วัฒนธรรมเลือด: มีไว้เพื่ออะไรเหตุผลขั้นตอนผลลัพธ์ - ชีววิทยา - 2026

การเพาะเชื้อจากเลือดเป็นการทดสอบแบคทีเรียที่พยายามตรวจหาจุลินทรีย์ในเลือด เลือดเป็นของเหลวที่ปราศจากเชื้อโดยธรรมชาติดังนั้นจึงต้องเก็บไว้ภายใต้สภาวะทางสรีรวิทยาดังนั้นการมีแบคทีเรียหรือเชื้อราในเลือดจึงเป็นพยาธิสภาพเสมอ

เมื่อพบแบคทีเรียหรือเชื้อราในเลือด แต่การเพิ่มจำนวนไม่เกินการกำจัดจุลินทรีย์โดยระบบภูมิคุ้มกันเรียกว่า bacteremia (สำหรับแบคทีเรีย) หรือ fungemia (สำหรับเชื้อรา) แต่ถ้าจุลินทรีย์เพิ่มจำนวนอย่างไม่สามารถควบคุมได้จะเรียกว่าภาวะโลหิตเป็นพิษ

ขวดเพาะเชื้อจากเลือด (สีเหลือง: แอโรบิคสำหรับเด็กสีเขียว: แอโรบิคสำหรับผู้ใหญ่และสีแดง: แบบไม่ใช้ออกซิเจนสำหรับผู้ใหญ่) ที่มา: ภาพถ่ายโดยผู้เขียน MSc Marielsa Gil

Bacteremia, fungemia และ septicemia เป็นอันตรายต่อชีวิตของผู้ป่วยดังนั้นจึงต้องได้รับการรักษาทันที นั่นคือเหตุผลที่เมื่อมีข้อสงสัยว่ามีการติดเชื้อในเลือดแพทย์จะขอการศึกษาวัฒนธรรมเลือด

การวิเคราะห์แบคทีเรียนี้ช่วยให้ทราบว่ามีการติดเชื้อในเลือดหรือไม่และมีจุลินทรีย์ที่เกี่ยวข้องหรือไม่ นอกจากนี้หากเป็นบวกจะมีการทดสอบความไวเพื่อให้ทราบว่ายาปฏิชีวนะหรือเชื้อราชนิดใดที่สามารถใช้ในการรักษาได้

ในทางกลับกันหากวัฒนธรรมเลือดเป็นลบเมื่อฟักตัว 24 ชั่วโมงก็ไม่ควรทิ้งจนกว่าจะเป็นลบเป็นเวลา 240 ชั่วโมง สิ่งนี้ทำให้มั่นใจได้ว่าไม่มีจุลินทรีย์ที่เติบโตช้า

เพื่อให้การเพาะเลี้ยงเลือดมีความน่าเชื่อถือต้องใช้มาตรการปลอดเชื้ออย่างรุนแรงในการเก็บตัวอย่างและเพื่อเพิ่มความน่าเชื่อถือและความไวของการทดสอบควรใช้ตัวอย่างอย่างน้อยสองตัวอย่างในระหว่างหรือใกล้ถึงจุดสูงสุดของไข้

มีไว้เพื่ออะไร?

เลือดเป็นของเหลวที่ปราศจากเชื้อและเมื่อพบจุลินทรีย์ในนั้นจะมีพยาธิสภาพ 100% สถานการณ์นี้แสดงให้เห็นภาพทางคลินิกที่ละเอียดอ่อนมากซึ่งส่งผลต่อชีวิตของผู้ป่วย

การเพาะเชื้อจากเลือดเป็นการทดสอบแบคทีเรียที่สำคัญซึ่งตรวจพบว่ามีจุลินทรีย์อยู่ในกระแสเลือด

จุลินทรีย์สามารถเข้าถึงเลือดผ่านเส้นทางต่าง ๆ ซึ่งอาจเป็นการติดเชื้อนอกหลอดเลือดเช่นปอดบวมการติดเชื้อในช่องท้อง pyelonephritis การติดเชื้อที่ผิวหนังอย่างรุนแรงเนื้อเยื่ออ่อนหรือโรคข้ออักเสบเป็นต้น

หรืออาจฉีดเข้าเส้นเลือดก็ได้เช่นการปนเปื้อนของสายสวนทางหลอดเลือดดำหรือหลอดเลือดเยื่อบุหัวใจอักเสบการติดยาทางหลอดเลือดดำการให้ยาหรือสารละลายที่ปนเปื้อนเป็นต้น

การตรวจจับและรักษาสาเหตุของภาวะติดเชื้อในเวลาที่จำเป็นเพื่อให้แน่ใจว่าผู้ป่วยรอดชีวิต

ในแง่นี้แพทย์ควรระบุถึงความตระหนักในการเพาะเลี้ยงเลือดเมื่อสังเกตอาการและอาการแสดงที่บ่งบอกถึงภาวะโลหิตเป็นพิษเช่นไข้ (มากกว่า 38 ° C) โดยไม่มีจุดโฟกัสติดเชื้อที่ชัดเจนหรือในทางตรงกันข้ามภาวะอุณหภูมิต่ำ (<de 36 ° C)

อาการอื่น ๆ อาจเป็น: หนาวสั่นจำนวนเม็ดเลือดขาวเพิ่มขึ้น (> 10,000 เซลล์ / มม. ³ ) หรือเซลล์โพลีมอร์โฟนิวเคลียลดลงอย่างมีนัยสำคัญ (<1,000 PMN / mm ³ ) เช่นเดียวกับการเสื่อมสภาพของหลายแกนหรือการสูญเสียพลังอย่างกะทันหันท่ามกลางสัญญาณเตือนอื่น ๆ

Bacteremia อาจคงที่ชั่วคราวหรือไม่ต่อเนื่อง สิ่งนี้มีความสำคัญในการเก็บตัวอย่างเนื่องจากจำเป็นต้องเก็บตัวอย่างเมื่อมีความเป็นไปได้มากขึ้นที่จะพบว่ามีจุลินทรีย์หมุนเวียนอยู่

จึงขอแนะนำให้เก็บตัวอย่างอย่างน้อย 2 ตัวอย่างในสถานที่ต่างๆ นอกจากนี้วิธีที่ดีที่สุดคือการเก็บตัวอย่างในช่วงที่มีไข้สูงหรือเมื่อผู้ป่วยมีอาการตัวสั่นอุณหภูมิต่ำมากเหงื่อออกหรือหัวใจเต้นเร็ว

อย่างไรก็ตามเพื่อให้การเพาะเชื้อจากเลือดเป็นเครื่องมือที่มีประโยชน์อย่างแท้จริงต้องใช้ความระมัดระวังเป็นอย่างยิ่ง การจัดการที่ไม่ดีหรืออาการป่วยที่ไม่ดีในขณะที่ทำการเก็บตัวอย่างอาจทำให้การทดสอบเป็นโมฆะได้รับผลบวกปลอม

รากฐาน

การศึกษานี้ประกอบด้วยการเก็บตัวอย่างเลือดสองหรือสามตัวอย่างโดยปลอดเชื้อและวางไว้ในขวดพิเศษ

อุปกรณ์พิเศษสำหรับการเพาะเลี้ยงตัวอย่างเลือดเรียกว่าขวดเพาะเชื้อจากเลือด สิ่งเหล่านี้แบ่งออกเป็น:

ตามอายุของผู้ป่วย

- ใช้สำหรับเด็ก

-สำหรับผู้ใหญ่.

ตามชนิดของจุลินทรีย์

- หน้ากากสำหรับจุลินทรีย์แบบแอโรบิค (แบคทีเรียแอโรบิคแบคทีเรีย facultative และเชื้อรา)

- ขวดเพาะเลี้ยงเชื้อจุลินทรีย์ที่ไม่ใช้ออกซิเจน (แบคทีเรียที่ไม่ใช้ออกซิเจนที่เข้มงวด)

บางชนิดมีอาหารเลี้ยงเชื้อเหลวและบางชนิดมีอาหารเลี้ยงเชื้อที่เป็นของแข็งและของเหลวในเวลาเดียวกัน นอกจากนี้ยังมีอนุภาคถ่านกัมมันต์

กระบวนการ

คำแนะนำสำหรับการสุ่มตัวอย่าง

- ตัวอย่างจะต้องดำเนินการโดยบุคลากรที่ได้รับการฝึกฝนและฝึกฝนมาอย่างดีในสาขาจุลชีววิทยา

- Asepsis หรือการทำความสะอาดสถานที่เก็บตัวอย่างอย่างละเอียดเป็นขั้นตอนที่สำคัญที่สุดอย่างไม่ต้องสงสัย

- เช่นเดียวกับการสุ่มตัวอย่างบุคลากรสาธารณสุขต้องปฏิบัติตามมาตรการรักษาความปลอดภัยทางชีวภาพในระหว่างกระบวนการนี้อย่างเต็มที่ (การใช้ถุงมือเสื้อคลุมแว่นตาและอื่น ๆ )

- ดูแลว่ามีอุปกรณ์ที่จำเป็นทั้งหมดสำหรับการเก็บตัวอย่าง

- ติดฉลากขวดด้วยชื่อเต็มของผู้ป่วยวันที่หมายเลขเวชระเบียนเวลาในการเก็บตัวอย่างและหมายเลขลำดับห้องปฏิบัติการ

- วิธีที่ดีที่สุดคือการเก็บตัวอย่างก่อนที่ผู้ป่วยจะเริ่มการรักษาด้วยยาต้านจุลชีพ จะระบุเฉพาะในกรณีที่สงสัยว่าการรักษาที่อยู่ระหว่างดำเนินการไม่ทำงาน ในกรณีนี้ควรนำตัวอย่างก่อนการเปลี่ยนยาโดยใช้ขวดเพาะเลี้ยงเลือดที่มีสารยับยั้งยาปฏิชีวนะ (อนุภาคถ่านกัมมันต์)

- ต้องนำตัวอย่างอย่างน้อย 2 ตัวอย่างในบริเวณทางกายวิภาคที่แตกต่างกันเช่นแขนขวาและแขนซ้าย ในกรณีที่สงสัยว่าเยื่อบุหัวใจอักเสบแนะนำให้ใช้ 3 ตัวอย่าง แต่ละตัวอย่างจะมีขวดสองขวด (หนึ่งขวดสำหรับแอโรบิคและอีกขวดสำหรับไม่ใช้ออกซิเจน)

ปริมาณตัวอย่าง

ปริมาณตัวอย่างจะแตกต่างกันไปตามอายุของผู้ป่วย แต่ควรรักษาอัตราส่วน 1: 5 ถึง 1:10 ไว้เสมอโดยคำนึงถึงการเจือจางของเลือด / วัฒนธรรม

ในทารกแรกเกิดปริมาณตัวอย่างที่แนะนำคือเลือด 1 มิลลิลิตรต่อขวด ใช้ขวดนมสำหรับเด็ก

ในกรณีของทารกระหว่างหนึ่งเดือนถึงหนึ่งปีสามารถเพิ่มเลือดได้ถึง 1.5 มิลลิลิตรต่อขวด ใช้ขวดนมสำหรับเด็ก

ในเด็กที่มีอายุมากกว่า 2 ปีปริมาณตัวอย่างที่เหมาะสมคือ 2.5 มิลลิลิตรของเลือดต่อขวด ใช้ขวดนมสำหรับเด็ก

ตั้งแต่วัยรุ่นสามารถเพิ่มปริมาณเลือดได้ระหว่าง 5 - 10 มล. ต่อขวด ใช้ขวดสำหรับผู้ใหญ่

ในที่สุดในช่วงผู้ใหญ่ปริมาณที่จำเป็นคือ 8-10 มล. ต่อขวด ใช้ขวดสำหรับผู้ใหญ่

การสุ่มตัวอย่าง

- ตัวอย่างเลือดอาจเป็นหลอดเลือดดำหรือหลอดเลือดแดง อย่างไรก็ตามเลือดแดงจะถูกถ่ายเมื่อไม่สามารถสุ่มตัวอย่างหลอดเลือดดำได้

- ไม่แนะนำให้นำตัวอย่างจากสายสวนหลอดเลือดดำส่วนกลางเว้นแต่:

1. เป็นไปไม่ได้ที่จะนำตัวอย่างมาทางปาก (หลอดเลือดดำหรือหลอดเลือดแดง)
2. ผู้ป่วยที่เสี่ยงต่อการตกเลือด
3. เมื่อแพทย์สงสัยว่ามีแบคทีเรียจากการปนเปื้อนของสายสวนหลอดเลือดดำส่วนกลาง
4. เมื่อไข้กลับมาเกิดอีกหลังจากการหยุดไข้ 4 ถึง 5 วันไม่ว่าผู้ป่วยจะได้รับการรักษาด้วยยาต้านจุลชีพหรือไม่ก็ตาม

Asepsis ก่อนการสุ่มตัวอย่าง

- เลือกสถานที่ทางกายวิภาคสำหรับการสุ่มตัวอย่าง โดยทั่วไปหลอดเลือดดำที่มีความสามารถดีที่สุดจะถูกเลือก (หลอดเลือดดำหรือหลอดเลือดดำเซฟาลิก)

- ตามศูนย์ควบคุมโรค (CDC) ในแอตแลนตา (สหรัฐอเมริกา) ผู้ปฏิบัติงานต้องล้างมือด้วยคลอร์เฮกซิดีน 2% หรือโพวิโดนไอโอดีน 10% ก่อนสุ่มตัวอย่างนอกเหนือจากการสวมถุงมือ

-Palpate และค้นหาหลอดเลือดดำที่จะใช้

- ทำความสะอาดบริเวณที่เจาะด้วยวิธีหมุนทำให้เคลื่อนที่จากตรงกลางออกไปด้านนอกโดยใช้สบู่คลอร์เฮกซิดีนหรือสบู่ฆ่าเชื้อ ล้างออกด้วยน้ำเกลือปราศจากเชื้อ

จากนั้นให้ใช้น้ำยาฆ่าเชื้อและปล่อยให้มันออกฤทธิ์ ตัวอย่าง chlorhexidine gluconate 0.5% เป็นเวลา 1 นาทีหรือ povidone iodine 10% เป็นเวลา 2 นาที อย่างหลังควรถามก่อนว่าผู้ป่วยแพ้ไอโอดีนหรือไม่ หากคุณแพ้คุณสามารถเปลี่ยนแอลกอฮอล์ 70% ได้

การสกัดตัวอย่าง

- วางสายรัดเพื่อทำให้เลือดไหลเวียนมากขึ้นและทำให้เส้นเลือดงอก

- อย่าใช้นิ้วสัมผัสบริเวณที่เจาะอีกครั้ง หากจำเป็นอย่างยิ่งควรล้างนิ้วในลักษณะเดียวกับบริเวณที่เจาะ

- ใส่เข็มฉีดยาหรือหนังศีรษะเข้าไปในหลอดเลือดดำและดึงเลือดออกมาในปริมาณที่จำเป็น

- อย่าใส่ผ้าฝ้ายหรือผ้าก๊อซลงบนเข็มเมื่อถอดออกหากไม่ได้ฆ่าเชื้อ

- ถอดซีลความปลอดภัยออกจากขวดอย่างระมัดระวังและโดยไม่ต้องสัมผัสกับฝา ผู้เขียนบางคนแนะนำให้ทำการฆ่าเชื้อโรคก่อนทำการฉีดเชื้อในตัวอย่าง

- แจกจ่ายเลือดในปริมาณที่เหมาะสมในขวด หากนำตัวอย่างด้วยหัวฉีดปริมาณที่จำเป็นจะถูกเทลงในขวดที่ไม่ใช้ออกซิเจนก่อนจากนั้นจึงลงในขวดแอโรบิค หากถ่ายด้วยหนังศีรษะ (ผีเสื้อ) จะเทในทางตรงกันข้าม

- ผสมขวดเพาะเชื้ออย่างเบามือโดยการผกผัน

- เปลี่ยนถุงมือและทำซ้ำขั้นตอนก่อนหน้าสำหรับการเก็บตัวอย่างครั้งที่สอง

- หากตัวอย่างที่สองนำมาจากไซต์อื่นสามารถทำได้ทันที แต่ถ้ามาจากไซต์เดียวกันคุณต้องรอ 30 ถึง 90 นาทีระหว่างตัวอย่างหนึ่งกับอีกตัวอย่างหนึ่ง

- ต้องนำตัวอย่างไปที่ห้องปฏิบัติการโดยเร็วที่สุดหากไม่สามารถทำได้ต้องทิ้งไว้ที่อุณหภูมิห้องนานถึง 18 ชั่วโมง

วัฒนธรรม

เมื่ออยู่ในห้องปฏิบัติการขวดจะถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 ° C ภายใต้เงื่อนไขของแต่ละขวดนั่นคือในแบบแอโรบิคและแบบไม่ใช้ออกซิเจนตามลำดับ

ภายใต้วิธีการแบบแมนนวลควรเริ่มการส่งเสียงเรียกเข้าที่ 24 ชั่วโมงของการฟักตัวจากนั้นส่งเสียงระหว่างวัน วงแหวนจะดำเนินการดังต่อไปนี้: ก่อนอื่นให้ฆ่าเชื้อฝาขวดและใส่เข็มของหัวฉีดที่ปราศจากเชื้อ ของเหลวถูกสกัดจากขวดและหว่านลงในวุ้นเลือดและวุ้นช็อกโกแลต

หากมีการเจริญเติบโตจะมีการทำ Gram วัฒนธรรมย่อยในสื่อเฉพาะการทดสอบทางชีวเคมีและยาปฏิชีวนะ

ในวิธีการอัตโนมัติอุปกรณ์ Bact / Alert จะส่งเสียงเตือนเมื่อตรวจพบว่าขวดเป็นบวก ในทำนองเดียวกันควรใช้วุ้นเลือดและช็อกโกแลตวุ้น

อีกวิธีหนึ่งที่กำลังได้รับความนิยมคือการวิเคราะห์ขวดหลังจากผ่านไป 6 ชั่วโมงของการบ่มด้วยมวลสาร วิธีนี้ได้ช่วยเพิ่มความไวและความเร็วในการวินิจฉัย

ผล

ตราบใดที่ขวดเพาะเชื้อเลือดเป็นลบสามารถรายงานระดับกลางเบื้องต้นให้กับแพทย์ที่ทำการรักษาได้ รายงานระบุว่ามีค่าลบในชั่วโมงที่ฟักตัว ตัวอย่างเช่นหากค่าติดลบจนถึงวันที่สี่จะมีการรายงานดังนี้:

ผลเบื้องต้น:การเพาะเชื้อเชิงลบที่ระยะฟักตัว 96 ชั่วโมง

หมายเหตุ:การศึกษาดำเนินต่อไป 240 ชั่วโมง

หากการเพาะเชื้อในเลือดเป็นบวกแพทย์ที่ทำการรักษาจะได้รับแจ้งทันทีและจะมีการส่งรายงานพร้อมอย่างน้อยกรัมของอาณานิคม ตัวอย่าง:

ผลลัพธ์เบื้องต้น:ในการเพาะเลี้ยงเชิงบวกที่ 48 ชั่วโมงของการฟักตัวพบว่ามีแบคทีเรียแกรมลบและออกซิเดสเชิงลบ กำลังดำเนินการทดสอบการระบุและความไว

ข้อมูลนี้แนะนำให้แพทย์ที่ทำการรักษาเริ่มการบำบัดเชิงประจักษ์ต่อจุลินทรีย์ที่เป็นไปได้ในขณะที่รอผลสุดท้ายของห้องปฏิบัติการ

เมื่อเสร็จสิ้นการศึกษาทางแบคทีเรียนั่นคือจุลินทรีย์ได้รับการระบุและมีการใช้ยาปฏิชีวนะควรส่งรายงานขั้นสุดท้ายโดยเร็วที่สุด

ควรใช้ความระมัดระวังเป็นพิเศษหากสิ่งมีชีวิตเป้าหมายคือ Neisseria gonorrhoeae หรือ Neisseria meningitidis เนื่องจากแบคทีเรียเหล่านี้ถูกยับยั้งเมื่อมีโซเดียมโพลีอะเนโทซัลโฟเนต (SPS) ที่มีความเข้มข้นสูง

นั่นคือเหตุผลที่สารประกอบนี้ไม่ควรเกิน 0.025% ในขวดเพาะเชื้อในเลือด

ในทางกลับกันหากนำตัวอย่างการเพาะเชื้อจากเลือดในหลอด Vacutainer หลอดเหล่านี้มีความเข้มข้นของ SPS ที่เป็นพิษต่อไข้กาฬหลังแอ่นและโกโนคอคกี้ดังนั้นเลือดจะต้องถูกถ่ายโอนไปยังระบบการเพาะเลี้ยงน้ำซุปภายใน 1 ชั่วโมง

จะทราบได้อย่างไรว่าการเพาะเลี้ยงเลือดเป็นบวกหรือการปนเปื้อน

วัฒนธรรมเลือดถือว่าปนเปื้อนเมื่อมีการเติบโตในขวดเพาะเชื้อจากเลือดเพียงขวดเดียวจากทั้งหมดที่ถ่าย และความสงสัยของการปนเปื้อนจะเพิ่มขึ้นหากจุลินทรีย์ที่แยกได้นั้นเป็นไมโครไบโอตาที่ผิวหนังเป็นนิสัยตัวอย่างเช่น Staphylococcus coagulase negative, Propionibacterium spp เป็นต้น

อย่างไรก็ตามในผู้ป่วยที่มีภาวะภูมิคุ้มกันบกพร่องไม่ควรละเลยจุลินทรีย์ แต่ในกรณีนี้จุลินทรีย์ควรปรากฏในหลายตัวอย่าง

ในทางกลับกันถ้าความไวต่อยาปฏิชีวนะของจุลินทรีย์ชนิดเดียวกันที่แยกได้ในสองตัวอย่างที่ต่างกันเท่ากันแสดงว่าเชื้อนั้นมีอยู่จริง

ลักษณะเฉพาะอีกประการหนึ่งคือปริมาณแบคทีเรียเนื่องจากวัฒนธรรมในเลือดที่ปนเปื้อนเติบโตช้าในขณะที่การติดเชื้อจริงในผู้ป่วยที่ไม่ได้รับการรักษาโดยทั่วไปจะมีผลบวกที่ 14 ชั่วโมงของการฟักตัวเมื่อจุลินทรีย์ไม่น่ารำคาญ

ในทางกลับกันในผู้ป่วยที่ได้รับการรักษาด้วยยาต้านจุลชีพจุลินทรีย์ที่เกี่ยวข้องอาจต้องใช้เวลาในการเจริญเติบโตเนื่องจากมีภาระต่ำมาก

การปรากฏตัวของจุลินทรีย์มากกว่าหนึ่งตัวอาจบ่งบอกถึงการปนเปื้อน แต่ถ้าผลลัพธ์เดียวกันซ้ำหลายครั้งจากหลาย ๆ ไซต์แสดงว่าเป็นของจริง

อ้างอิง

1. “ การเพาะเชื้อจากเลือด.” Wikipedia สารานุกรมเสรี 3 ก.ค. 2019, 17:28 UTC. 14 ก.ค. 2019 19:05 น. th.wikipedia.org
2. Hervé B. เทคโนโลยีใหม่ในการวินิจฉัยทางจุลชีววิทยา: ระบบอัตโนมัติและการใช้งานบางอย่างในการระบุจุลินทรีย์และการศึกษาความอ่อนแอ Rev. Med. Clin. เคานต์ 2015; 26 (6) 753-763 มีให้ที่: reader.elsevier.com
3. Villarroel P. บทที่ 20: Sepsis และความเสี่ยงของโรคหัวใจและหลอดเลือด. สุขภาพหัวใจและหลอดเลือด. น. 187-194 มีจำหน่ายที่: fbbva.es
4. Sánchez R, Rincón B, Cortés C, Fernández E, Peña S, Heras EM Blood วัฒนธรรม: พวกเขาบอกอะไรคุณและคุณทำอะไร? ป่วย glob 2012; 11 (26): 146-163. มีจำหน่ายที่: scielo.isc
5. Pardinas-Llergo M, Alarcón-Sotelo A, Ramírez-Angulo C, Rodríguez-Weber F, Díaz-Greene E. ความน่าจะเป็นของความสำเร็จในการได้รับการเพาะเชื้อจากเลือดบวก แพทย์ Interna Mex 2017; 33 (1): 28-40. มีจำหน่ายที่: scielo.org