TRYPTICASEIN SOY AGAR: เหตุผลการเตรียมและการใช้งาน - ชีววิทยา - 2026

ถั่วเหลืองวุ้น Tryptoneหรือ Trypticase ถั่วเหลืองวุ้นเป็นสื่อวัฒนธรรมเป็นของแข็งและ nonselective ทางโภชนาการ มันถูกกำหนดโดยตัวอักษร TSA สำหรับตัวย่อในภาษาอังกฤษ Trypticase Soy Agar ประกอบด้วย triptein, peptone ถั่วเหลือง, โซเดียมคลอไรด์และ agar-agar

เนื่องจากมีคุณค่าทางโภชนาการสูงจึงเหมาะอย่างยิ่งสำหรับการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่มีความต้องการปานกลางและไม่ต้องการ ไม่แนะนำให้ใช้อาหารขนาดกลางที่ไม่มีอาหารเสริมเพิ่มเติมสำหรับวัฒนธรรมหลัก แต่มีประโยชน์มากสำหรับการเพาะเลี้ยงสายพันธุ์แท้ย่อยและทำให้พวกมันทำงานได้ดีรวมถึงการใช้งานอื่น ๆ

วุ้นถั่วเหลืองทริปทิเคซินในหลอดที่มีฝาเบกาไลท์ ที่มา: ภาพถ่ายโดยผู้เขียน MSc. Marielsa Gil.

นอกจากนี้วุ้นนี้ยังทำหน้าที่เป็นฐานในการเตรียมอาหารเสริมเช่นวุ้นในเลือดโดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อจำเป็นต้องสังเกตรูปแบบการแตกของเม็ดเลือดแดงและการติดออปโตควินและบาซิทราซินแทกซาซึ่งจำเป็นในการวินิจฉัย Streptococcus pneumoniae และ Streptococcus pyogenes ตามลำดับ

ในทางกลับกันเมื่อรวมกับยาปฏิชีวนะจะมีประโยชน์ในการแยกจุลินทรีย์ที่ไม่ใช้ออกซิเจนที่มีความสำคัญทางคลินิกและเข้มงวดออกจากตัวอย่างที่มีพืชผสม

ในที่สุดองค์ประกอบของวุ้นถั่วเหลืองทริปทิเคซินและประสิทธิภาพจะเป็นไปตามข้อกำหนดที่กำหนดโดยเภสัชตำรับต่างๆ (ยุโรปญี่ปุ่นและอเมริกาเหนือ)

รากฐาน

เพื่อการพัฒนาที่เหมาะสมของแบคทีเรียจำเป็นต้องมีแหล่งพลังงานเช่นกรดอะมิโนวิตามินเบสพิวริกและไพริมิดิก

ในแง่นี้ triptein และ peptone จากถั่วเหลืองจะให้สารอาหารเหล่านี้แก่จุลินทรีย์ดังนั้นจึงสามารถพัฒนาได้เต็มที่ อย่างไรก็ตามสำหรับแบคทีเรียที่จุกจิกจำเป็นต้องเสริมวุ้นนี้ด้วยเลือดที่ช็อกหรือเลือดอุ่นเพื่อเพิ่มคุณค่าทางโภชนาการ

ในทางกลับกันหากมีการเพิ่มยาปฏิชีวนะลงในสื่อก็จะกลายเป็นสื่อเลือก นอกจากนี้ยังสามารถเพิ่มสารสกัดจากยีสต์ 0.6% เพื่อช่วยในการแยกชนิดของสกุลลิสเตอเรียในขณะที่การเติมซีสตีนเทลลูไรต์และเลือดของลูกแกะนั้นเหมาะสำหรับ Corynebacterium diphteriae

ในที่สุดโซเดียมคลอไรด์จะให้สมดุลออสโมติกให้กับตัวกลางและวุ้นจะให้ความสม่ำเสมอของของแข็ง

การจัดเตรียม

Trypticasein Soy Agar Plates

ในการเตรียมวุ้นถั่วเหลืองทริปทิเคซินควรชั่งน้ำหนักตัวกลางทางการค้าที่ขาดน้ำ 40 กรัมในเครื่องชั่งดิจิตอล ละลายในน้ำกลั่นหนึ่งลิตรที่บรรจุอยู่ในขวด

พักส่วนผสมไว้ 5 นาทีจากนั้นจึงนำไปยังแหล่งความร้อนเพื่อช่วยละลายตัวกลาง ควรกวนบ่อยๆและต้มประมาณ 1 ถึง 2 นาที ต่อจากนั้นตัวกลางจะถูกฆ่าเชื้อในหม้อนึ่งที่อุณหภูมิ 121 ° C เป็นเวลา 15 นาที

ปล่อยให้เย็นถึง 50 ° C และแจกจ่ายลงในจานเพาะเชื้อที่ปราศจากเชื้อ อนุญาตให้แข็งตัวกลับด้านสั่งใน plaqueros และเก็บในตู้เย็น

pH สุดท้ายของตัวกลางควรเป็น 7.3 ± 0.2

ควรสังเกตว่าสีของอาหารเลี้ยงเชื้อที่ขาดน้ำเป็นสีเบจอ่อนและควรเก็บไว้ระหว่าง 10 ถึง 35 ° C ในที่แห้ง

ในส่วนของวุ้นที่เตรียมไว้จะมีสีเหลืองอำพัน ควรเก็บจานที่เตรียมไว้ในตู้เย็น (2-8 ° C) จนกว่าจะใช้

แผ่นต้องถึงอุณหภูมิห้องก่อนใช้

แผ่นวุ้นจากถั่วเหลือง Trypticasein เสริมด้วยเลือด

เตรียมวุ้นในเลือดโดยการเติมเลือดที่ช็อกไฟฟ้า 5% ในขณะที่ทำให้วุ้นถั่วเหลืองทริปซิเคซินเย็นตัวลงที่ 50 ° C ส่วนผสมถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกันโดยการหมุนด้วยการเคลื่อนไหวที่นุ่มนวล

เสิร์ฟในจาน Petri ที่ปราศจากเชื้อ สีกลางควรเป็นสีแดงเชอร์รี่

แผ่นวุ้นถั่วเหลืองทริปซิเคซินเสริมด้วยเลือดอุ่น ๆ

ในการเตรียมวุ้นเลือดที่ใช้ TSA ให้ดำเนินการเช่นเดียวกับขั้นตอนที่อธิบายไว้แล้ว แต่เมื่อออกจากหม้อนึ่งจะต้องพักไว้จนกว่าอุณหภูมิของตัวกลางจะอยู่ระหว่าง 56 ถึง 70 ° C โดยประมาณ ในขณะนั้นเลือดจะถูกวางและผสมจนตัวกลางเปลี่ยนเป็นสีน้ำตาล

เสิร์ฟในจาน Petri ที่ปราศจากเชื้อ สีกลางเป็นสีน้ำตาลช็อคโกแลต

Trypticasein Soy Agar Wedges

ขั้นตอนการเตรียมวุ้นจะเหมือนกับที่อธิบายไว้สำหรับจานโดยมีความแตกต่างที่แทนที่จะให้อาหารกลางบนจาน Petri จะมีการกระจายระหว่าง 10 ถึง 12 มล. ในหลอดที่มีฝา Bakelite ก่อนฆ่าเชื้อ

ต่อจากนั้นหลอดจะถูกนึ่งที่อุณหภูมิ 121 ° C เป็นเวลา 15 นาที เมื่อพวกเขาจากไปพวกเขามีแนวโน้มที่จะได้รับความช่วยเหลือจากการสนับสนุนและได้รับอนุญาตให้แข็งตัว

เวดจ์ที่เตรียมไว้จะถูกหว่านตามพื้นที่ผิวและทำหน้าที่เพื่อให้จุลินทรีย์บางชนิดที่ไม่ต้องการใช้งานได้ตามเวลาที่กำหนด

การประยุกต์ใช้งาน

Trypticasein Soy Agar ใช้ในกรณีต่อไปนี้:

- เป็นฐานในการเตรียมวุ้นเลือดแบบคลาสสิกที่ใช้เป็นประจำในห้องปฏิบัติการส่วนใหญ่

- การแยกแบคทีเรียที่ต้องการ

- การสังเกตรูปแบบการแตกของเม็ดเลือดแดง

- ดำเนินการทดสอบวินิจฉัย

- เป็นฐานในการเตรียมวุ้นเลือดพิเศษสำหรับ Corynebacterium diphteriae โดยมีซีสตีนเทลลูไรต์และเลือดของเนื้อแกะ

- เป็นฐานในการเตรียมวุ้นเลือดเนื้อแกะรวมทั้งคานามัยซิน - แวนโคไมซินสำหรับการเจริญเติบโตของแอนแอโรบิคโดยเฉพาะ Bacteroides sp.

- สำหรับการบำรุงรักษาสายพันธุ์ที่ไม่ต้องการ (Bacterioteca)

- จำนวนจุลินทรีย์แบบแอโรบิคในการศึกษาขีด จำกัด ของจุลินทรีย์ในน้ำสิ่งแวดล้อมอาหารและตัวอย่างเครื่องสำอาง

หว่าน

ตัวอย่างสามารถหว่านลงบนพื้นผิวของโปรตีนถั่วเหลืองทริปซิเคซินได้โดยตรงที่เสริมด้วยเลือดหรือสารเติมแต่งอื่น ๆ มันหว่านด้วยความเหนื่อยล้า

ในขณะที่แผ่นวุ้นถั่วเหลืองทริปซิเคซินที่ไม่มีสารเติมแต่งมักใช้กับสายพันธุ์จุลินทรีย์ย่อย (แบคทีเรียหรือยีสต์)

ระบบประกันคุณภาพ

การควบคุมความเป็นหมัน

ในการตรวจสอบความเป็นหมันของอาหารเลี้ยงเชื้อชนิดต่างๆที่เตรียมด้วยวุ้นฐานถั่วเหลืองทริปซิเคซินขอแนะนำดังต่อไปนี้: จากแต่ละชุดที่เตรียมไว้ควรบ่มแผ่นหรือท่อที่ไม่ได้ใส่เชื้อ 1 หรือ 2 แผ่นที่อุณหภูมิ 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมงเพื่อแสดงความเป็นหมัน ในทุกกรณีจะต้องอยู่โดยไม่มีการเติบโต

หากพบการปนเปื้อนต้องทิ้งทั้งชุด

การควบคุมการเจริญเติบโต

สามารถใช้แบคทีเรียสายพันธุ์ต่อไปนี้เพื่อศึกษาการทำงานที่เหมาะสมของวุ้นถั่วเหลืองทริปทิเคซิน: Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aerugiosa ATCC 9027 และ Enterococcus faecalis ATCC 29212

สายพันธุ์ได้รับการเพาะเมล็ดและฟักตัวแบบแอโรบิคที่อุณหภูมิ 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง

ในทุกกรณีการเติบโตจะต้องเป็นที่น่าพอใจ

สามารถใช้เชื้อราเช่น Candida albicans Complex ATCC 10231 และ Aspergillus niger ATCC 16404 ได้เช่นกันคาดว่าจะมีการเจริญเติบโตที่ดีสำหรับทั้งสองสายพันธุ์

การควบคุมการเจริญเติบโตและรูปแบบการแตกของเม็ดเลือดแดงของวุ้นถั่วเหลืองทริปทิเคซินเสริมด้วยเลือด

ในการตรวจสอบการทำงานที่เหมาะสมของวุ้นในเลือดที่เตรียมด้วยฐานนี้สามารถใช้สายพันธุ์ต่อไปนี้: Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 และ Streptococcus pneumoniae ATCC 49619

พวกมันถูกเพาะและบ่มที่อุณหภูมิ 37 ° C ในสภาวะ microaerophilicity เป็นเวลา 24 ชั่วโมง

ในทุกกรณีการเจริญเติบโตควรเป็นที่น่าพอใจโดยคำนึงถึงว่าควรสังเกตเบต้า - เม็ดเลือดแดงแตก (รัศมีแสงรอบ ๆ อาณานิคม) ใน S. pyogenes และ alpha hemolysis (รัศมีสีเขียวรอบ ๆ อาณานิคม) ใน S. pneumoniae ทั้งสองสายพันธุ์ อาณานิคม)

อ้างอิง

1. ผู้ร่วมให้ข้อมูล Wikipedia Trypticase ฉันเป็นวุ้น Wikipedia สารานุกรมเสรี 17 ธันวาคม 2018, 15:47 น. UTC. ดูได้ที่: https://en.wikipedia.org
2. Britannia Laboratories วุ้นถั่วเหลือง Triptein 2558 ดูได้ที่: britanialab.com
3. ห้องปฏิบัติการนีโอเจน วุ้นถั่วเหลือง Tryptic มีจำหน่ายที่: foodsafety.neogen.com
4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยาของ Bailey & Scott 12 เอ็ด อาร์เจนตินา. กองบรรณาธิการ Panamericana SA
5. BD Laboratories Trypticase ฉันเป็น Agar 2557 ดูได้ที่: .bd.com