การย้อมสีง่ายๆคืออะไร? คุณสมบัติที่โดดเด่น - ชีววิทยา - 2025

การย้อมสีเดี่ยวเป็นขั้นตอนการย้อมสีที่ง่ายและรวดเร็วซึ่งใช้สีย้อมเดียวจึงเรียกว่าง่าย ส่วนใหญ่จะใช้เพื่อกำหนดลักษณะทางสัณฐานวิทยาและการจัดระเบียบของเซลล์ที่มีอยู่ในตัวอย่าง

เซลล์ไม่มีสีตามธรรมชาติดังนั้นจึงจำเป็นต้องทำให้มองเห็นได้ไม่ทางใดก็ทางหนึ่งเมื่อมองด้วยกล้องจุลทรรศน์

เซลล์แก้มของมนุษย์ถูกย้อมด้วยการย้อมสีเมทิลีนบลูอย่างง่าย

สิ่งสำคัญคือต้องสังเกตว่าสีย้อมที่ใช้ในการย้อมสีอย่างง่ายจะต้องเป็นสีพื้นฐานที่มีประจุบวก (ประจุบวก) เพื่อที่จะสามารถจับกับผนังเซลล์และไซโทพลาสซึมได้เอง

โครงสร้างเซลล์เหล่านี้มีประจุลบ นี่คือสาเหตุที่สีย้อมที่มีประจุบวกดึงดูดเข้าสู่เซลล์และผูกติดกับพวกมันโดยธรรมชาติ ดังนั้นเซลล์ทั้งหมดที่มีอยู่ในตัวอย่างจึงถูกย้อมสีอย่างรวดเร็ว

สีย้อมที่ใช้ในการย้อมสีธรรมดา

มีคราบพื้นฐานหลายอย่างที่สามารถใช้ในห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยา ใช้มากที่สุด ได้แก่ :

- เมทิลีนบลู

- คริสตัลไวโอเล็ต

- มาลาไคต์สีเขียว

- Fuchsin พื้นฐาน

สีย้อมเหล่านี้ทั้งหมดทำงานได้ดีในแบคทีเรียเนื่องจากมีไอออนสี (โครโมโซม) ที่มีประจุบวก (ประจุบวก)

เวลาในการย้อมสำหรับคราบเหล่านี้ส่วนใหญ่ค่อนข้างสั้น โดยทั่วไปจะอยู่ในช่วง 30 วินาทีถึง 2 นาทีขึ้นอยู่กับความสัมพันธ์ของสีย้อม

เป็นสิ่งสำคัญที่ต้องจำไว้ว่าก่อนที่จะย้อมตัวอย่างด้วยการย้อมสีแบบง่ายจะต้องขยายและยึดกับสไลด์กระจก (สไลด์) ตัวอย่างที่ขยายและคงที่เรียกว่าสเมียร์

6 ขั้นตอนในการย้อมสีง่ายๆ

ขั้นตอนที่ 1

วางสไลด์บนตะแกรงย้อมสีแล้วทาคราบที่ต้องการ ให้เวลาที่สอดคล้องกันทำหน้าที่

โดยทั่วไปการย้อมสีแบบธรรมดาจะใช้เวลาไม่กี่วินาทีถึงสองสามนาทีขึ้นอยู่กับคราบที่ใช้

การสังเกต

ในขั้นตอนนี้สิ่งสำคัญคือต้องไม่เกินเวลาที่แนะนำสำหรับสีย้อมที่ใช้เนื่องจากผลึกอาจก่อตัวบนแผ่นงานทำให้เกิดสิ่งที่เรียกว่า "สิ่งประดิษฐ์" ที่บิดเบือนสัณฐานวิทยาของเซลล์

ขั้นตอนที่ 2

ล้างสเมียร์จากสไลด์ให้ทั่วด้วยน้ำกลั่นจากขวดหรือน้ำประปาที่ไหลช้าๆจนกว่าน้ำจะใส โดยปกติจะใช้เวลา 5-10 วินาที

การสังเกต

อย่าใช้กระแสน้ำโดยตรงบนรอยเปื้อนเพื่อหลีกเลี่ยงไม่ให้แรงของสารชนิดเดียวกันทำให้ตัวอย่างเสียหาย

หากคุณไม่มีน้ำกลั่นคุณสามารถใช้น้ำประปาได้โดยไม่มีปัญหาเนื่องจากจะไม่ส่งผลต่อผลของการย้อมสี

ขั้นตอนที่ 3

ซับสไลด์ด้วยกระดาษทิชชู่ซับในทิศทางเดียวโดยไม่ต้องถู ตรวจสอบให้แน่ใจว่าด้านล่างของสไลด์สะอาด

ขั้นตอนที่ 4

สังเกตรอยเปื้อนใต้กล้องจุลทรรศน์ เริ่มต้นด้วยวัตถุประสงค์ที่ห่างไกลที่สุดเพื่อค้นหาพื้นที่ที่คุณต้องการสังเกตอย่างถูกต้องโดยละเอียดยิ่งขึ้น เปลี่ยนวัตถุประสงค์เพื่อเข้าใกล้ตัวอย่างมากขึ้นเรื่อย ๆ

การสังเกต

สำหรับการใช้งานตามวัตถุประสงค์ที่มีกำลังขยายสูงกว่า (ปกติ 100X) ควรใช้น้ำมันแช่เนื่องจากจะช่วยให้แสงทะลุผ่านได้ดีขึ้นและภาพดูคมชัดขึ้น ไม่จำเป็นต้องใช้ผ้าปิดปาก

ขั้นตอนที่ 5

สุดท้ายทิ้งตัวอย่างทั้งหมดในภาชนะที่เหมาะสมซึ่งมีข้อความว่า "อันตรายทางชีวภาพ" อย่างเหมาะสม

อ้างอิง

1. (2001) การประยุกต์ใช้งานทางจุลชีววิทยา: ห้องปฏิบัติการคู่มือการใช้งานทั่วไปจุลชีววิทยา (8 ^TH Ed.) บริษัท McGraw-Hill
2. ฮาริชา, S. (2549). ความรู้เบื้องต้นเกี่ยวกับเทคโนโลยีชีวภาพเชิงปฏิบัติ (1 ^st ) สื่อไฟร์วอลล์
3. Moyes, RB, Reynolds, J. , & Breakwell, DP (2009) คราบแบคทีเรียเบื้องต้น: คราบง่าย Current Protocols in Microbiology, (SUPPL. 15), 1–5.
4. Pommerville, J. (2013). ห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยาพื้นฐานของ Alcamo (10 ^th ) การเรียนรู้ของ Jones & Bartlett
5. เพรสคอตต์, H. (2002). แบบฝึกหัดในห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยา (5 ^th ). บริษัท McGraw-Hill
6. Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). หลักการจุลชีววิทยา (1 ^st ) การศึกษา Tata McGraw-Hill