STUART MEDIUM: รองพื้นการเตรียมและการใช้งาน - ชีววิทยา - 2025

กลางจวร์ตเป็นวุ้นกึ่งแข็งหรือน้ำซุปโดยไม่ต้องสารอาหารที่ใช้สำหรับการขนส่งตัวอย่างทางชีวภาพ จุดประสงค์คือเพื่อให้สายพันธุ์ที่มีอยู่ในตัวอย่างคงอยู่ได้ในช่วงเวลาหนึ่ง แต่ไม่ต้องเพิ่มจำนวนจุลินทรีย์

สร้างขึ้นโดย Moffet, Young และ Stuart ในปีพ. ศ. 2491 และต่อมาได้รับการแก้ไขโดย Toshach และ Patsula ประกอบด้วยโซเดียมกลีเซอโรฟอสเฟตโซเดียมไธโอไกลโคเลตแคลเซียมคลอไรด์และวุ้น หลังมีอยู่ในตัวกลางกึ่งแข็งและไม่มีอยู่ในของเหลว ห้องปฏิบัติการบางแห่งเติมเมทิลีนบลูลงไป

วัฒนธรรมกับการขนส่งของ Stuart ที่มา: โดย: CDC / Dr. Gilda Jones มารยาท: ห้องสมุดภาพสาธารณสุข

โดยทั่วไปจะใช้เมื่อไม่สามารถหว่านตัวอย่างได้ทันที ในกรณีนี้ตัวอย่างจะถูกวางไว้ในสื่อการขนส่งในขณะที่ย้ายไปยังห้องปฏิบัติการที่จะดำเนินการเพาะเลี้ยง

ด้วยวิธีนี้จึงรับประกันได้ว่าจุลินทรีย์ที่มีอยู่จะยังมีชีวิตอยู่จนกว่าจะมีการฉีดวัคซีนในอาหารเลี้ยงเชื้อที่เกี่ยวข้อง

ในขั้นต้นการใช้งานมีวัตถุประสงค์เพื่อขนส่งตัวอย่างท่อปัสสาวะหรือช่องคลอดที่สงสัยว่ามี Neisseria gonorrhoeae ต่อมาพวกเขาตระหนักว่าประโยชน์ของมันอาจกว้างขึ้น

สารอาหาร Stuart มีประสิทธิภาพมากในการเก็บรักษาจุลินทรีย์ที่มีอาการอ่อนเพลียและจุกจิกเช่น Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertusis เป็นต้น นอกเหนือจากจุลินทรีย์อื่น ๆ ที่ไม่น่ารำคาญเช่น Enterobacteria

โดยพื้นฐานแล้วสาร Stuart จะป้องกันการผึ่งให้แห้งของตัวอย่างรักษาสมดุลออสโมติกและรักษาจุลินทรีย์ที่ pH ในอุดมคติ ในทางกลับกันสื่อนี้ไม่มีสารอาหารในเชิงกลยุทธ์จึงป้องกันไม่ให้จุลินทรีย์เพิ่มจำนวน

ในตลาดมีอุปกรณ์ขนส่งตัวอย่างพิเศษที่มีวิธีการขนส่งแบบนี้หรือแบบอื่นที่เรียกว่า culturette นอกจากนี้ยังสามารถเตรียมได้ในห้องปฏิบัติการ

รากฐาน

วัตถุประสงค์ของโหมดการขนส่งของ Stuart คือการรักษาตัวอย่างให้ใกล้เคียงกับสภาพเดิมจนกว่าจะได้รับการประมวลผล

โซเดียมกลีเซอโรฟอสเฟตและแคลเซียมคลอไรด์เป็นระบบบัฟเฟอร์ที่ทำงานโดยรักษา pH และ osmolarity

ในขณะเดียวกันโซเดียมไธโอไกลคอลเลตทำหน้าที่เป็นตัวรีดิวซ์และในกรณีที่มีวุ้นจะให้ความสม่ำเสมอกึ่งแข็งเพื่อชะลอการให้ออกซิเจนของตัวกลาง สุดท้ายเมทิลีนบลูเป็นตัวบ่งชี้การเกิดออกซิเดชันนั่นคือตรวจจับการมีอยู่ของออกซิเจน

ตัวกลางกึ่งแข็งที่มีตัวบ่งชี้รีดอกซ์เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการขนส่งตัวอย่างที่สงสัยว่ามีแบคทีเรียที่ไม่ใช้ออกซิเจน

ลักษณะของวิธีการขนส่ง

สื่อของ Stuart เช่นเดียวกับการขนส่งทุกประเภทตรงตามลักษณะบางประการ ได้แก่ :

- รักษาสายพันธุ์จุลินทรีย์ที่มีชีวิตอยู่โดยไม่ต้องเพิ่มจำนวน

- ไม่มีสารอาหาร สารประกอบของมันมีวัตถุประสงค์เพื่อทำให้ตัวอย่างมีความชุ่มชื้นภายใต้สภาวะ pH และ osmolarity ที่เพียงพอ

- ยับยั้ง autolyzate ของจุลินทรีย์ที่บอบบางบางชนิดเช่น Pneumococcus

- การใช้งานเป็นแบบชั่วคราวไม่ควรใช้เวลานานเกินไป

การจัดเตรียม

สื่อกึ่งแข็งของ Stuart พร้อมตัวบ่งชี้รีดอกซ์

การเตรียมบ้าน

ส่วนผสม

โซเดียมกลีเซอโรฟอสเฟต 10 กรัม

โซเดียมไธโอไกลคอลเลต 1.0 กรัม

แคลเซียมคลอไรด์ 0.1 กรัม

เมทิลีนบลู 0.002 กรัม

วุ้น 3 กรัม

น้ำกลั่น 1 ลิตร

ผสมส่วนประกอบและความร้อนจนละลายหมด เทลงในหลอดหรือไม้กวาดพิเศษ นำเข้าสู่หม้อนึ่งฆ่าเชื้อและฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิ121ºCเป็นเวลา 15 นาที ปล่อยให้ท่อเย็นลงในแนวตั้ง (ในรูปของบล็อก) เก็บที่อุณหภูมิห้อง

การเตรียมด้วยสื่อทางการค้า

น้ำหนัก 14.1 กรัมของกลางในน้ำกลั่น 1 ลิตร ความร้อนเขย่าบ่อยๆจนละลายหมดก็ต้มได้ ขั้นตอนที่เหลือตามที่อธิบายไว้แล้ว

ตัวกลางที่ขาดน้ำเป็นสีครีมและควรเป็นสีฟ้าบนพื้นผิว นี่คือสาเหตุที่มีเมทิลีนบลู

ต้องปรับ pH ของตัวกลางเป็น 7.4 ± 0.2

ของเหลวดัดแปลง Stuart Medium (แบบโฮมเมด)

ส่วนผสม

โซเดียมกลีเซอโรฟอสเฟต 10 กรัม

โซเดียมไธโอไกลคอลเลต 1 กรัม

แคลเซียมคลอไรด์ไดไฮเดรต 0.1 กรัม

น้ำกลั่น 1000 มล

มีส่วนผสมเช่นเดียวกับสารกึ่งแข็ง แต่ไม่มีวุ้นหรือเมทิลีนบลู ในกรณีนี้ส่วนประกอบจะถูกผสมโดยไม่ใช้ความร้อนและ 0.5 มล. จะถูกกระจายในท่อขนาด 16 x 125 มม. พร้อมฝาเกลียว

ฆ่าเชื้อในหม้อนึ่งที่อุณหภูมิ 121 ° C เป็นเวลา 10 นาที สำหรับการสุ่มตัวอย่างควรใช้ dacron swabs หากตัวอย่างมีไว้สำหรับ PCR หรือเรยอนหากเป็นการเพาะเชื้อ

หลอดจะถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง

การประยุกต์ใช้งาน

ในเชิงพาณิชย์มีอุปกรณ์ขนส่งตัวอย่างพิเศษที่เรียกว่า culturette; อุปกรณ์นี้เป็นท่อบาง ๆ ยาว ๆ ซึ่งมีไม้กวาดอยู่ด้านในและในตอนท้ายจะมีส่วนที่มีตัวกลางของสจวร์ตกึ่งของแข็งหรือของเหลว

อุปกรณ์ถูกเปิดและนำตัวอย่างด้วยไม้กวาด จากนั้นจะนำกลับเข้าไปในท่อจนกระทั่งปลายไม้กวาดสอดเข้าไปในตัวกลางขนส่งกึ่งแข็ง บางคนนำฟองน้ำโพลียูรีเทนชุบน้ำยาสจวร์ตตัวกลางซึ่งตัวอย่างจะถูกเก็บรักษาไว้เมื่อเปียก

ในกรณีที่สงสัยว่ามีจุลินทรีย์ที่บอบบางควรใช้สำลีก้อนพร้อมถ่านในการเก็บตัวอย่าง

ตัวอย่างที่สามารถนำมาด้วย swabs หรือ swabs และถ่ายโอนในสื่อนี้ ได้แก่ สารหลั่งในคอหอย, swabs ทางทวารหนักและสารคัดหลั่งต่างๆ ได้แก่ ช่องคลอด, ท่อปัสสาวะ, แผล, ตา, otic และฝี

ในระหว่างการเคลื่อนย้ายตัวอย่างในสื่อขนส่งไปยังห้องปฏิบัติการต้องหลีกเลี่ยงสภาพแวดล้อมปานกลางถึงรุนแรง (เย็นเกินไปหรือร้อนเกินไป) ควรหลีกเลี่ยงการเปลี่ยนแปลงความดันบรรยากาศอย่างกะทันหัน

เวลาที่ตัวกลางสามารถรักษาจุลินทรีย์ให้คงอยู่ได้จะขึ้นอยู่กับความเครียดที่เป็นปัญหา ตัวอย่างเช่นสำหรับจุลินทรีย์ในสกุล Neisserias และ Haemophilus สามารถคงอยู่ได้นานถึง 24 ชั่วโมง แต่สายพันธุ์เช่น Salmonella หรือ Shigella สามารถอยู่ได้นานหลายวันหรือหลายสัปดาห์

หากคาดว่าการประมวลผลของตัวอย่างอาจใช้เวลานานกว่า 4 วันควรตรึงตัวอย่างไว้ที่ -70 ° C

การระบุตัวอย่างด้วยวิธีการขนส่ง

วิธีการขนส่งที่เตรียมไว้หรือเครื่องเพาะเลี้ยงเชิงพาณิชย์ต้องมีฉลากที่จะนำข้อมูลต่อไปนี้ไปวาง:

ชื่อและนามสกุลของผู้ป่วย:หลีกเลี่ยงความสับสนของกลุ่มตัวอย่าง

เลขประจำตัว:สะดวกในการสั่งงาน

แหล่งเก็บตัวอย่าง:ช่วยนักแบคทีเรียวิทยาในการเลือกอาหารเลี้ยงเชื้อที่เหมาะสม

การเข้าพบแพทย์:บางครั้งจำเป็นสำหรับการปรึกษาหารือที่เป็นไปได้

วันที่และเวลาของการเก็บตัวอย่าง:จำเป็นสำหรับการยอมรับหรือปฏิเสธตัวอย่างตามระยะเวลาที่ผ่านไประหว่างการเก็บตัวอย่างและการรับในห้องปฏิบัติการ

ข้อมูลอื่น ๆ ที่จะเป็นประโยชน์ในการแนบ ได้แก่ :

การวินิจฉัยโดยสันนิษฐาน: เป็นแนวทางในการเพิ่มอาหารเลี้ยงเชื้อพิเศษตามการวินิจฉัยที่สงสัย

การรักษาด้วยยาปฏิชีวนะ:มีประโยชน์ในการผนวกไว้ในยาปฏิชีวนะ

ข้อมูลทั้งหมดนี้มีความสำคัญเพื่อให้แน่ใจว่ามีการประมวลผลตัวอย่างที่เหมาะสม

ระบบประกันคุณภาพ

ในการประเมินประสิทธิภาพของตัวกลาง Stuart สายพันธุ์ที่รู้จักสามารถฉีดวัคซีนและเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 25 ° C เช่น Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090e Streptococcus pneumonia

ในทุกกรณีคาดว่าจะสามารถกู้คืนจุลินทรีย์ที่เป็นปัญหาได้โดยเก็บรักษาไว้เป็นเวลา 24 ชั่วโมง

ในทางกลับกันสามารถใช้สายพันธุ์อื่น ๆ ได้เช่น: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 และ Escherichia coli ATCC 11775

ในทุกกรณีคาดว่าจะมีการฟื้นตัวอย่างมากเป็นเวลา 96 ชั่วโมง

ข้อ จำกัด

งานวิจัยบางชิ้นรับรองว่ากลีเซอโรฟอสเฟตที่มีอยู่ในอาหารสจวร์ตสามารถถูกเผาผลาญโดยโคลิฟอร์มบางชนิดรวมกับแบคทีเรียแกรมลบอื่น ๆ และดังนั้นจึงเพิ่มจำนวนขึ้นในอาหารชนิดนี้

ความเสี่ยงนี้จะเพิ่มขึ้นเมื่อการประมวลผลตัวอย่างล่าช้านานขึ้น ในทำนองเดียวกันการเปิดรับอุณหภูมิปานกลางถึงสูงของสจวร์ตในระหว่างการขนส่งก็มีอิทธิพลต่อสิ่งนี้

อ้างอิง

1. "สื่อกลางการขนส่ง (จุลชีววิทยา)" Wikipedia สารานุกรมเสรี 13 เม.ย. 2018, 10:36 UTC. 1 เม.ย. 2019 ดูได้ที่: es.wikipedia.org
2. Microkit Laboratories: อาหารเลี้ยงเชื้อ. สจวร์ตการขนส่ง มีจำหน่ายที่: มีจำหน่ายที่: Medioscultivo.com
3. LabLisan วิธีการขนส่งของ Stuart มีจำหน่ายที่: lablinsan.cl
4. MDM ทางวิทยาศาสตร์ ข้อดีของการมีสื่อการขนส่งทางจุลชีววิทยาของ Stuart มีจำหน่ายที่: mdmcientifica.com
5. Metrix Laboratories จวร์ต 2560 มีจำหน่ายที่: metrixlab.mx
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยาของ Bailey & Scott 12 เอ็ด กองบรรณาธิการ Panamericana SA Argentina
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยา 5th ed. กองบรรณาธิการ Panamericana SA Argentina