วุ้นเกลือ mannitolหรือเกลือ manitol เป็นเลือกสื่อที่เป็นของแข็งและวัฒนธรรมที่แตกต่างกัน Chapman สร้างขึ้นเพื่อแยกเชื้อ Gram-positive cocci ที่ทำให้เกิดโรคโดยเฉพาะ Staphylococcus aureus
อย่างไรก็ตามมันยังมีประโยชน์ในการแยกเชื้อ Staphylococus epidermidis ซึ่งบางครั้งอาจเป็นเชื้อโรคฉวยโอกาสและ Staphylococcus saprophyticus ซึ่งเป็นเชื้อโรคในปัสสาวะที่ได้รับการยอมรับในสายพันธุ์อื่น ๆ
ก. ฟิโอล่ากับวุ้นแมนนิทอลที่เตรียมไว้เค็ม B. แผ่นวุ้นแมนนิทอลเค็มที่เพาะด้วยแบคทีเรียสายพันธุ์แมนนิทอลที่หมักและไม่หมัก ที่มา: A และ B: ภาพถ่ายที่ถ่ายโดยผู้เขียน MSc Marielsa Gil.
Enterococcus บางชนิดสามารถเจริญเติบโตบนอาหารชนิดนี้ได้เช่นเดียวกับแท่งสร้างสปอร์แกรมบวกบางชนิด
สื่อนี้มีประโยชน์อย่างมากในการวิเคราะห์ตัวอย่างทางคลินิก แต่ยังใช้ในการศึกษาทางจุลชีววิทยาของอาหารและในการควบคุมคุณภาพของผลิตภัณฑ์อุตสาหกรรมเช่นเครื่องสำอางยาและอื่น ๆ
Salty Mannitol Agar ประกอบด้วยสารสกัดและเปปโตนจากเนื้อวัวไตรปไทน์แมนนิทอลโซเดียมคลอไรด์ฟีนอลเรดและวุ้น
รากฐาน
วุ้นแมนนิทอลสามารถเลือกได้เนื่องจากมีเกลือที่มีความเข้มข้นสูง ความเค็มทำหน้าที่เป็นสารยับยั้งและป้องกันการเติบโตของแบคทีเรียแกรมลบ
นอกจากนี้ยังมีความแตกต่างเนื่องจากการมีแมนนิทอลของคาร์โบไฮเดรตและตัวบ่งชี้ pH สีแดงของฟีนอล จากนี้แบคทีเรียที่สามารถหมักแมนนิทอลจะผลิตกรดทำให้เป็นกรดเปลี่ยนโคโลนีและมีสีเหลืองปานกลาง
ในทางกลับกันโคโลนีที่ไม่ได้หมัก mannitol จะเติบโตในอาหารที่ได้รับสารอาหารจากสารสกัดและเปปโตนของเนื้อสัตว์และ triptein จากนั้นแบคทีเรียจะดึงคาร์บอนไนโตรเจนวิตามินและแร่ธาตุที่จำเป็นต่อการเจริญเติบโต
อาณานิคมในกรณีนี้อาจเป็นสีชมพูอ่อนหรือเข้มและตัวกลางยังคงเป็นสีเดิมหรือเปลี่ยนเป็นสีบานเย็น
วุ้นเป็นสารที่ให้ความสอดคล้องกับตัวกลาง
การจัดเตรียม
ในการเตรียมวุ้นแมนนิทอลเค็มหนึ่งลิตรจะต้องชั่งน้ำหนักตัวกลางที่ขาดน้ำจาก บริษัท การค้าที่ต้องการ 111 กรัมและละลายในน้ำกลั่น 1,000 มล. โดยใช้ขวด
ความร้อนถูกนำไปใช้กับการกวนตัวกลางบ่อยๆเพื่อปรับปรุงกระบวนการละลาย ต้มสักหนึ่งนาที
ใส่ขวดลงในหม้อนึ่งที่อุณหภูมิ 121 ° C เป็นเวลา 15 นาที
เมื่อสิ้นสุดเวลาให้นำขวดออกจากหม้อนึ่งทิ้งไว้และเสิร์ฟระหว่าง 15 ถึง 20 มล. บนจานเพาะเชื้อที่ปราศจากเชื้อเมื่ออุณหภูมิอยู่ที่ประมาณ 50 ถึง 55 ° C
อนุญาตให้แข็งตัวสั่งกลับด้านใน plaqueros และเก็บไว้ในตู้เย็นจนกว่าจะใช้ ก่อนที่จะเพาะตัวอย่างให้รอให้จานถึงอุณหภูมิห้อง
แผ่นจะถูกเพาะโดยการสตรีมหรือโดยการเพาะพื้นผิวด้วยไม้พาย drigalski pH สุดท้ายของตัวกลางที่เตรียมต้องเป็น 7.4 ± 0.2
สีของตัวกลางที่ขาดน้ำคือสีเบจอ่อนและสีของตัวกลางที่เตรียมไว้คือสีแดงอมส้ม
การประยุกต์ใช้งาน
เนื่องจากมีการคัดเลือกที่สูงสื่อชนิดนี้จึงเหมาะอย่างยิ่งสำหรับการหว่านตัวอย่างที่มีพืชผสมซึ่งมี Staphylococus aureus ซึ่งเป็นเชื้อโรคหลักของพืชสกุลนี้
ในแง่นี้การใช้บ่อยที่สุดอย่างหนึ่งคือในการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาของสารหลั่งในคอหอยและตัวอย่างน้ำมูกโดยเฉพาะอย่างยิ่งเพื่อตรวจหาพาหะของ S. aureus ที่ไม่มีอาการ
บางประเทศได้ใช้การวิเคราะห์นี้เป็นข้อกำหนดบังคับสำหรับผู้ที่ต้องการทำงานเป็นผู้ขายอาหาร
การควบคุมนี้จะป้องกันไม่ให้มีการจ้างคนที่เป็นพาหะของ S. aureus ดังนั้นจึงหลีกเลี่ยงอาหารเป็นพิษจำนวนมากเนื่องจากการบริโภคอาหารที่ปนเปื้อนสาร Staphylococcal enterotoxin
นอกจากนี้ยังสามารถรวมอยู่ในการเพาะเชื้อจากบาดแผลการเพาะเชื้อจากเลือด CSF การล้างหลอดลมและอื่น ๆ
วุ้นแมนนิทอลเค็มมีประโยชน์ในการแยกโคโลนีออกจากเชื้อในปัสสาวะอีกครั้งจากวุ้น CLED หรือวุ้นในเลือดซึ่ง Gram ได้เปิดเผยกลุ่มของ cocci Gram positive
นอกจากนี้ยังถูกต้องในการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาของอาหารน้ำดื่มดินและการใช้งานอื่น ๆ
ระบบประกันคุณภาพ
เมื่อเตรียมจานที่มีวุ้นแมนนิทอลเค็มแล้วขอแนะนำให้ทำการควบคุมคุณภาพ มีการหว่านสายพันธุ์ควบคุมเพื่อแสดงว่ามีการเจริญเติบโตหรือไม่
สายพันธุ์ Staphylococcus aureus ที่รู้จักกันดีสามารถใช้เป็นการควบคุมเชิงบวก มันควรจะเติบโตอย่างน่าพอใจในการพัฒนาอาณานิคมสีเหลืองและตัวกลางก็เปลี่ยนเป็นสีเดียวกัน
ในทำนองเดียวกันการรวมสายพันธุ์ของ Staphylococcus epidermidis ที่รู้จักกันก็สะดวก มันควรจะเติบโตอย่างน่าพอใจในการพัฒนาอาณานิคมสีชมพูและตัวกลางยังคงมีสีเดิมหรือเข้มขึ้นเป็นสีชมพูที่เข้มขึ้น
ในฐานะที่เป็นตัวควบคุมเชิงลบจะใช้สายพันธุ์ที่ไม่ควรเติบโตบนอาหารชนิดนี้ ตัวอย่างเช่นเชื้อ Escherichia coli หรือ Klebsiella pneumoniae ที่รู้จักกันดีสามารถปลูกได้ ผลที่คาดว่าจะได้รับคือการยับยั้งที่สมบูรณ์นั่นคือไม่มีการเจริญเติบโต
นอกจากนี้ต้องบ่มจานที่ไม่ได้ใส่ปุ๋ย ในนั้นไม่ควรมีการเติบโตหรือเปลี่ยนสี
เป็นสิ่งสำคัญที่จะต้องไม่ใช้เพลทหากมีสัญญาณของการเสื่อมสภาพเช่นการปนเปื้อนการคายน้ำการเปลี่ยนสีเป็นต้น
ความคิดสุดท้าย
เมื่อใช้อาหารวุ้นแมนนิทอลที่มีรสเค็มมีประเด็นสำคัญบางประการที่ควรพิจารณา:
- การได้รับโคโลนีสีเหลืองเติบโตไม่ได้บ่งชี้ว่าเป็นเชื้อ Staphylococcus aureus ต้องจำไว้ว่า Enterococcus บางสายพันธุ์มีความสามารถในการเจริญเติบโตในอาหารกลางและการหมักแมนนิทอลรวมทั้งแท่งแกรมบวกที่สร้างสปอร์
ดังนั้นจึงเป็นเรื่องสำคัญที่จะต้องทำการตรวจแกรมบนอาณานิคมและการทดสอบคาตาเลส
- ในทางกลับกันต้องพิจารณาว่า Staphylococcus สายพันธุ์อื่น ๆ นอกเหนือจาก aureus ก็สามารถหมัก mannitol ได้เช่นกัน ดังนั้นจึงเป็นเรื่องสำคัญที่จะต้องนำวัฒนธรรมย่อยของอาณานิคมไปยังน้ำซุปที่มีสารอาหารและทำการทดสอบโคอะกูเลส
ในบรรดาสายพันธุ์ Staphylococcus ที่มีความสำคัญทางคลินิกสำหรับผู้ชายที่หมัก mannitol ได้แก่ S. aureus, S. simulans, S. capitis ssp capitis, S. capitis ssp urealyticus, S. xylosus, S. cohnii ssp urealyticum เป็นต้น
คนอื่น ๆ สามารถให้ปฏิกิริยาที่แปรปรวนได้นั่นคือบางครั้งเป็นบวกและบางครั้งก็เป็นลบ บางชนิด ได้แก่ S. saprophyticus, S. haemolyticus, S. Warneri, S. intermedius และอื่น ๆ
- ไม่แนะนำให้ใช้โคโลนีโดยตรงจากวุ้นแมนนิทอลเพื่อทำการทดสอบโคอะกูเลสเนื่องจากความเข้มข้นสูงของเกลือในตัวกลางอาจรบกวนผลได้
- สุดท้ายขอแนะนำให้บ่มแผ่นเปลือกโลกที่มีแมนนิทอลเค็มนานถึง 48 ชั่วโมงเนื่องจาก S. aureus บางสายพันธุ์สามารถหมักแมนนิทอลได้อย่างช้าๆแม้ว่าจะไม่บ่อยนัก
อ้างอิง
- Britannia Laboratories วุ้นแมนนิทอลเค็ม 2558 ดูได้ที่: britanialab.com
- “ วุ้นแมนนิทอลรสเค็ม”. Wikipedia สารานุกรมเสรี 31 ต.ค. 2561, 19:08 น. UTC. 17 ม.ค. 2019 20:55 น. ดูได้ที่ es.wikipedia.org
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยา (ฉบับที่ 5) อาร์เจนตินาบรรณาธิการ Panamericana SA
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยาของ Bailey & Scott 12 เอ็ด อาร์เจนตินา. กองบรรณาธิการ Panamericana SA
- BD Laboratories BD Mannitol Salt Agar 2556 ดูได้ที่: bd.com