การทดสอบข้าม: มีไว้เพื่ออะไรเทคนิคเหตุผลขั้นตอน - ยา

crossmatchมีจำนวนของการศึกษาในห้องปฏิบัติการจะดำเนินการเพื่อตรวจสอบว่าผลิตภัณฑ์ของเลือดจากผู้บริจาค (เลือดส่วนใหญ่ทั้งหมดและทรงกลมบรรจุ) จะเข้ากันได้กับเลือดของผู้รับ

เป็นการทดสอบเสริมเพิ่มเติมสำหรับความเข้ากันได้ของ ABO และปัจจัย Rh สาเหตุของการผสมข้ามสายพันธุ์คือบางครั้งบุคคลสองคน (ผู้รับบริจาค) อาจมีกลุ่ม ABO และ Rh เหมือนกัน แต่เลือดยังไม่เข้ากัน

ที่มา: unsplash.com

ความไม่ลงรอยกันดังกล่าวเกิดจากการมีแอนติบอดีต่อโปรตีนในเม็ดเลือดแดงที่เรียกว่าแอนติเจนเล็กน้อย แอนติเจนเหล่านี้ไม่ได้รับการทดสอบเป็นประจำเช่นเดียวกับกลุ่มเลือด (ABO) และปัจจัย Rh

เนื่องจากแอนติเจนเล็กน้อยมีน้อยกว่ามากและมีการแสดงออกที่แปรปรวนในแต่ละบุคคลดังนั้นจึงแทบเป็นไปไม่ได้ที่จะจัดกลุ่มเป็นหมวดหมู่ตามที่ทำกับกลุ่มและปัจจัย Rh

แต่เซลล์เม็ดเลือดแดงของผู้บริจาคจะผสมกับซีรั่มของผู้ป่วย (การทดสอบการจับคู่หลัก) และเซลล์เม็ดเลือดแดงของผู้ป่วยด้วยซีรั่มของผู้บริจาค (การทดสอบการจับคู่เล็กน้อย) เพื่อตรวจหาปฏิกิริยาแอนติเจน - แอนติบอดี

เมื่อมีแอนติบอดีต่อแอนติเจนเล็กน้อยไม่ว่าจะในซีรั่มของผู้ป่วยหรือผู้บริจาคการทดสอบจะบอกว่าเป็นบวกดังนั้นในกรณีส่วนใหญ่จะไม่สามารถถ่ายเลือดเฉพาะหน่วยได้

กลุ่ม ABO

เพื่อให้เข้าใจอย่างถ่องแท้ว่าปฏิกิริยาข้ามกลุ่มคืออะไรคุณต้องรู้พื้นฐานของกลุ่มเลือดก่อน

ในแง่นี้สิ่งที่สำคัญที่สุดคือต้องรู้ว่าเลือดสามารถแบ่งออกเป็นสี่กลุ่ม: A, B, AB และ O

แต่ละกลุ่มเหล่านี้แสดงออกบนพื้นผิวของเม็ดเลือดแดงโดยเฉพาะโปรตีน (แอนติเจน) ซึ่งระบุว่าเป็นองค์ประกอบแปลกปลอมโดยแอนติบอดีของตัวรับที่มีศักยภาพของกลุ่มอื่น

สิ่งที่โดดเด่นที่สุดเกี่ยวกับปฏิกิริยาของแอนติเจน - แอนติบอดีในการจับคู่เลือดคือไม่จำเป็นต้องมีการสัมผัสกับแอนติเจนก่อนเพื่อให้แอนติบอดีมีอยู่ สิ่งนี้เรียกว่าแอนติบอดีตามธรรมชาติ

แอนติบอดีตามธรรมชาติ

โดยทั่วไปแล้วเพื่อให้แอนติบอดีมีอยู่ในร่างกายของแต่ละบุคคลจำเป็นต้องให้เซลล์เม็ดเลือดขาวของบุคคลนั้นสัมผัสกับแอนติเจนก่อนหน้านี้

ซึ่งหมายความว่าในการสัมผัสครั้งแรกระหว่างแอนติเจนต่างประเทศและสิ่งมีชีวิตจะไม่มีแอนติบอดีเนื่องจากสิ่งเหล่านี้ถูกสร้างขึ้นในภายหลังหลังจากการสัมผัสครั้งแรก ดังนั้นจึงเป็นไปไม่ได้ที่ระบบภูมิคุ้มกันจะมีแอนติบอดีต่อตัวอย่างเช่นไวรัสบางชนิดหากไม่เคยสัมผัสกับไวรัสในอดีต

ข้อยกเว้นเพียงประการเดียวคือแอนติเจนต่อต้าน AB ในกรณีเหล่านี้บุคคลนั้นมีแอนติบอดีต่อแอนติเจนที่เซลล์เม็ดเลือดแดงของพวกเขาไม่มีแม้ว่าจะไม่เคยสัมผัสกับเม็ดเลือดแดงของบุคคลอื่นก็ตาม สิ่งนี้เรียกว่าแอนติบอดีตามธรรมชาติ

แอนติเจนและแอนติบอดีที่เกี่ยวข้องกับกลุ่มเลือด

กลุ่มเลือดถูกกำหนดในกรณีของระบบ ABO โดยการปรากฏตัวของแอนติเจนเฉพาะ (A หรือ B) บนเยื่อหุ้มเซลล์เม็ดเลือดแดงและในทางตรงกันข้ามแอนติบอดีต่อแอนติเจนที่ไม่มีอยู่บนเยื่อหุ้มเม็ดเลือดแดง

ดังนั้นคนที่มีหมู่เลือด A จะแสดงออกถึงแอนติเจน A ที่ผิวของเซลล์เม็ดเลือดแดงในขณะที่มีแอนติบอดีต่อต้าน B ในซีรั่ม

ในทางตรงกันข้ามในผู้ป่วยกลุ่ม B จะพบแอนติเจน B ในขณะที่แอนติบอดีต่อต้าน A

ขณะนี้ผู้ป่วยที่มีเลือด AB มีทั้งแอนติเจน A และ B ดังนั้นจึงไม่มีแอนติบอดีใด ๆ เนื่องจากการทำเช่นนี้จะทำลายเม็ดเลือดแดงของบุคคลนั้นได้

ค่อนข้างตรงกันข้ามเกิดขึ้นในกลุ่ม O โดยที่เยื่อหุ้มเม็ดเลือดแดงไม่มีแอนติเจนทั้งสองชนิด (ไม่มี A และ B) ในขณะที่ในซีรั่มมีแอนติบอดีต่อต้าน A และ Anti-B

ความไม่ลงรอยกันของกลุ่ม ABO

จากที่กล่าวมาข้างต้นความเข้ากันได้ของกลุ่มเลือด ABO สามารถอนุมานได้อย่างง่ายดายเนื่องจากการรู้แอนติเจนของเยื่อเม็ดเลือดแดงจะทำให้ทราบแอนติบอดีในซีรัมโดยอัตโนมัติ ดังนั้น:

- เลือด A เข้ากันได้กับกรุ๊ป A และกรุ๊ป O

- หมู่เลือด B เข้ากันได้กับเลือด B และ O

- ผู้ที่มีกรุ๊ป O สามารถรับเลือด O ได้เท่านั้น (เนื่องจากพวกเขามีแอนติบอดีต่อต้าน A และต่อต้าน B) แม้ว่าเลือดของพวกเขาจะได้รับจากกลุ่มอื่นทั้งหมดโดยไม่มีปัญหาเนื่องจากไม่มีแอนติเจน

- สุดท้าย. ผู้ที่มีหมู่เลือด AB สามารถรับเลือดจากกลุ่มอื่น ๆ ทั้งหมด (A, B, O และแน่นอน AB) เนื่องจากพวกเขาไม่มีแอนติบอดีต่อแอนติเจนใด ๆ อย่างไรก็ตามเฉพาะคนในกลุ่ม AB เท่านั้นที่สามารถรับเลือด AB ได้เนื่องจากกลุ่มอื่น ๆ ทั้งหมดมีแอนติบอดีที่จะทำลายเม็ดเลือดแดงเหล่านี้

แอนติเจนเล็กน้อย

เช่นเดียวกับกลุ่ม ABO ชุดของโปรตีนสามารถพบได้บนพื้นผิวของเม็ดเลือดแดงที่ทำหน้าที่เป็นแอนติเจนในลักษณะเดียวกับแอนติเจนของกลุ่ม ABO

อย่างไรก็ตามแอนติเจนเหล่านี้ไม่ได้มีอยู่ในทุกคน การรวมกันของพวกเขาไม่เหมือนกันและการแทรกซึม (ระดับการแสดงออกของโปรตีน) เป็นตัวแปรดังนั้นการจำแนกเป็นกลุ่มเช่นเดียวกับที่มีอยู่สำหรับ ABO และ Rh จึงเป็นไปไม่ได้ นี่คือที่มาของชื่อของมันจาก "แอนติเจนเล็กน้อย" หรือที่เรียกว่า "แอนติเจนที่มีอุบัติการณ์ต่ำ"

แม้ว่าจะไม่บ่อยนัก แต่ก็อาจมีแอนติบอดีตามธรรมชาติต่อแอนติเจนเล็กน้อย ในบรรดาสิ่งที่พบมากที่สุด ได้แก่ Lewis, MNSs, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb และ Kidd พวกเขาทั้งหมดรับผิดชอบต่อปฏิกิริยาการแตกของเม็ดเลือดและหลังการถ่ายเลือดที่รุนแรงมาก

นอกจากนี้อาจเกิดอาการแพ้ต่อแอนติเจนเล็กน้อยจากการสัมผัสครั้งก่อนไม่ว่าจะกับโปรตีนแอนติเจนดังกล่าวเนื่องจากการถ่ายครั้งก่อนหรือเนื่องจากภูมิคุ้มกันข้าม

ข้ามภูมิคุ้มกัน

มีการกล่าวกันว่ามีภูมิคุ้มกันข้ามกันเมื่อแอนติเจนสองชนิดจากสองแหล่งที่แตกต่างกัน (เช่นเซลล์เม็ดเลือดแดงและแบคทีเรีย) มีความคล้ายคลึงกันมากจนถึงขั้นที่แอนติบอดีต่อโปรตีนแอนติเจนตัวใดตัวหนึ่งเหล่านี้ทำปฏิกิริยากับอีกชนิดหนึ่งด้วยเพราะเกือบจะเหมือนกัน .

เพื่อให้เข้าใจสิ่งนี้ได้ดีขึ้นให้ใช้ตัวอย่างสมมุติฐานก่อนหน้านี้ (แอนติเจนจากเม็ดเลือดแดงและแบคทีเรีย) ไม่ว่าในกรณีใดก็ตามจะไม่มีแอนติบอดีตามธรรมชาติ แต่ถ้าคนสัมผัสกับแบคทีเรียพวกเขาจะสร้างแอนติบอดีต่อมัน

แอนติบอดีดังกล่าวจะตอบสนองต่อเซลล์เม็ดเลือดแดงในภายหลังหากแอนติเจนของมันคล้ายคลึงกับแบคทีเรียที่กระตุ้นให้แอนติบอดีก่อตัวขึ้น

หากเกิดเหตุการณ์นี้ขึ้นเซลล์เม็ดเลือดแดงที่มีโปรตีนแอนติเจนนั้นจะไม่สามารถมอบให้กับผู้ที่มีแอนติบอดีได้เนื่องจากจะถูกปฏิเสธ ในที่นี้คือความสำคัญของปฏิกิริยาข้าม

crossmatching คืออะไร?

เนื่องจากเป็นไปไม่ได้ที่จะจัดกลุ่มเลือดของบุคคลที่แตกต่างกันโดยพิจารณาจากแอนติเจนเล็กน้อยวิธีเดียวที่จะทราบได้ว่ามีแอนติบอดีต่อแอนติเจนเล็กน้อยของเซลล์เม็ดเลือดแดงของบุคคลอื่นในเลือดของบุคคลหนึ่งหรือไม่คือการผสมข้ามสายพันธุ์ .

ในกรณีที่มีแอนติบอดีอยู่จะมีการกระตุ้นให้เกิดปฏิกิริยาการแตกของเม็ดเลือดแดงหรือการเกาะกลุ่มซึ่งเป็นสาเหตุที่สรุปได้ว่าปฏิกิริยาเป็นบวก นั่นคือมีแอนติบอดีต่อแอนติเจนเล็กน้อย (แม้ว่าจะไม่ทราบแน่ชัดว่าอันไหน) มิฉะนั้นการทดสอบจะเป็นลบ

รากฐาน

Crossmatches ขึ้นอยู่กับปฏิกิริยาแอนติเจน - แอนติบอดี ดังนั้นจึงเป็นไปได้ที่จะตรวจพบว่ามีแอนติบอดีในซีรัมของผู้รับต่อแอนติเจนของเม็ดเลือดแดงของผู้บริจาคหรือไม่ (หรือในทางกลับกัน) ทำให้เกิดปฏิกิริยาแอนติเจน - แอนติบอดี

หากไม่มีแอนติบอดีจะไม่มีปฏิกิริยาใด ๆ เกิดขึ้นและการทดสอบจะรายงานเป็นลบ ในทางตรงกันข้ามหากปฏิกิริยาเป็นบวก (มีการแตกของเม็ดเลือดแดงหรือการเกาะกลุ่มระหว่างการทดสอบ) สามารถสรุปได้ว่ามีแอนติบอดีอยู่

ในแง่นี้สิ่งสำคัญคือต้องสังเกตว่าอาจมีแอนติบอดีต่อเซลล์เม็ดเลือดแดงทั้งในซีรั่มของผู้บริจาคและผู้รับ นี่คือเหตุผลที่มีปฏิกิริยาข้ามสองประเภท

ประเภทของปฏิกิริยาข้าม

แอนติบอดีต่อเม็ดเลือดแดงของผู้บริจาคอาจมีอยู่ในซีรั่มของผู้ป่วย แต่สิ่งที่ตรงกันข้ามก็สามารถเกิดขึ้นได้เช่นกันนั่นคือแอนติบอดีในซีรั่มของผู้บริจาคกับเม็ดเลือดแดงของผู้ป่วย

นั่นคือเหตุผลที่มีการจับคู่สองประเภท:

- การจับคู่ที่สำคัญ

- ครอสแมตช์เล็กน้อย

ทั้งสองประเภทจะดำเนินการเป็นประจำในธนาคารเลือดก่อนที่จะถ่ายเลือดเนื่องจากหากการทดสอบใด ๆ เป็นบวกจะมีความเสี่ยงสูงที่จะเกิดปฏิกิริยาการถ่ายเลือดซึ่งอาจเป็นอันตรายต่อชีวิตของผู้ป่วย

crossmatch ที่สำคัญ

การทดสอบนี้จะประเมินว่าซีรั่มของผู้รับมีแอนติบอดีต่อเซลล์เม็ดเลือดแดงของผู้บริจาคหรือไม่

หากเกิดเหตุการณ์นี้ขึ้นจะไม่สามารถให้ผลิตภัณฑ์เลือดได้เนื่องจากแอนติบอดีจำนวนมากที่มีอยู่ในพลาสมาของผู้ป่วยจะทำลายเซลล์เม็ดเลือดแดงของผู้บริจาคอย่างรวดเร็วทำให้เกิดปฏิกิริยาหายนะในร่างกายของผู้รับในกระบวนการ ปฏิกิริยาเหล่านี้รุนแรงมากจนอาจเป็นอันตรายถึงชีวิตได้

ครอสแมตช์เล็กน้อย

ในกรณีนี้จะพิจารณาว่ามีแอนติบอดีต่อเซลล์เม็ดเลือดแดงของผู้รับในซีรั่มของผู้บริจาคหรือไม่

ถ้าเป็นเช่นนั้นแอนติบอดีจะเริ่มทำลายเม็ดเลือดแดงของผู้รับ อย่างไรก็ตามเนื่องจากปริมาณแอนติบอดีมี จำกัด ปฏิกิริยาจึงรุนแรงน้อยลง แม้ว่าจะยังคงอันตราย

ขั้นตอน

ทั้ง crossmatch หลักและรองแบ่งออกเป็นสามขั้นตอน:

- น้ำเกลือ

- ความร้อนหรือการบ่ม

- คูมบ์ส

ในระยะแรกเม็ดเลือดแดงและซีรั่มจะผสมในน้ำเกลือ จากนั้นจึงเพิ่มอัลบูมินและตัวอย่างจะถูกบ่มที่อุณหภูมิ37ºCเป็นเวลา 30 นาทีเพื่อดำเนินการขั้นตอนคูมบ์สในที่สุด

เทคนิค

เทคนิค crossmatch ค่อนข้างตรงไปตรงมาเนื่องจากเกี่ยวข้องกับการเพิ่มเซลล์เม็ดเลือดแดงของผู้บริจาคลงในซีรั่มของผู้ป่วย (major crossmatch) รวมทั้งเม็ดเลือดแดงของผู้รับไปยังซีรั่มของผู้บริจาค (minor crossmatch)

เพื่อกระตุ้นให้เกิดปฏิกิริยาแอนติเจน - แอนติบอดีในเวลาอันสั้นต้องปฏิบัติตามขั้นตอนที่เป็นมาตรฐานหลายขั้นตอน ขั้นตอนเหล่านี้สรุปเป็นวิธีที่ง่ายด้านล่าง

สิ่งสำคัญคือต้องทราบว่าส่วนถัดไปจะอธิบายถึงการทดสอบความเข้ากันได้ที่สำคัญแม้ว่าขั้นตอนจะเหมือนกันสำหรับการทดสอบความเข้ากันได้เล็กน้อย แต่เป็นการแลกเปลี่ยนที่มาของเซลล์เม็ดเลือดแดงและซีรั่ม

ระยะน้ำเกลือ

- เติมเซรุ่ม 2 หยดลงในหลอดทดลองจากผู้รับ (จากผู้บริจาคหากเป็นการผสมข้ามสายเล็กน้อย)

- เก็บตัวอย่างเม็ดเลือดแดงจากผู้บริจาค (จากผู้รับหากเป็นการผสมข้ามสายเล็กน้อย)

- ล้างและปั่นแยกเม็ดเลือดแดง

- นำกลับมาใช้ใหม่ในการแก้ปัญหาระหว่าง 3% ถึง 5%

- หยดสารละลายนี้ลงในหลอดที่มีเซรุ่มของผู้รับบริการ

- ผสมเบา ๆ

- เครื่องหมุนเหวี่ยง.

- อ่านผลลัพธ์ในไฟแสดงผล

เฟสความร้อน

- เติมอัลบูมิน 22% 2 หยดลงในท่อที่ระยะน้ำเกลือเสร็จสิ้น

- บ่มที่อุณหภูมิ37ºCเป็นเวลา 30 นาที

- หมุนเหวี่ยงเป็นเวลา 15 วินาที

- อ่านผลลัพธ์ในไฟแสดงผล

เฟสคูมบ์ส

- นำเซลล์ออกจากท่อแล้วล้างด้วยน้ำเกลือ

- กำจัดสิ่งเหนือชั้น

- เติมน้ำยาคูมบ์สสองหยด