- รากฐาน
- ส่วนประกอบ
- การจัดเตรียม
- การประยุกต์ใช้งาน
- เป็นพื้นฐานสำหรับการเตรียมวุ้นเลือด
- กระตุ้นการสร้างสปอร์ของแบคทีเรียที่สร้างสปอร์
- การบำรุงรักษาสายพันธุ์
- จำนวนอาณานิคม
- กำลังดำเนินการทดสอบวินิจฉัย
- การฟื้นตัวของแอโรบิกแบบมีโซฟิลิกจากน้ำเกลือเพื่อการพักผ่อนหย่อนใจ (ชายหาด)
- อ้างอิง
อาหารเลี้ยงเชื้อเป็นสื่อ nonselective และไม่มีวัฒนธรรมแข็งค่า แบคทีเรียทุกชนิดที่ไม่ต้องการจากมุมมองทางโภชนาการเติบโตในอาหารชนิดนี้
มันเป็นสื่อที่เรียบง่ายและแม้จะมีชื่อ แต่ก็มีคุณค่าทางโภชนาการต่ำกว่าเมื่อเทียบกับสื่ออื่น ๆ ที่คล้ายคลึงกันเช่น Brain Heart Infusion Agar หรือ Trypticase Soy Agar
จำนวนอาณานิคมในวุ้นที่มีสารอาหาร
ประโยชน์ของมันในห้องปฏิบัติการนั้นหลากหลายมาก ส่วนใหญ่จะใช้สำหรับการเพาะเลี้ยงพันธุ์ย่อยการรักษาสายพันธุ์การนับอาณานิคมเป็นพื้นฐานในการเตรียมวุ้นเลือดและอื่น ๆ
ในทำนองเดียวกันเนื่องจากมีสีเบจอ่อนการผลิตเม็ดสีที่เกิดจากแบคทีเรียบางสายพันธุ์จึงมีความโดดเด่นเป็นพิเศษเช่นเม็ดสีเขียวของ Pseudomonas aeruginosa เม็ดสีแดงอิฐที่ผลิตโดย Serratia marcescens ที่อุณหภูมิห้องเม็ดสีเหลืองทองของ Staphylococcus aureus และอื่น ๆ
นอกจากนี้ยังเป็นหนึ่งในสื่อที่มีการเติบโตที่ถูกที่สุดในตลาด
รากฐาน
ดังที่ได้กล่าวไปแล้วข้างต้นเป็นสื่อที่เรียบง่ายมากซึ่งอาศัยการให้สารอาหารเพื่อการเจริญเติบโตของแบคทีเรียโดยไม่มีข้อ จำกัด และไม่มีปฏิกิริยาที่ซับซ้อนในการตีความ
เนื่องจากตัวกลางมีความโปร่งแสงจึงเหมาะอย่างยิ่งสำหรับการนับโคโลนีโดยวิธีการเพาะเมล็ดเชิงลึก
ส่วนประกอบ
ประกอบด้วยส่วนใหญ่ของสารสกัดจากเนื้อสัตว์หรือสารสกัดจากยีสต์เปปโตนหรือเจลาตินการย่อยของตับอ่อนวุ้นวุ้นโซเดียมคลอไรด์และน้ำกลั่น
สารสกัดจากเนื้อสัตว์หรือยีสต์และเปปโตนเป็นตัวแทนของแหล่งคาร์บอนและแร่ธาตุที่จำเป็น (ไนโตรเจนฟอสฟอรัสและกำมะถัน) ซึ่งแบคทีเรียจะใช้เป็นแหล่งพลังงานและปัจจัยการเจริญเติบโต
ในทำนองเดียวกัน agar-agar เป็นฐานของอาหารเลี้ยงเชื้อที่เป็นของแข็งทั้งหมดเข้ามาแทนที่เจลาตินซึ่งเป็นสารประกอบพื้นฐานตัวแรกที่ Robert Koch ใช้เพื่อให้ความสม่ำเสมอที่มั่นคงกับสื่อของเขา
วุ้นคือพอลิแซ็กคาไรด์ที่ประกอบด้วยกาแลคโตสกาแลคโตมันแนนอะกาโรสและอะกาโรเพคติน ตั้งไว้ที่ 40 ° C และละลายใกล้ 100 ° C
ในส่วนของโซเดียมคลอไรด์เป็นสื่อกลางที่มีออสโมลาริตีที่จำเป็นสำหรับการพัฒนาแบคทีเรีย
สุดท้ายน้ำจะทำหน้าที่ให้ความชุ่มชื้นและละลายสารประกอบที่ทำให้แห้ง ควรใช้น้ำกลั่นที่ปรับ pH เป็นกลาง ไม่ควรใช้น้ำประปาเนื่องจากมีแคลเซียมและแมกนีเซียมที่สามารถทำปฏิกิริยากับฟอสเฟตในตัวกลางและเป็นเกลือที่ไม่ละลายน้ำ
การจัดเตรียม
สำหรับวุ้นที่มีสารอาหาร 1 ลิตรจะต้องชั่งน้ำหนักตัวกลางที่ขาดน้ำ 31 กรัม วางไว้ในขวดและละลายในน้ำกลั่นหนึ่งลิตร หลังจาก 5 นาทีของการยืนให้ร้อนบนแหล่งความร้อนและผสมอย่างต่อเนื่องจนเดือดเป็นเวลา 1 หรือ 2 นาที
การเตรียมอาหารเลี้ยงเชื้อ.
จากนั้นใส่ขวดลงในหม้อนึ่งฆ่าเชื้อและฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิ 121 ° C เป็นเวลา 20 นาที
การฆ่าเชื้อในหม้อนึ่ง
ในตอนท้ายของเวลาจะถูกนำออกจากหม้อนึ่งและเสิร์ฟในจาน Petri ที่ปราศจากเชื้อโดยใช้เครื่องดูดควันแบบลามิเนตหรือเตา Bunsen
หากจานเลี้ยงเชื้อเป็นแบบใช้แล้วทิ้ง (พลาสติก) ต้องกระจายตัวกลางเมื่อวุ้นมีอุณหภูมิประมาณ 50 ° C เพื่อป้องกันไม่ให้เสียรูปทรงจากความร้อนที่มากเกินไป
ปล่อยให้แข็งตัวและจัดเก็บบนที่ใส่จานคว่ำและแช่เย็นที่ 2-8 ° C จนกว่าจะใช้
จานต้องได้รับการอบอุณหภูมิก่อนนำไปเพาะ ไม่ควรใช้แผ่นวุ้นสารอาหารหากมีการปนเปื้อนหรือขาดน้ำ
ต้องปรับ pH ของตัวกลางที่เตรียมไว้เป็น 7.3 ± 0.2
การประยุกต์ใช้งาน
เป็นอาหารเลี้ยงเชื้อที่ง่ายที่สุดที่ใช้ในห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยา สูตรนี้เหมาะสำหรับการเจริญเติบโตของแบคทีเรียที่ไม่ต้องการ
การใช้งานหลักมีคำอธิบายด้านล่าง:
เป็นพื้นฐานสำหรับการเตรียมวุ้นเลือด
สารนี้บางครั้งใช้เป็นฐานในการเตรียมวุ้นเลือดอย่างไรก็ตามไม่ใช่ฐานที่ใช้กันมากที่สุด
กระตุ้นการสร้างสปอร์ของแบคทีเรียที่สร้างสปอร์
อาหารเลี้ยงเชื้อนี้มีประโยชน์อย่างยิ่งสำหรับการกระตุ้นการสร้างสปอร์ของแบคทีเรียที่สร้างสปอร์เช่นบาซิลลัสเอสพี
สำหรับสิ่งนี้สายพันธุ์ของบาซิลลัสถูกหว่านและฟักตัวเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 ° C ในแอโรบิค เมื่อโคโลนีเติบโตขึ้นจานจะต้องได้รับความเค้นจากอุณหภูมินั่นคืออุณหภูมิของเตาอบจะเพิ่มขึ้นเป็น 44 ° C และทิ้งไว้อีก 24 ชั่วโมงหรือวางไว้ในตู้เย็นเป็นเวลา 24 ชั่วโมง
ในตอนท้ายของเวลาจะมีการทำรอยเปื้อนของวัฒนธรรมและย้อมด้วยคราบแกรมหรือด้วยคราบสปอร์ของ Shaeffer-Fulton จะสังเกตเห็นบาซิลลัสที่มีเอนโดสปอร์ (สปอร์ภายในบาซิลลัส) และเอ็กโซสปอร์ (สปอร์นอกบาซิลลัส)
การบำรุงรักษาสายพันธุ์
ห้องปฏิบัติการสนับสนุนการวิจัยหรือการสอนของมหาวิทยาลัยบางแห่งต้องการการรักษาแบคทีเรียที่มีชีวิตที่มีความสำคัญทางคลินิกให้นานที่สุดเพื่อที่จะใช้ธนาคารแบคทีเรีย (bacterioteca) สำหรับงานวิจัยหรือเพื่อเตรียมการสอนโดยที่ นักเรียนจะได้เรียนรู้การจัดการและระบุจุลินทรีย์เหล่านี้
สามารถใช้วุ้นสารอาหารเช่นเดียวกับวุ้นแช่หัวใจในสมองเพื่อจุดประสงค์นี้ เตรียมวุ้นแล้วเทลงในหลอดที่มีฝาเบกาไลต์และเอียงบนฐานในลักษณะที่วุ้นแข็งตัวเป็นบล็อกที่ด้านล่างและเอียงบนพื้นผิว (จะงอยปากขลุ่ย)
แต่ละหลอดจะมีป้ายชื่อแบคทีเรียที่จะเพาะและวันที่ แบคทีเรียแต่ละตัวจะถูกเพาะบนมุมเอียงและฟักตัวเป็นเวลา 24 ชั่วโมงเมื่อโคโลนีเติบโตขึ้นแล้วหลอดจะถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง
แบคทีเรียจะต้องได้รับการต่ออายุ 1 ถึง 3 เดือนเพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนและการคายน้ำของตัวกลางและการตายของแบคทีเรีย
เฉพาะแบคทีเรียที่ไม่จู้จี้จุกจิกเท่านั้นที่สามารถรักษาได้ด้วยวิธีนี้
จำนวนอาณานิคม
แม้ว่าจะมีวิธีการเฉพาะสำหรับการนับโคโลนีเช่นวุ้นการนับมาตรฐาน แต่ก็สามารถใช้วุ้นธาตุอาหารเพื่อจุดประสงค์นี้ได้ไม่ว่าจะโดยการเพาะเมล็ดด้วยไม้พาย drigalski หรือตามความลึก ด้วยเหตุนี้จึงมีประโยชน์อย่างมากในการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาของอาหารและน้ำ
กำลังดำเนินการทดสอบวินิจฉัย
เนื่องจากเป็นสื่อที่ไม่มีเลือดหรือสารปรุงแต่งอื่น ๆ จึงเหมาะอย่างยิ่งสำหรับการใช้โคโลนีที่ปลูกบนตัวกลางนี้เพื่อทำการทดสอบคาตาเลส
ในทำนองเดียวกันเนื่องจากสีอ่อนจึงถูกระบุให้ทำการทดสอบออกซิเดสโดยตรงบนพื้นที่ของวุ้นที่เพาะโดยไม่มีการรบกวน
การฟื้นตัวของแอโรบิกแบบมีโซฟิลิกจากน้ำเกลือเพื่อการพักผ่อนหย่อนใจ (ชายหาด)
วุ้นสารอาหารที่เตรียมด้วยน้ำทะเล 10% มีประโยชน์สำหรับการประเมินแอโรบิกแบบมีโซฟิลิกในน่านน้ำชายหาด
ด้วยวิธีนี้ระดับการปนเปื้อนที่แท้จริงที่น้ำมีกับจุลินทรีย์เหล่านี้สามารถชื่นชมได้เนื่องจากในตัวอย่างประเภทนี้ผลลัพธ์จะซ้อนทับกันเมื่อใช้อาหารเลี้ยงเชื้อที่เตรียมด้วยวิธีปกติ
สิ่งนี้แสดงให้เห็นโดย Cortez et al ในปี 2013 ในงานวิจัย
สิ่งนี้สามารถอธิบายได้เนื่องจากการเปลี่ยนแปลงอย่างกะทันหันที่แบคทีเรียได้รับเมื่อไปจากสภาพแวดล้อมที่มีอุณหภูมิสูงไปสู่สภาพแวดล้อมที่มีเกลือต่ำดังนั้นจุลินทรีย์จึงเข้าสู่สภาวะเฉื่อยชาซึ่งพวกมันสามารถทำงานได้ แต่ไม่สามารถเพาะปลูกได้
อ้างอิง
- "วุ้นที่มีคุณค่าทางโภชนาการ" Wikipedia สารานุกรมเสรี 13 ก.ย. 2559, 20:33 น. UTC. 29 ธ.ค. 2018, 21:04 น. th.wikipedia.org
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยาของ Bailey & Scott 12 เอ็ด อาร์เจนตินา. กองบรรณาธิการ Panamericana SA
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยา (ฉบับที่ 5) อาร์เจนตินาบรรณาธิการ Panamericana SA
- Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. ผลของอาหารเลี้ยงเชื้อที่เตรียมด้วยน้ำทะเลต่อดัชนีชี้วัดสุขภาพในน้ำทะเลของสปาใน Chichiriviche รัฐFalcónประเทศเวเนซุเอลา Rev Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
- Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M และ Cardoso M. คุณภาพทางจุลชีววิทยาของน้ำสำหรับการผสมเทียมสำหรับสุกร Cient.Agro.Amaz 2013; 1 (2): 42-49.
- García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). จุลชีววิทยาคลินิกในทางปฏิบัติ University of Cadiz รุ่นที่ 2. บริการสิ่งพิมพ์ UCA