วุ้นสีเขียวสดใส: เหตุผลการเตรียมและการใช้งาน - ชีววิทยา - 2026

วุ้นสีเขียวสดใสเป็นสื่อวัฒนธรรมที่มั่นคงกับระดับสูงของการคัดสรร ใช้สำหรับการแยกสายพันธุ์ของเชื้อ Salmonella เท่านั้นอย่างไรก็ตามมีข้อยกเว้นบางประการเช่นสายพันธุ์ไทธีและพาราไทฟีที่ไม่เติบโตในอาหารชนิดนี้

การค้นหาสกุล Salmonella มักพบบ่อยในตัวอย่างอุจจาระน้ำหรืออาหาร ในแง่นี้สื่อนี้จะมีประโยชน์มาก วุ้นนี้ถูกสร้างขึ้นในปีพ. ศ. 2468 โดย Kristensen, Lester และ Jurgens ต่อมาได้รับการแก้ไขโดย Kauffmann

วุ้นสีเขียวสดใส โคโลนีการหมักและไม่หมักตามลำดับ ที่มา: นิทรรศการ MJ Richardson / Invisible Worlds - 2012geograph.org.uk/photo/2815842 Creative Commons License

ประกอบด้วย pluripeptones จากการย่อยในเนื้อเยื่อสัตว์ในกระเพาะอาหารและการย่อยเคซีนของตับอ่อนนอกจากนี้ยังมีสารสกัดจากยีสต์โซเดียมคลอไรด์แลคโตสซูโครสฟีนอลแดงสีเขียวสดใสและวุ้นในวุ้น

มีลักษณะเฉพาะคือเป็นสภาพแวดล้อมที่ไม่เอื้ออำนวยสำหรับแบคทีเรียส่วนใหญ่โดยชอบการเจริญเติบโตของเชื้อ Salmonella อย่างไรก็ตามโคลิฟอร์มบางชนิดมีความสามารถในการดำรงชีวิตอยู่ได้และมีการพัฒนาที่อ่อนแอ

สิ่งสำคัญคือต้องสังเกตว่าสกุล Shigella ไม่เติบโตในอาหารชนิดนี้และไม่พบเชื้อ Salmonella typhimurium หรือ Salmonella paratyphi ดังนั้นหากคุณต้องการแยกจุลินทรีย์เหล่านี้ควรใช้สื่ออื่น ๆ เช่น XLD agar เป็นต้น

รากฐาน

วุ้นสีเขียวสดใส

ส่วนประกอบแต่ละอย่างที่ประกอบเป็นสื่อกลางทำหน้าที่เฉพาะที่กำหนดลักษณะและคุณสมบัติของวุ้น

Pluripeptones และสารสกัดจากยีสต์เป็นแหล่งของสารอาหารที่จุลินทรีย์ใช้ไนโตรเจนและแร่ธาตุที่จำเป็นต่อการพัฒนา แลคโตสและซูโครสเป็นแหล่งพลังงานสำหรับจุลินทรีย์ที่สามารถหมักได้

สีเขียวสดใสเป็นสารยับยั้งการเจริญเติบโตของแบคทีเรียแกรมบวกและจุลินทรีย์แกรมลบจำนวนมาก

โซเดียมคลอไรด์ให้ความเสถียรของออสโมติกกับตัวกลาง ในขณะที่ฟีนอลสีแดงเป็นตัวบ่งชี้ pH จะเปลี่ยนสีเมื่อตรวจพบการผลิตกรดจากการหมักคาร์โบไฮเดรต

โคโลนีของแลคโตสและซูโครสที่ไม่ผ่านการหมักจะเติบโตบนอาหารชนิดนี้ในสีขาวอมชมพูหรือโปร่งใสบนพื้นสีแดง ตัวอย่างเช่นแบคทีเรียในสกุล Salmonella

ในขณะที่แบคทีเรียในการหมักแลคโตสหรือซูโครสที่สามารถเจริญเติบโตบนตัวกลางนี้จะพัฒนาโคโลนีสีเหลืองสีเขียวหรือสีเขียวเหลืองบนพื้นสีเหลืองอมเขียว ตัวอย่างเช่น Escherichia coli และ Klebsiella pneumoniae

วุ้นสีเขียวสดใส (BGA)

วุ้นสีเขียวสดใสมีหลายสายพันธุ์ Novobiocin Brilliant Green Glucose (NBG) Agar และ Novobiocin Brilliant Green Glycerol Lactose (NBGL) Agar

Novobiocin Bright Green Glucose Agar

ประกอบด้วย Trypticase Soy Agar, Ferric Ammonium Citrate, Sodium Thiosulfate Pentahydrate, Phenol Red, Glucose, Bright Green, Novobiocin และ Distilled Water

ใช้สำหรับการแยกโคโลนีซัลโมเนลลาจากตัวอย่างอุจจาระ

ในกรณีนี้สีเขียวสดใสและโนโวบิโอซินเป็นสารยับยั้งการเจริญเติบโตของแบคทีเรียแกรมบวกและจุลินทรีย์แกรมลบบางชนิด

โซเดียมไธโอซัลเฟตเป็นแหล่งที่มาของซัลไฟด์และเฟอร์ริกซิเตรตเป็นแหล่งของเหล็กทั้งที่จำเป็นในการเปิดเผยการผลิตไฮโดรเจนซัลไฟด์ผ่านการก่อตัวของการตกตะกอนของเฟอร์ริกซัลไฟด์สีดำ

กลูโคสเป็นคาร์โบไฮเดรตที่หมักได้และฟีนอลเรดเป็นตัวบ่งชี้ pH

ในสื่อนี้อาณานิคมของ Salmonella จะมีขนาดใหญ่โดยมีจุดศูนย์กลางสีดำล้อมรอบด้วยรัศมีสีแดงและตามด้วยบริเวณที่มองเห็นได้ชัดเจน Citrobacter freundii บางสายพันธุ์สร้างอาณานิคมที่เหมือนกับเชื้อ Salmonella

Novobiocin Brilliant Green Glycerol Lactose Agar (NBGL)

สารนี้ประกอบด้วยวุ้นถั่วเหลืองทริปทิเคสเฟอริกแอมโมเนียมซิเตรตโซเดียมไธโอซัลเฟตแลคโตสกลีเซอรอลสีเขียวสดใสโนโวบิโอซินและน้ำกลั่น

ความแตกต่างระหว่างตัวกลางนี้กับสารก่อนหน้าคือไม่ใช้น้ำตาลกลูโคสทดแทนด้วยแลคโตสกลีเซอรอลและฟีนอลเรด

นอกจากนี้ยังใช้สื่อเพื่อแยกสายพันธุ์ซัลโมเนลลาอาณานิคมจะพัฒนาเป็นสีดำเนื่องจากการผลิตก๊าซไข่เน่า

เฉพาะโคโลนีที่ไม่สร้างกรดจากกลีเซอรอลหรือแลคโตสเท่านั้นที่สามารถผลิต H ₂ S ได้เพียงพอเนื่องจาก pH ต่ำจะขัดขวางการสร้าง H ₂ S ส่งผลให้โคโลนีไม่มีสีสำหรับสิ่งมีชีวิตส่วนใหญ่ Proteus และ Citrobacter

การจัดเตรียม

- น้ำหนัก 58 กรัมของตัวกลางที่ขาดน้ำที่ได้จากการค้า เติมลงในน้ำกลั่น 1 ลิตร ผสมทิ้งไว้สักครู่แล้ววางส่วนผสมบนแหล่งความร้อนจนละลายหมด

-Autoclave ที่ 121 ° C เป็นเวลา 15 นาทีไม่เกินเวลาฆ่าเชื้อ

- พักไว้และเสิร์ฟขณะร้อนในจานเพาะเชื้อที่ผ่านการฆ่าเชื้อ pH สุดท้ายควรเป็น 6.9 ± 0.2

- ปล่อยให้แข็งตัวและเก็บไว้ในตู้เย็นจนกว่าจะใช้ ก่อนที่จะเพาะเมล็ดควรใช้อุณหภูมิห้อง

- ตัวกลางของแป้งมีสีเขียวและมีสีน้ำตาลอมส้มหรือสีเขียวอมแดงขึ้นอยู่กับ pH และ บริษัท การค้า สีน้ำตาลมากบ่งบอกว่าวุ้นร้อนเกินไป

- เมื่อวุ้นแข็งตัวแล้วไม่แนะนำให้ทำใหม่เนื่องจากตัวกลางเสื่อมสภาพ

การใช้งาน / การใช้งาน

สื่อนี้ใช้เพื่อค้นหาสายพันธุ์ของเชื้อ Salmonella จากตัวอย่างอุจจาระและอาหารที่ทำจากนมเป็นต้น

เนื่องจากเป็นสภาพแวดล้อมที่ไม่เอื้ออำนวยจึงแนะนำให้หว่านหัวเชื้อที่มีปริมาณมากหากใช้ตัวอย่างโดยตรง มิฉะนั้นควรมีการเตรียมการก่อนการตกแต่งและการเพิ่มคุณภาพของตัวอย่างก่อนที่จะหว่านลงในสื่อนี้

เนื่องจากเชื้อซัลโมเนลลาบางสายพันธุ์ถูกยับยั้งหรือเจริญเติบโตได้ยากจึงแนะนำให้ใช้อาหารชนิดนี้ร่วมกับเชื้ออื่น ๆ สำหรับเชื้อ Salmonella

ทุกอาณานิคมที่มีลักษณะเฉพาะของเชื้อ Salmonella จะต้องถูกส่งไปยังการทดสอบทางชีวเคมีเพื่อระบุตัวตนที่ชัดเจน

ระบบประกันคุณภาพ

เพื่อทดสอบประสิทธิภาพที่ดีของอาหารเลี้ยงเชื้อสีเขียวสดใสสามารถใช้สายพันธุ์ ATCC เพื่อสังเกตการพัฒนาของมันได้

สายพันธุ์ที่ใช้ในการควบคุมคุณภาพบ่อยที่สุด ได้แก่ Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Escherichia coli ATCC 25922, Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus

3 อันดับแรกควรให้โคโลนีสีขาวอมชมพูหรือโปร่งใสบนพื้นหลังสีแดง Salmonella ที่มีพัฒนาการที่ดีและ Proteus ที่มีการเจริญเติบโตน้อยหรือสม่ำเสมอ

สำหรับ Klebsiella และ Escherichia คาดว่าจะมีโคโลนีสีเหลืองสีเขียวที่มีพื้นหลังสีเหลืองและในกรณีของ Shigella และ Staphylococcus ควรถูกยับยั้ง

สื่อที่ขาดน้ำจะต้องเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องในที่แห้งเนื่องจากตัวกลางนั้นดูดความชื้นได้มาก

อ้างอิง

1. Laboratorio Difco Francisco Soria Melguizo SA Brilliant Green Agar 2009
2. ห้องปฏิบัติการ Britannia วุ้นสีเขียวสดใส 2015
3. ห้องปฏิบัติการ BD BD วุ้นเขียวสดใส 2013
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยา (ฉบับที่ 5) อาร์เจนตินาบรรณาธิการ Panamericana SA
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. 2009. Bailey & Scott Microbiological Diagnosis. 12 เอ็ด อาร์เจนตินา. กองบรรณาธิการ Panamericana SA