โรสเบงกอลคือการทดสอบในห้องปฏิบัติการโดยอาศัยปฏิกิริยาของแอนติเจน - แอนติบอดีสำหรับการวินิจฉัยโรคแท้งติดต่อ เทคนิคนี้ช่วยให้สามารถตรวจหาแอนติบอดีจำเพาะต่อแบคทีเรีย Brucella abortus ในตัวอย่างซีรั่มของมนุษย์ ผลลัพธ์สามารถรายงานในเชิงคุณภาพหรือกึ่งเชิงปริมาณ
รูปแบบเชิงคุณภาพเป็นการแสดงออกว่าผู้ป่วยเป็นบวกหรือลบสำหรับการทดสอบนั่นคือมีแอนติบอดีหรือไม่ ในขณะเดียวกันรายงานกึ่งปริมาณจะรายงานใน IU / ml และระบุจำนวนแอนติบอดีโดยประมาณที่มีอยู่ ควรสังเกตว่าแอนติบอดีจะผลิตได้ก็ต่อเมื่อผู้ป่วยสัมผัสกับจุลินทรีย์
ปฏิกิริยาโรสเบงกอลในแผ่นเกาะกลุ่ม ที่มา: นำมาจากวิดีโอ https://youtu.be/igAVQ-GiyGY
เนื่องจากมีความเรียบง่ายความไวสูงและความจำเพาะจึงเป็นหนึ่งในเทคนิคเซโรแอกลูทิเนชันที่ใช้มากที่สุดในทางการแพทย์เพื่อเป็นการทดสอบเบื้องต้นสำหรับการวินิจฉัยโรคนี้
นักวิจัยบางคนได้เปรียบเทียบประสิทธิภาพของการทดสอบ Rose Bengal กับเทคนิคอื่น ๆ เช่น seroagglutination (แอนติเจนของไข้) และสังเกตว่าแม้ว่าจะมีความสัมพันธ์ที่ดี แต่ก็พบบางกรณีที่การทดสอบแอนติเจนของไข้เป็นลบและ Rose de เปลวไฟบวก
ความแตกต่างที่ได้รับเกิดจากการที่ผู้ป่วยเหล่านี้มีแอนติบอดี IgG ระดับย่อยต่อ Brucella abortus ซึ่งมีความสามารถในการจับตัวที่ดีกว่าที่ pH เป็นกรดดังนั้นพวกเขาจึงสามารถทำปฏิกิริยากับน้ำยาโรสเบงกอลได้ แต่ไม่ใช่กับแอนติเจนของไข้
ในแง่นี้พวกเขาได้แนะนำว่าควรปรับเปลี่ยนรีเอเจนต์ของเทคนิคแอนติเจนไข้ให้มีค่า pH ที่เป็นกรดเพื่อให้สามารถตรวจจับกรณีประเภทนี้ได้
รากฐาน
รีเอเจนต์โรสเบงกอลประกอบด้วยสารแขวนลอยแอนติเจน ประกอบด้วย Brucella abortus สายพันธุ์ S99 เจือจางในบัฟเฟอร์แลคเตทที่เป็นกรด (pH 3.6) บวกฟีนอลและสีย้อมโรสเบงกอล
ดังนั้นในตัวอย่างสิ่งที่ต้องการคือแอนติบอดีต่อต้าน Brucella หากมีอยู่พวกมันจะทำปฏิกิริยากับแอนติเจนของรีเอเจนต์และจะสังเกตเห็นปฏิกิริยาการเกาะติดกันที่มองเห็นได้ในระดับมหภาค การทดสอบจะตรวจหาแอนติบอดี IgM หรือแอนติบอดี IgG
ซึ่งหมายความว่าสามารถตรวจพบโรคได้ทั้งในระยะเฉียบพลันที่แอนติบอดี IgM มีชัยหรือในระยะเรื้อรังที่แอนติบอดี IgG มีอำนาจเหนือกว่า
สิ่งนี้แสดงถึงข้อได้เปรียบเนื่องจากเพิ่มความไวของการทดสอบ แต่ในขณะเดียวกันก็เป็นข้อเสียเนื่องจากไม่ได้แยกแยะระหว่างขั้นตอนหนึ่งกับอีกขั้นหนึ่งเนื่องจากปฏิกิริยากับแอนติบอดี IgM และ IgG เหมือนกัน
การทดสอบจะต้องดำเนินการร่วมกับการควบคุมเชิงลบและการควบคุมเชิงบวกเสมอ การควบคุมเชิงลบประกอบด้วยซีรั่มจากสัตว์ที่ไม่มีแอนติบอดีและการควบคุมเชิงบวกประกอบด้วยซีรั่มที่มาจากสัตว์ที่มีแอนติบอดีต่อต้านบรูเซลลา 50 IU / ml
ใช้
โรคบรูเซลโลซิสเป็นโรคร้ายแรงที่มีแนวโน้มที่จะเรื้อรังและเป็นอันตรายดังนั้นจึงเป็นเรื่องสำคัญมากที่จะต้องได้รับการวินิจฉัย แต่เนิ่นๆ เป็นโรคซูนโนซิสและมนุษย์สามารถติดเชื้อได้จากการสัมผัสโดยตรงกับวัสดุที่ปนเปื้อนคนที่เปราะบางที่สุดคือสัตวแพทย์และผู้ดูแลสัตว์
การติดเชื้ออาจเกิดขึ้นได้จากการกินเนื้อสัตว์ดิบที่ติดเชื้อรวมถึงการติดเชื้อในรูปแบบอื่น ๆ
โรคนี้โจมตีในพื้นที่หรือในระบบ รูปแบบระบบเป็นสิ่งที่ร้ายแรงที่สุดเนื่องจากอวัยวะต่างๆอาจได้รับผลกระทบรวมถึงระบบเยื่อบุผนังหลอดเลือดเรติคูลัม (ตับม้ามไขกระดูก) ผิวหนัง (เซลลูไลติสและต่อมน้ำเหลือง) ระบบทางเดินหายใจ (ปอดบวม) ระบบกล้ามเนื้อและกระดูก (โรคไขข้อ, sacroiliitis และ spondylitis) และอื่น ๆ
การทดสอบโรสเบงกอลเป็นเทคนิคที่มีประโยชน์มากในการตรวจคัดกรองเบื้องต้นเนื่องจากมีราคาไม่แพงมากใช้งานง่ายและมีความจำเพาะและความไวสูง
กรณีของผลลบเท็จและผลบวกเท็จนั้นหายากมากและสามารถเกิดขึ้นได้ในผู้ที่มีระดับแอนติบอดีต่ำมาก (<25 IU / ml) หรือสูงมาก (> 1,000 IU / ml) ตามลำดับ
กระบวนการ
วัสดุ
- โรสเบงกอลคิท
- พื้นหลังสีขาวจานสลับ
ปิเปต -50 µl
-Rotator (อุปกรณ์เสริม)
- กระแสน้ำวน
เทคนิค (วิธีเชิงคุณภาพ)
ชุดกุหลาบเบงกอลในเชิงพาณิชย์มาพร้อมกับน้ำยาที่พร้อมใช้งาน
- เตรียมน้ำยาก่อนเริ่มทำงาน
- แผ่นยึดเกาะมีวงกลมวาดแต่ละอันสำหรับตัวอย่างที่แตกต่างกัน ใช้วงกลม 3 วงวงแรกสำหรับตัวควบคุมเชิงลบวงที่สองสำหรับกลุ่มตัวอย่างและวงที่สามสำหรับการควบคุมเชิงบวก
- วางตัวควบคุมลดลงหรือ 50 µl และตัวอย่างในวงกลมที่เกี่ยวข้อง
- ผสมน้ำยาโรสเบงกอลโดยใช้กระแสน้ำวน วางหยดถัดจากที่วางไว้ก่อนหน้านี้
- ผสมกับไม้จิ้มฟัน (ใช้อย่างใดอย่างหนึ่งสำหรับแต่ละชิ้นงานหรือตัวควบคุม) เคลื่อนไหวเป็นวงกลมและกระจายเพื่อให้ครอบคลุมทั้งวงกลม
ที่มา: ภาพที่นำมาจากวิดีโอ: https://youtu.be/igAVQ-GiyGY เลย์เอาต์รูปภาพที่แก้ไขแล้ว
- วางจานบนโรเตเตอร์อัตโนมัติที่ 80 ถึง 100 รอบต่อนาทีหรือหมุนด้วยตนเองเป็นเวลา 4 นาที อ่านบทพิสูจน์ในตอนท้ายของเวลานี้
- ตรวจสอบว่าการควบคุมให้ตามที่คาดไว้ เปรียบเทียบปฏิกิริยาของตัวอย่างทดสอบกับส่วนควบคุม รายงานว่าเป็นบวกหากสังเกตเห็นการเกาะติดกันและเป็นลบหากไม่มีการรวมตัวกัน
การทดสอบในเชิงบวกบ่งชี้ว่าผู้ป่วยมีแอนติบอดีต่อต้าน Brucella เท่ากับหรือมากกว่า 25 IU / ml
การแปลความหมายของปฏิกิริยาเชิงบวก (ที่มีการเกาะติดกัน) และเชิงลบ (โดยไม่มีการเกาะติดกัน) ที่มา: Citrulline รูปภาพที่แก้ไข
เทคนิค (กึ่งเชิงปริมาณ)
หากในปฏิกิริยาเชิงคุณภาพตัวอย่างมีค่าเป็นบวกอย่างมากก็สามารถเป็นกึ่งปริมาณได้ สำหรับสิ่งนี้การเจือจางสองครั้งแบบอนุกรมของตัวอย่างทำด้วยน้ำเกลือทางสรีรวิทยา ขั้นตอนที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ดำเนินการกับการเจือจางแต่ละครั้ง
นอกจากนี้ยังตีความโดยการสังเกตการเกาะติดกันแบบมาโครสโคปิก ผลลัพธ์จะเป็น titer ของการเจือจางสูงสุดซึ่งสังเกตเห็นผลบวก
ในการคำนวณค่าโดยประมาณของแอนติบอดีต่อต้านบรูเซลลาจะใช้สูตรต่อไปนี้:
25 IU / ml x titer ปฏิกิริยา = IU / ml
ตัวอย่างเช่นหากผู้ป่วยในการทดสอบกึ่งปริมาณทดสอบเป็นบวกที่การเจือจาง½, ¼และ 1/8 และเริ่มเป็นลบตั้งแต่การเจือจาง 1/16 เป็นต้นไปหมายความว่าผู้ป่วยมี titer เท่ากับ 8 .
ใช้สูตร:
25 IU / มล. x 8 = 200 IU / มล
ระบบประกันคุณภาพ
- ชุดอุปกรณ์มีวันหมดอายุและต้องเคารพ ไม่ควรใช้หากน้ำยาหมดอายุ
- ระหว่างการใช้งานตรวจสอบให้แน่ใจว่ารีเอเจนต์ไม่มีอนุภาคของแข็งเนื่องจากเป็นสัญญาณของการเสื่อมสภาพ
- ให้อยู่ระหว่าง 2 ถึง 8 ° C
- อย่าแช่แข็งการกระทำนี้จะสร้างความเสียหายให้กับน้ำยาโดยไม่สามารถแก้ไขได้
- ทำการทดสอบร่วมกับการควบคุมเชิงลบและเชิงบวกเสมอ
- เทคนิคนี้สามารถทนต่อตัวอย่างซีรั่มที่มีภาวะไขมันในเลือดสูงและเม็ดเลือดแตกได้ในระดับหนึ่งอย่างไรก็ตามไม่แนะนำให้ใช้ซีรั่มที่มีไขมันในเลือดและเม็ดเลือดแดงมากเกินไปทั้งสองเงื่อนไขจะเปลี่ยนแปลงผลการทดสอบ
- ควรนำรีเอเจนต์ไปไว้ในอุณหภูมิห้องก่อนเริ่มการวิเคราะห์ทุกครั้ง
- อย่าตีความปฏิกิริยาที่ใช้เวลานานกว่าเวลาที่แนะนำเนื่องจากจะสร้างรายงานผลบวกเท็จเนื่องจากหลังจากเวลาผ่านไประยะหนึ่งรีเอเจนต์จะตกตะกอนจำลองปฏิกิริยาเชิงบวก
- เทคนิคนี้มีความละเอียดอ่อน 100% และมีความจำเพาะ 98%
- หลังจากการหาค่ากึ่งปริมาณ 1,000 IU / ml มีความเป็นไปได้ที่จะสังเกตเห็นผลของโปรโซน (ผลลบเท็จเนื่องจากแอนติบอดีส่วนเกินเมื่อเทียบกับปริมาณแอนติเจน)
อ้างอิง
- Rubio M, Barrio B และDíaz R. มูลค่าของ Rosa de Bengala, Coombs และการทดสอบภูมิคุ้มกันแบบต่อต้านอิมมูโนอิเล็กโตรโฟเรซิสเพื่อวินิจฉัยกรณีของโรคแท้งติดต่อในมนุษย์ซึ่งการรวมตัวกันในซีรัมเป็นลบ ภาควิชาจุลชีววิทยา. บริการจุลชีววิทยาคลินิก. คลินิกมหาวิทยาลัย. มหาวิทยาลัยนาวาร์รา 406-407 มีจำหน่ายที่: elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas
- “ โรคแท้งติดต่อ” Wikipedia สารานุกรมเสรี 6 ธ.ค. 2019, 14:37 น. UTC. 18 ธ.ค. 2019, 18:09 น. th.wikipedia.org.
- Monlab Laboratories. Monlab Bengal Rose - การทดสอบ 2559 ดูได้ที่: monlab.es/
- Carrillo C, Gotuzzo E. Brucellosis รายได้เปรู Med Exp. สาธารณสุข 2540; 14 (1): 63-66. มีจำหน่ายที่: scielo.org
- Morales-García R, García-Méndez N, Regalado-Jacobo D, López-Merino A, Contreras-Rodríguez A. การติดตามผลปฏิกิริยาลูกโซ่ทางคลินิกเซรุ่มวิทยาและโพลีเมอเรสของครอบครัวที่เป็นโรคแท้งติดต่อ รายได้ chil. Infectol. 2014; 31 (4): 425-433 มีจำหน่ายที่: scielo.conicyt