วุ้น Salmonella Shigellaยังเป็นที่รู้จักเอสเอสวุ้นเป็นเลือกและขนาดที่แตกต่างกันพอสมควรได้รับการออกแบบมาโดยเฉพาะสำหรับการแยกของแบคทีเรีย Enteropathogenic ของจำพวก Salmonella และ Shigella ทั้งตัวอย่างจากสิ่งแวดล้อมเช่นคลินิก
SS agar มีองค์ประกอบที่ซับซ้อน ประกอบด้วยสารสกัดจากเนื้อสัตว์เปปโตนแลคโตสเกลือน้ำดีโซเดียมซิเตรตโซเดียมไธโอซัลเฟตเฟอร์ริกซิเตรตวุ้นสีแดงที่เป็นกลางสีเขียวสดและน้ำกลั่น ด้วยการคัดเลือกที่ดีเยี่ยมจึงสามารถหว่านตัวอย่างที่มีพืชผสมจำนวนมากได้
SS agar กับอาณานิคมของ Salmonella sp. ที่มา: Manurx27 จาก Wikimedia Commons
ในห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยาสื่อ Salmonella-Shigella ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางเพื่อตรวจสอบการมีอยู่ของ Salmonella และ Shigella ในตัวอย่างอุจจาระอุจจาระน้ำเสียน้ำดื่มและอาหาร
บางครั้งจำเป็นต้องใช้น้ำซุปก่อนการเสริมคุณค่า (น้ำซุปแลคโตส) และน้ำซุปเสริมคุณค่า (น้ำซุปซีลีไนต์ซีสตีน) เพื่อฟื้นฟูสายพันธุ์ของเชื้อซัลโมเนลลา
ขั้นตอนเหล่านี้จำเป็นต้องใช้เมื่อสงสัยว่ามีเชื้อซัลโมเนลลาในปริมาณที่ต่ำมากหรือในกรณีที่ความเครียดอาจถูกทำร้ายโดยกระบวนการทั่วไปของการผลิตทางอุตสาหกรรมซึ่งส่วนใหญ่เป็นอาหารแปรรูป ขอแนะนำให้เพิ่มตัวอย่างอุจจาระจากผู้ป่วยที่ได้รับการรักษาด้วยยาปฏิชีวนะ
ต่อจากนั้นน้ำซุปที่ได้รับการเสริมแล้วสามารถเพาะบนเชื้อ Salmonella-Shigella agar และสารอื่น ๆ ที่คล้ายคลึงกันเช่นไซโลสวุ้นไลซีนดีออกซีโคเลต (XLD) และวุ้น Hektoen ในลำไส้ (HE)
รากฐาน
ส่วนประกอบแต่ละอย่างของอาหารเลี้ยงเชื้อ Salmonella-Shigella มีหน้าที่เฉพาะและส่วนผสมโดยรวมจะให้คุณสมบัติที่บ่งบอกลักษณะของมัน
บำรุงกำลัง
สารสกัดจากเนื้อสัตว์และเปปโตน (ย่อยด้วยเคซีนและเนื้อเยื่อสัตว์) ให้สารอาหารที่จำเป็น (ไนโตรเจนคาร์บอนและวิตามิน) สำหรับการพัฒนาจุลินทรีย์ที่สามารถทนต่อส่วนประกอบที่เหลือได้
ความมั่นคง
วุ้นมีหน้าที่ในการให้ความสม่ำเสมอของของแข็งกับตัวกลาง
Selective
สื่อนี้ได้รับการคัดเลือกอย่างมากเนื่องจากมีเกลือน้ำดีโซเดียมซิเตรตและสีเขียวสดใส ดังนั้นจึงยับยั้งการเจริญเติบโตของแบคทีเรียแกรมบวกทั้งหมดและแบคทีเรียแกรมลบส่วนใหญ่รวมทั้งโคลิฟอร์มบางชนิด
ในขณะที่แบคทีเรียในสกุล Salmonella และ Shigella บางสายพันธุ์สนับสนุนสารประกอบเหล่านี้
โดยทั่วไปแล้วสกุลซัลโมเนลลามีความทนทานต่อเกลือของน้ำดีมากจนสามารถอาศัยอยู่ในถุงน้ำดีของผู้ป่วยที่เป็นพาหะบางรายที่หลั่งแบคทีเรียในอุจจาระอยู่ตลอดเวลา
ที่แตกต่างกัน
แลคโตสเป็นคาร์โบไฮเดรตที่สามารถหมักได้ซึ่งช่วยแยกสายพันธุ์ที่หมักแลคโตสออกจากสายพันธุ์ที่ไม่ผ่านการหมัก คุณสมบัตินี้เห็นได้จากการมีตัวบ่งชี้ pH ซึ่งในตัวกลางนี้คือฟีนอลเรด
สายพันธุ์หมักแลคโตสให้โคโลนีสีแดงในขณะที่สายพันธุ์ที่ไม่ผ่านการหมักจะไม่มีสี ลักษณะนี้มีความสำคัญเนื่องจาก Salmonella และ Shigella ไม่ได้หมักแลคโตส
ในทางกลับกันสารนี้มีโซเดียมไธโอซัลเฟตเป็นแหล่งของซัลไฟด์และเฟอร์ริกซิเตรตเป็นแหล่งของเหล็ก สารประกอบทั้งสองสามารถแยกความแตกต่างของแบคทีเรียที่สามารถผลิตก๊าซไข่เน่าได้ สิ่งเหล่านี้ทำปฏิกิริยาเพื่อสร้างตะกอนเฟอร์ริกซัลไฟด์สีดำที่มองเห็นได้และไม่ละลายน้ำ
คุณสมบัตินี้พบได้ใน Salmonella บางสายพันธุ์ โดยปกติอาณานิคมของพวกมันจะไม่มีสีแบนโดยมีจุดสีดำอยู่ตรงกลาง ส่วนที่เหลือของ Salmonellas ไม่สร้าง H 2 S และพัฒนาเป็นโคโลนีที่ไม่มีสี
ในทางกลับกันอาณานิคมของสกุล Shigella นั้นไม่มีสีแบนโดยไม่มีการดำคล้ำ
การจัดเตรียม
สื่อนี้ง่ายมากในการเตรียม
ชั่งน้ำหนักตัวกลางทางการค้าที่ขาดน้ำ 63 กรัมแล้วละลายในน้ำกลั่นหนึ่งลิตร อุ่นสารละลายและคน ส่วนผสมสามารถเดือดได้ถึงนาที
สื่อนี้ต้องไม่ผ่านการนึ่งฆ่าเชื้อ หลังจากละลายแล้วจะเสิร์ฟโดยตรงบนจานฆ่าเชื้อเดี่ยวหรือคู่
เมื่อแข็งตัวพวกมันจะถูกจัดเรียงแบบกลับด้านบนเกล็ดเลือดและเก็บไว้ในตู้เย็น (2-8 ° C) จนกว่าจะใช้
ตัวกลางหลังการเตรียมควรอยู่ที่ pH 7.2 ± 0.2 และมีสีแดงอมส้ม
เป็นสิ่งสำคัญที่จะต้องปล่อยให้จานอุ่นขึ้นก่อนที่จะเพาะตัวอย่าง ตัวอย่างเดิมสามารถหว่านได้โดยตรงโดยปล่อยวัสดุลงบนส่วนหนึ่งของวุ้นแล้วจึงโรยจากที่นั่น
ในกรณีที่ใช้น้ำซุปที่อุดมไปด้วยให้ผ่านส่วนหนึ่งของน้ำซุปซีลีไนต์และเมล็ดด้วยไม้พาย drigalski
บ่มที่อุณหภูมิ 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมงในแอโรบิค
โปรดทราบว่าจำนวนกรัมที่ต้องชั่งและ pH สุดท้ายของตัวกลางอาจแตกต่างกันไปในแต่ละบ้านในเชิงพาณิชย์ ฐานกลางจะบ่งบอกถึงการเตรียมการเสมอ
ใช้
มักใช้ในการวิเคราะห์การเพาะเลี้ยงอุจจาระและในการศึกษาทางจุลชีววิทยาของน้ำเสียน้ำดื่มและตัวอย่างอาหาร
มักจะมีการเตรียมแผ่นสองชั้นโดยวางวุ้น Salmonella-Shigella ด้านหนึ่งและบนวุ้น XLD อื่น ๆ
ข้อ จำกัด
- สายพันธุ์ Shigella บางสายพันธุ์ไม่เติบโตในอาหารชนิดนี้ ดังนั้นจึงไม่แนะนำให้ทำการแยกสกุลนี้เป็นหลัก
- ไม่ใช่ว่าทุกอาณานิคมโปร่งใสที่มีจุดศูนย์กลางสีดำจะบ่งบอกถึงเชื้อ Salmonella ต้องทำการทดสอบทางชีวเคมีเพื่อระบุตัวตนที่ถูกต้องเนื่องจากอาณานิคมของสายพันธุ์ Proteus บางสายพันธุ์นั้นแยกไม่ออกจากเชื้อซัลโมเนลลา
- ตัวกลางที่ขาดน้ำต้องดูแลการสัมผัสกับสิ่งแวดล้อมเนื่องจากมีการดูดความชื้นมาก ดังนั้นจึงต้องเก็บไว้ในสภาพแวดล้อมที่แห้งและปิดสนิท เปิดให้บริการในช่วงสั้น ๆ
- เมื่อเวลาผ่านไปเกลือของน้ำดีในตัวกลางอาจตกตะกอนกลายเป็นรูปคล้ายกับแผ่นรองในวุ้น แต่จะไม่ส่งผลต่อผลลัพธ์
- ชิเกลลาบางสายพันธุ์สามารถหมักแลคโตสได้ช้า
ระบบประกันคุณภาพ
เพื่อพิสูจน์ว่าตัวกลางทำงานได้อย่างถูกต้องขอแนะนำให้ปลูกสายพันธุ์ควบคุมที่รู้จักหรือได้รับการรับรองและสังเกตว่าการเจริญเติบโตเป็นไปตามลักษณะที่คาดไว้หรือไม่
ในกรณีนี้สามารถใช้เชื้อ E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium หรือ Enterococcus faecalis ได้
ผลลัพธ์ที่คาดหวังคือ:
Enterobacter และ Klebsiella ------ อาณานิคมขนาดใหญ่และ mucoids สีแดงหรือสีชมพู
Shigella flexneri ---------- อาณานิคมแบนโปร่งใสหรือไม่มีสี
Salmonella typhimurium ------ อาณานิคมไม่มีสีที่มีศูนย์สีดำ
Enterococcus faecalis -------- การยับยั้งทั้งหมด
อ้างอิง
- ห้องปฏิบัติการ Difco Francisco Soria Melguizo เชื้อ Salmonella-Shigella 2552 มีจำหน่ายที่: f-soria.es
- ห้องปฏิบัติการ BD BD Salmonella-Shigella Agar 2556 ดูได้ที่: bd.com
- Britannia Laboratories เชื้อ Salmonella-Shigella 2558 ดูได้ที่: britanialab.com
- การวินิจฉัย Valtek Salmonella-Shigella Agar (SS Agar). 2553. มีจำหน่ายที่: andinamedica.com
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยาของ Bailey & Scott 12 เอ็ด กองบรรณาธิการ Panamericana SA Argentina
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยา 5th ed. กองบรรณาธิการ Panamericana SA Argentina