุนเหวี่ยงของตัวอย่าง
วัสดุ

ภาชนะสำหรับเก็บตัวอย่างอุจจาระ (ที่มา: Bobjgalindo ผ่าน Wikimedia Commons)
- เตรียมสารละลายสังกะสีซัลเฟตที่มีความหนาแน่น 1.18 หรือ 1.2 ก. / มล. หากได้รับการบำบัดตัวอย่างก่อนหน้านี้
- เตรียมชั้นวางพร้อมหลอดทดลองที่ติดฉลากก่อนหน้านี้
- มีเครื่องหอยโข่ง.
- มีกล้องจุลทรรศน์สไลด์และแผ่นปิดในมือ ต้องติดป้ายกำกับทั้งหมด
- ตรวจสอบให้แน่ใจว่ามีน้ำยาของ Lugol สำหรับเปื้อนผ้าปูที่นอน
- มีผ้าโปร่งให้กรอง
- มีช่องทางและน้ำกลั่น
- ค้นหาภาชนะพลาสติกหรือกระดาษแข็งที่มีฉลาก
- นอกจากนี้แอพพลิเคชั่นและด้ามจับปลอดเชื้อขนาด 5 มม.
- ไฟแช็กเพื่อฆ่าเชื้อที่จับ
ขั้นตอน
การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์และกล้องจุลทรรศน์
สำหรับการตรวจอุจจาระการตรวจจะเริ่มต้นด้วยสิ่งที่เรียกว่า "การตรวจขั้นต้น" ของตัวอย่าง
มีการอธิบายความสอดคล้องสีการปรากฏตัวของสิ่งที่ดูเหมือนจะเป็นเลือดการมีเมือกและการปรากฏตัวของปรสิตที่เป็นผู้ใหญ่
จากนั้นเราไปที่ "การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์" ของอุจจาระซึ่งขึ้นอยู่กับวิธีการ วิธีที่ง่ายที่สุดคือวิธีการ smear โดยตรงซึ่งเป็นวิธีสังเกตพยาธิด้วยกล้องจุลทรรศน์ที่ง่ายที่สุด

ภาพถ่ายการสังเกต Gardia lamblia ซึ่งเป็นปรสิตในลำไส้ (ที่มา: Riddlemaster จาก Wikimedia Commons)
ขั้นตอนนี้เกี่ยวข้องกับการวางตัวอย่างจำนวนเล็กน้อยลงบนสไลด์โดยตรง หยดน้ำเกลือหลาย ๆ หยดที่ควรมีขนาดใกล้เคียงกับตัวอย่าง ผสมน้ำเกลือกับอุจจาระจนส่วนผสมเป็นเนื้อเดียวกัน ใส่แผ่นปิดและตรวจดูใต้กล้องจุลทรรศน์
เทคนิค Faust ดั้งเดิม
ขั้นตอนที่สองประกอบด้วยวิธีการลอยแบบเฟาสต์ซึ่งเวอร์ชันดั้งเดิมประกอบด้วย:
1- ใส่อุจจาระประมาณสองกรัมในภาชนะที่เหมาะสมเพื่อการนี้
2- เติมสารละลายสังกะสีซัลเฟต 30 มล. ซึ่งทำอิมัลชันโดยการผสมสารละลายกับอุจจาระ
3- กรองด้วยกระชอนโลหะลงในภาชนะที่สองแล้วถ่ายโอนไปยังหลอดทดลอง
4- เพิ่มสารละลายลอยมากขึ้นจนกว่าวงเดือนจะก่อตัวขึ้นในท่อ
5- วางฝาแก้วไว้บนวงเดือน พักไว้ประมาณ 10 ถึง 15 นาที
6- ถอดฝาปิดและวางไว้บนสไลด์ซึ่งจะถูกตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์
เทคนิคเฟาสต์โดยการหมุนเหวี่ยง
แต่เดิมวิธีนี้ไม่ได้ใช้การหมุนเหวี่ยงอย่างไรก็ตามตอนนี้ได้รวมเอาไว้แล้วเมื่อได้ผลลัพธ์ที่ดีขึ้น เทคนิคนี้เกี่ยวข้องกับขั้นตอนต่างๆเพื่อให้บรรลุขั้นตอนที่เหมาะสมซึ่งมีดังนี้:
1- อุจจาระล้างด้วยน้ำผสมให้เข้ากันแล้วกรองด้วยผ้ากอซพับเป็นสี่ส่วน ตัวอย่างวางในหลอดทดลอง
2- เครื่องหมุนเหวี่ยงและเอาส่วนเหนือตะกอนออก (ตัวอย่างที่เก็บไว้เหนือน้ำ) ทำซ้ำขั้นตอนที่ 1 และ 2 จนกว่าสิ่งเหนือชั้นจะ "ชัดเจน"
3- สังกะสีซัลเฟตถูกเติมลงในตัวอย่างที่กรองและหมุนเหวี่ยง
4- มันเข้ากันได้ดี
5- หมุนเหวี่ยงอีกครั้งเป็นเวลา 1 นาทีที่ 2500 รอบต่อนาที (รอบต่อนาที)
6- ส่วนเหนือตะกอนจะถูกกู้คืนด้วยห่วงที่ปราศจากเชื้อประมาณ 5 มม. ไม่ควรเขย่าท่อ
7- ตัวอย่างที่กู้คืนจากสิ่งเหนือชั้นวางอยู่บนสไลด์และสามารถวาง Lugol ลงในสีได้วางฝาปิดและสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์
8- ภาชนะและหลอดทดลองมีฉลากกำกับ
ความได้เปรียบ
- องค์ประกอบที่ใช้ในการวินิจฉัยสามารถมองเห็นได้อย่างสะอาดและไม่มี“ เศษผง” สิ่งนี้จะช่วยให้สังเกตแผ่นได้ง่ายขึ้นและลดเวลาที่ใช้ในการวินิจฉัย
- ใน supernatant จะหายทั้งตัวอ่อนไข่และ / หรือซีสต์
- เป็นวิธีการที่มีต้นทุนต่ำมาก
- ขั้นตอนนี้ง่ายมากและใช้งานง่าย
- การวินิจฉัยรวดเร็วและแม่นยำ
- เนื่องจากความสำคัญและอุบัติการณ์สูงของโรคปรสิตในประเทศยากจนวิธีการที่มีต้นทุนต่ำและใช้งานง่ายเหล่านี้จึงเหมาะอย่างยิ่งสำหรับการวินิจฉัยและการติดตามโรคเหล่านี้
ข้อเสีย
ความหนาแน่นของสารละลายลอยทำให้เกิดการหดตัวของตัวอ่อนนั่นคือพวกมันหดตัวและในช่วงเวลาสั้น ๆ อาจทำให้เสียรูปได้ สิ่งนี้บังคับให้ผู้ตรวจวินิจฉัยโรคทันทีและไม่สามารถเก็บตัวอย่างที่ได้รับการรักษาไว้เพื่อการตรวจในอนาคต
เช่นเดียวกับวิธีการระบุตัวตนด้วยกล้องจุลทรรศน์เจ้าหน้าที่ตรวจสอบที่มีประสบการณ์สูงจะต้องทำการวินิจฉัยที่แม่นยำ
ความผิดปกติอย่างรวดเร็วขององค์ประกอบที่จำเป็นสำหรับการวินิจฉัยแม้ว่าจะเป็นข้อเสียที่เห็นได้ชัด แต่ก็สามารถแก้ไขได้โดยการสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์ทันที
อ้างอิง
- Ananias, ฟลอริดา (2017). การประเมินความไวของวิธีเฟาสต์และการตกตะกอนที่เกิดขึ้นเองสำหรับการวินิจฉัยโรค giardiasis Cuban Journal of Tropical Medicine, 68 (2).
- Bartlett, MS, Harper, K. , Smith, N. , Verbanac, P. , & Smith, JW (1978) การประเมินเปรียบเทียบเทคนิคการลอยสังกะสีซัลเฟตที่ปรับเปลี่ยนแล้ว วารสารจุลชีววิทยาคลินิก, 7 (6), 524-528.
- Becker, AC, Kraemer, A. , Epe, C. , & Strube, C. (2016). ความไวและประสิทธิภาพของการตกตะกอนด้วยวิธีโคโปรสโคปิคัลที่เลือกการตกตะกอน - การตกตะกอนของสังกะสีซัลเฟตร่วมกันและวิธี McMaster การวิจัยปรสิตวิทยา, 115 (7), 2581-2587.
- Garcia, LS, Arrowood, M. , Kokoskin, E. , Paltridge, GP, Pillai, DR, Procop, GW, … & Visvesvara, G. (2018). การวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการของปรสิตจากระบบทางเดินอาหาร ความคิดเห็นทางจุลชีววิทยาทางคลินิก, 31 (1), e00025-17.
- ซัมเมอร์สวอชิงตัน (2485) การปรับเปลี่ยนวิธีการลอยตัวแบบแรงเหวี่ยงของสังกะสีซัลเฟตสำหรับการฟื้นตัวของหนอนพยาธิ ova ในอุจจาระฟอร์มาลิน วารสารปรสิตวิทยา, 28 (4), 345-346.
