- รากฐาน
- การจัดเตรียม
- - น้ำซุป Selenite
- - การเตรียมสภาพแวดล้อมทางการค้า
- ตัวแปรน้ำซุป Selenite-cystine
- การประยุกต์ใช้งาน
- หว่าน
- ระบบประกันคุณภาพ
- ข้อ จำกัด
- อ้างอิง
ยิบเป็นสื่อวัฒนธรรมเลือกของเหลว ได้รับการออกแบบโดย Leifson สำหรับการปรับปรุงตัวอย่างที่สงสัยว่ามีแบคทีเรีย enteropathogenic ของสกุล Salmonella
สื่อนี้เป็นไปตามข้อกำหนดของ American Public Health Association (APHA) ดังนั้นจึงได้รับการยอมรับสำหรับการตรวจสอบการมีอยู่ของเชื้อ Salmonella ในตัวอย่างอุจจาระปัสสาวะของเหลวหรืออาหารแข็งน้ำและอื่น ๆ
น้ำซุป Selenite ที่มา: ภาพถ่ายโดยผู้เขียน MSc. Marielsa Gil
องค์ประกอบทางเคมีของมันช่วยในการฟื้นตัวของจุลินทรีย์เหล่านี้และยับยั้งการเจริญเติบโตของผู้อื่น โดยพื้นฐานแล้วเป็นพิษต่อแบคทีเรียส่วนใหญ่ที่อยู่ในวงศ์ Enterobacteriaceae อย่างไรก็ตามมันยังช่วยให้การฟื้นตัวของสายพันธุ์ Shigella และไม่ยับยั้งการเจริญเติบโตของ Pseudomonas และ Proteus
ประกอบด้วยโซเดียมไฮโดรเจนซีลีไนต์ปราศจากโซเดียมฟอสเฟตปราศจากน้ำเปปโตนและแลคโตส นอกจากนี้ยังมีตัวแปรที่เพิ่มซีสตีนด้วยเหตุนี้จึงมีชื่อว่าน้ำซุปซีลีไนต์ - ซีสตีน
ปัจจุบันนิยมใช้น้ำซุปซีลีไนต์ - ซีสตีนเนื่องจากได้รับเปอร์เซ็นต์การฟื้นตัวของเชื้อซัลโมเนลลาที่สูงขึ้นเทียบเท่ากับที่สังเกตได้จากสารคัดสรรอื่น ๆ เพื่อวัตถุประสงค์เดียวกันเช่นน้ำซุปโซเดียมเตตระธีโอเนต
รากฐาน
เปปโตนที่มีอยู่ในน้ำซุปทำหน้าที่เป็นสารอาหารสำหรับการพัฒนาจุลินทรีย์ที่เหมาะสม สายพันธุ์ซัลโมเนลลาใช้เปปโตนเป็นแหล่งไนโตรเจนวิตามินและกรดอะมิโน
แลคโตสเป็นคาร์โบไฮเดรตที่หมักได้ในขณะที่โซเดียมซีลีไนต์เป็นสารยับยั้งที่หยุดการเติบโตของแบคทีเรียแกรมบวกและแบคทีเรียส่วนใหญ่ที่มีอยู่ในลำไส้โดยเฉพาะในตระกูล Enterobacteriaceae โซเดียมฟอสเฟตเป็นบัฟเฟอร์ที่ทำให้ pH ของตัวกลางคงที่
ในกรณีของน้ำซุปซีลีไนต์ที่มีส่วนผสมของ L-cystine สารประกอบเพิ่มเติมนี้เป็นตัวรีดิวซ์ที่ช่วยลดความเป็นพิษของซีลีไนต์และเพิ่มการฟื้นตัวของเชื้อซัลโมเนลลา
การจัดเตรียม
- น้ำซุป Selenite
หากคุณมีส่วนประกอบของส่วนผสมคุณสามารถชั่งน้ำหนัก:
โซเดียมไฮโดรเจนซีลีไนต์ปราศจากน้ำ 4 กรัม
โซเดียมฟอสเฟตปราศจากน้ำ 10 กรัม
เปปโตน 5 กรัม
แลคโตส 4 กรัม
ละลายสารประกอบในน้ำกลั่นที่ปราศจากเชื้อ 1 ลิตร สามารถอุ่นเล็กน้อยเพื่อให้ละลายได้อย่างสมบูรณ์
ห้องปฏิบัติการบางแห่งใช้ไอน้ำอย่างคล่องแคล่วเป็นเวลา 10 นาทีเพื่อฆ่าเชื้อเนื่องจากไม่ควรนึ่งฆ่าเชื้อ หากสื่อผ่านการฆ่าเชื้อแล้วสามารถเก็บไว้ในตู้เย็นจนกว่าจะใช้
นอกจากนี้ยังสามารถเตรียมปลอดเชื้อและเสิร์ฟโดยตรง 10 ถึง 15 มล. ในหลอดทดลองที่ปราศจากเชื้อ
ในกรณีนี้ควรปล่อยให้นิ่งและใช้งานได้ทันที เนื่องจากสื่อไม่ผ่านการฆ่าเชื้อจึงไม่สามารถเก็บไว้ในตู้เย็นเพื่อใช้ในภายหลังได้
- การเตรียมสภาพแวดล้อมทางการค้า
หากมีจำหน่ายในเชิงพาณิชย์ให้ชั่งน้ำหนัก 23 กรัมของตัวกลางที่ขาดน้ำแล้วละลายในน้ำกลั่นที่ปราศจากเชื้อหนึ่งลิตร ความร้อนสั้น ๆ เพื่อสิ้นสุดการละลาย อย่านึ่ง. ให้บริการ 10 หรือ 15 มล. ในหลอดทดลองปลอดเชื้อโดยปลอดเชื้อ
pH สุดท้ายของตัวกลางควรเป็น 7.0 ± 0.2
ควรสังเกตว่าสีของตัวกลางที่ขาดน้ำคือสีเบจและสารเตรียมนั้นเป็นสีเหลืองอ่อนและโปร่งแสง
ตัวแปรน้ำซุป Selenite-cystine
มีสารประกอบเช่นเดียวกับน้ำซุปซีลีไนต์ แต่เพิ่มซีสตีน 10 มก. ขั้นตอนที่เหลือเหมือนกับที่อธิบายไว้ข้างต้นทุกประการ
การประยุกต์ใช้งาน
สื่อนี้มีความพิเศษเพื่อใช้ในการศึกษาทางระบาดวิทยาในกรณีที่โรคไม่อยู่ในระยะเฉียบพลันผู้ป่วยที่ไม่มีอาการหรือพาหะที่มีสุขภาพดี
การแยกเชื้อ Salmonella โดยทั่วไปทำได้ยากเนื่องจากมักจะปนเปื้อนเพียงตัวอย่างที่ไม่ดี การเจริญเติบโตของแบคทีเรียสกุลอื่น ๆ ที่พบในปริมาณที่มากขึ้นจะถูกซ้อนทับได้ง่าย
ในทางกลับกันวัตถุดิบที่ทำอาหารแปรรูปมักจะสัมผัสกับความร้อนกระบวนการคายน้ำการใช้สารฆ่าเชื้อรังสีและสารกันบูดเป็นต้น
ดังนั้นเชื้อ Salmonellas ที่มีอยู่ในวัตถุดิบจึงถูกปฏิบัติอย่างไม่ถูกต้องโดยนำผลิตภัณฑ์เข้าสู่กระบวนการทางอุตสาหกรรมดังกล่าวข้างต้น เช่นเดียวกันในกรณีของตัวอย่างทางคลินิกเช่นอุจจาระสายพันธุ์อาจอ่อนแอหากมาจากผู้ป่วยที่ได้รับการรักษาด้วยยาปฏิชีวนะ
ดังนั้นตัวอย่างใด ๆ ที่สงสัยว่ามีเชื้อซัลโมเนลลาควรได้รับการเสริมด้วยน้ำซุปแลคโตสก่อนแล้วจึงเติมน้ำซุปซีลีไนต์เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพในการฟื้นตัวในอาหารเลี้ยงเชื้อเช่น SS agar, xylose agar, lysine deoxycholate (XLD ), วุ้นในกระเพาะอาหาร Hektoen (HE) และวุ้นสีเขียวสดใสเป็นต้น
หว่าน
สำหรับตัวอย่างอุจจาระให้ใช้ตัวอย่าง 1 กรัมและแขวนไว้ในหลอดที่มีน้ำซุปซีลีไนต์ 10 ถึง 15 มล. ถ้าอุจจาระเป็นของเหลวให้ใช้ 1 มล. และพักไว้ในน้ำซุป สำหรับผ้าเช็ดล้างทางทวารหนักให้ปล่อยวัสดุที่เช็ดล้างลงในน้ำซุป
ในตัวอย่างอาหารแข็งให้ใช้เวลา 1 กรัมและแขวนไว้ในน้ำซุปซีลีไนต์
ในอาหารเหลวผสมในส่วนที่เท่ากันกับน้ำซุปซีลีไนต์ที่ความเข้มข้นสองเท่า
สำหรับตัวอย่างปัสสาวะให้หมุนเหวี่ยงทิ้งส่วนที่เหนือกว่านำตะกอนทั้งหมดไปแขวนไว้ในน้ำซุปซีลีไนต์
น้ำซุปถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมงในการบ่ม การเจริญเติบโตของแบคทีเรียมีหลักฐานจากความขุ่น นอกจากนี้ยังสามารถรวมท่อเพิ่มเติมต่อตัวอย่างสำหรับการบ่มที่อุณหภูมิ 42 ° C จากนั้นทำการเพาะเมล็ดสื่อแข็งที่คัดเลือกจากน้ำซุปซีลีไนต์
ระบบประกันคุณภาพ
เพื่อควบคุมความเป็นหมันน้ำซุปซีลีไนต์จากแต่ละชุดที่ไม่มีการเติมเชื้อจะถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง คาดว่าไม่มีความขุ่นหรือเปลี่ยนสีของตัวกลาง
สายพันธุ์ที่เป็นที่รู้จักสามารถใช้เพื่อควบคุมการทำงานที่เหมาะสมของสื่อเช่น:
เชื้อ Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 และ Proteus mirabilis ATCC 43071
ผลลัพธ์ที่คาดหวังคือ:
- สำหรับแบคทีเรียสามสายพันธุ์แรกการเจริญเติบโตต้องเป็นที่น่าพอใจ
- สำหรับการยับยั้งเชื้อ Escherichia coli บางส่วน
- สำหรับ Proteus การเจริญเติบโตปานกลาง
ข้อ จำกัด
Selenite broth medium เป็นพิษต่อผิวหนังมนุษย์ดังนั้นควรหลีกเลี่ยงการสัมผัสโดยตรง
อ้างอิง
- Flores-Abuxapqui J, Puc-Franco M, Heredia-Navarrete M, Vivas-Rosel M, Franco-Monsreal J. การเปรียบเทียบระหว่างอาหารเลี้ยงเชื้อของโซเดียมซีลีไนต์และโซเดียมเตตระธีโอเนตซึ่งทั้งคู่บ่มที่ 37 ° C และ 42 ° C สำหรับ การแยกเชื้อ Salmonella spp จากอุจจาระของพาหะ Rev Biomed 2003; 14 (4): 215-220
- Britannia Laboratories เซเลนิโต้น้ำซุป. 2558 ดูได้ที่: britanialab.com
- ห้องปฏิบัติการนีโอเจน น้ำซุป Selenite มีจำหน่ายที่: foodsafety.neogen.com
- กอนซาเลซ -Pedraza J, Pereira -Sanandres N, Soto -Varela Z, Hernández -Aguirre E, Villarreal- Camacho J. การแยกเชื้อทางจุลชีววิทยาของ Salmonella spp. และเครื่องมือระดับโมเลกุลสำหรับการตรวจจับ สุขภาพ Barranquilla 2014; 30 (1): 73-94. มีให้จาก: http://www.scielo.org
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยาของ Bailey & Scott 12 เอ็ด กองบรรณาธิการ Panamericana SA Argentina