MACCONKEY AGAR: เหตุผลการเตรียมและการใช้งาน - ชีววิทยา

วุ้น MacConkeyเป็นสื่อที่เป็นของแข็งซึ่งจะช่วยให้การแยกเฉพาะของแบคทีเรียแกรมลบ ด้วยเหตุนี้จึงเป็นสื่อที่ได้รับการคัดเลือกและยังช่วยให้สามารถแยกความแตกต่างระหว่างการหมักแลคโตสและบาซิลลัสที่ไม่ผ่านการหมักซึ่งทำให้เป็นสื่อที่แตกต่างกัน เป็นอาหารเลี้ยงเชื้อชนิดหนึ่งที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยา

สื่อนี้ส่วนใหญ่ใช้สำหรับการแยกเชื้อ Gram negative bacilli ที่อยู่ในวงศ์ Enterobacteriaceae รวมทั้งสายพันธุ์ที่ฉวยโอกาสและ enteropathogenic

วุ้น MacConkey มีแบคทีเรียสองชนิด โคโลนีหมักแลคโตสด้านซ้าย, โคโลนีหมักที่ไม่ใช่แลคโตสด้านขวา

นอกจากนี้ยังสามารถใช้เพื่อแยกแบคทีเรียในลำไส้อื่น ๆ ที่อาศัยอยู่ในระบบทางเดินอาหาร แต่ไม่ได้อยู่ในกลุ่ม Enterobacteriaceae เช่น Aeromonas sp, Plesiomonas sp เป็นต้น

ในที่สุดก็สามารถแยกแบคทีเรียแกรมลบที่ไม่ได้หมักด้วยกลูโคสอื่น ๆ ที่พบในสิ่งแวดล้อมน้ำหรือดิน แต่บางครั้งอาจเป็นเชื้อโรคที่ฉวยโอกาสเช่น Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alcaligenes sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia เป็นต้น

รากฐาน

วุ้น MacConkey

รากฐานของสื่อนี้สามารถอธิบายได้ผ่านคำอธิบายส่วนประกอบเนื่องจากแต่ละองค์ประกอบมีจุดประสงค์ที่กำหนดคุณสมบัติของสื่อ

เกลือน้ำดีและคริสตัลไวโอเลต

ในแง่นี้วุ้น MacConkey จึงมีองค์ประกอบที่ซับซ้อน ก่อนอื่นประกอบด้วยเกลือน้ำดีและคริสตัลไวโอเลต

องค์ประกอบเหล่านี้มีหน้าที่ในการยับยั้งการเจริญเติบโตของแบคทีเรียแกรมบวกและแบคทีเรียแกรมลบบางชนิดที่จุกจิก ในทางกลับกันมันสนับสนุนการพัฒนาของ Gram negative bacilli ที่ไม่ได้รับผลกระทบจากสารเหล่านี้ ดังนั้นจึงเป็นสื่อที่เลือกได้

ว่ากันว่าเลือกได้เล็กน้อยเมื่อเทียบกับสื่ออื่น ๆ ที่ยับยั้งการเจริญเติบโตของแบคทีเรียแกรมบวกและแบคทีเรียแกรมลบส่วนใหญ่

Peptones, polypectones และ lactose

ประกอบด้วยสารที่ให้สารอาหารที่จำเป็นต่อจุลินทรีย์ที่พัฒนาในสภาพแวดล้อมนี้เช่นเปปโตนโพลีสเปคโตนและแลคโตส

แลคโตสเป็นจุดสำคัญสำหรับตัวกลางในการเป็นตัวกลางที่แตกต่างเนื่องจากจุลินทรีย์ที่มีความสามารถในการหมักแลคโตสจะพัฒนาโคโลนีสีชมพูที่แข็งแรง

แบคทีเรียบางชนิดสามารถหมักแลคโตสได้ช้าหรืออ่อนแอพัฒนาโคโลนีสีชมพูอ่อนและยังคงมีแลคโตสเป็นบวก

ผู้ที่ไม่ได้หมักแลคโตสจะใช้เปปโตนเป็นแหล่งพลังงานผลิตแอมโมเนียทำให้ตัวกลางเป็นด่าง ด้วยเหตุนี้อาณานิคมที่กำเนิดจึงไม่มีสีหรือโปร่งใส

ตัวบ่งชี้ PH

การเปลี่ยนสีทำได้โดยใช้สารประกอบสำคัญอื่น ๆ ที่วุ้น MacConkey มีอยู่ สารประกอบนี้เป็นตัวบ่งชี้ pH ซึ่งในกรณีนี้คือสีแดงที่เป็นกลาง

การหมักแลคโตสทำให้เกิดกรดผสม พวกเขาทำให้กรดปานกลางถึง pH ต่ำกว่า 6.8

ทำให้ตัวบ่งชี้ pH เปลี่ยนเป็นสีชมพูเข้ม ความเข้มของสีอาจแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับ pH สุดท้าย

น้ำกลั่นโซเดียมคลอไรด์และวุ้น

ในทางกลับกันประกอบด้วยน้ำกลั่นและโซเดียมคลอไรด์ที่ให้ความชุ่มชื้นปานกลางและสมดุลออสโมติก สุดท้ายตัวกลางประกอบด้วยวุ้นซึ่งเป็นฐานที่ให้ความสม่ำเสมอของตัวกลางที่เป็นของแข็ง

อาหารเลี้ยงเชื้อ MacConkey ที่เตรียมไว้ควรมีค่า pH สุดท้ายปรับเป็น 7.1 ± 0.2

การจัดเตรียม

สำหรับวุ้น MacConkey หนึ่งลิตรต้องชั่งน้ำหนักตัวกลางที่ขาดน้ำ 50 กรัมจากนั้นใส่ในขวดแล้วละลายในน้ำกลั่นหนึ่งลิตร หลังจาก 10 นาทีของการยืนมันจะถูกทำให้ร้อนผสมอย่างต่อเนื่องจนเดือดเป็นเวลา 1 นาที

จากนั้นใส่ขวดลงในหม้อนึ่งฆ่าเชื้อและฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิ 121 ° C เป็นเวลา 20 นาที ในตอนท้ายของเวลาจะถูกนำออกจากหม้อนึ่งและปล่อยให้เย็นจนกระทั่งถึงอุณหภูมิ 45 ° C เพื่อเสิร์ฟในจาน Petri ที่ปราศจากเชื้อในเครื่องดูดควันแบบเคลือบหรือด้านหน้าเตา Bunsen

ปล่อยให้แข็งตัวและจัดเก็บในที่ยึดจานคว่ำและแช่เย็นในตู้เย็นที่อุณหภูมิ 2-8 ° C จนกว่าจะใช้

เพื่อให้ได้วุ้น MacConkey ที่ยับยั้งผลกระทบที่เกิดจากพืชสกุล Proteus จะใช้วุ้น MacConkey ที่มีเกลือต่ำ

การใช้วุ้น MacConkey ทั่วไป

MacConkey Agar รวมอยู่ในชุดอาหารเลี้ยงเชื้อทั้งหมดที่จัดไว้สำหรับการหว่านตัวอย่างทางคลินิกที่ได้รับในห้องปฏิบัติการ นอกจากนี้ยังมีประโยชน์ในจุลชีววิทยาอาหารและจุลชีววิทยาสิ่งแวดล้อม

ความหลากหลายของแท่งแกรมลบที่เติบโตในลักษณะทางฟีโนไทป์แบบแสดงออกขนาดกลางที่ช่วยในการวินิจฉัยโดยสันนิษฐานของสิ่งมีชีวิตที่เป็นปัญหา ตัวอย่างเช่นขนาดสีความสม่ำเสมอและกลิ่นของอาณานิคมเป็นลักษณะบางอย่างที่สามารถชี้นำได้

ในสื่อนี้สายพันธุ์ Escherichia coli, Klebsiella sp และ Enterobacter sp จะสร้างอาณานิคมสีชมพูที่แข็งแรงล้อมรอบด้วยโซนของน้ำดีที่ตกตะกอน

ในขณะที่แบคทีเรียเช่น Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp และ Hafnia sp สามารถไม่มีสีได้หลังจาก 24 ชั่วโมงหรือเป็นสีชมพูซีดใน 24 -48 ชั่วโมง

ในทำนองเดียวกันจำพวก Proteus, Edwadsiella, Salmonella และ Shigella จะสร้างอาณานิคมที่ไม่มีสีหรือโปร่งใส

ตัวแปรอื่น ๆ ของวุ้น MacConkey

มี MacConkey Agar รุ่นอื่น ๆ ที่มีวัตถุประสงค์เฉพาะ มีการกล่าวถึงด้านล่าง:

วุ้น MacConkey กับซอร์บิทอล

สื่อนี้ได้รับการออกแบบมาเพื่อแยกความแตกต่างของสายพันธุ์ enteropathogenic (enterohemorrhagic Escherichia coli O157: H7) จากสายพันธุ์อื่น ๆ ของ Escherichia coli

สื่อนี้จะแลกเปลี่ยนแลคโตสของคาร์โบไฮเดรตเป็นซอร์บิทอล เชื้อ E. coli enterohemorrhagic สายพันธุ์ O157: H7 แตกต่างจากที่เหลือเนื่องจากไม่ได้หมักซอร์บิทอลจึงได้โคโลนีโปร่งใสในขณะที่เชื้อ E. coli ที่เหลือจะหมักซอร์บิทอลและอาณานิคมจะมีสีชมพูเข้ม

วุ้น MacConkey ไม่มีคริสตัลไวโอเลตหรือเกลือ

วุ้นนี้แตกต่างจากวุ้น MacConkey แบบคลาสสิกอย่างมากเนื่องจากไม่มีผลึกสีม่วงและแบคทีเรียแกรมบวกสามารถเจริญเติบโตได้

ในทางกลับกันการไม่มีเกลือจะยับยั้งการปรากฏตัวของการจับกลุ่มบนวุ้นที่เกิดจากเชื้อแบคทีเรียในลำไส้เช่นแบคทีเรียในสกุล Proteus ดังนั้นจึงช่วยในการแยกแบคทีเรียทั้งหมดที่มีอยู่รวมทั้งแบคทีเรียแกรมบวก

วุ้น MacConkey กับ cefoperazone

วุ้น MacConkey รุ่นนี้ได้รับการออกแบบมาเพื่อแยกเชื้อ Laribacter hongkongensis ในขั้นต้นและพบว่ามีประโยชน์ในการแยกเชื้อ Arcobacter butzleri ทั้งสองมีลักษณะเป็นแท่งแกรมลบโค้งเล็กน้อยที่ทนต่อ cefoperazone

เมื่อเร็ว ๆ นี้แบคทีเรียเหล่านี้เชื่อมโยงกับสาเหตุของโรคกระเพาะและลำไส้อักเสบและทำให้เกิดอาการท้องร่วงในคนเอเชียและยุโรปโดยกลายเป็นเชื้อโรคที่มีฤทธิ์รุนแรงสองชนิด

ยาปฏิชีวนะช่วยยับยั้งพืชที่มาพร้อมกับระบบทางเดินอาหารซึ่งส่งเสริมการพัฒนาของแบคทีเรียเหล่านี้ป้องกันไม่ให้ไม่มีใครสังเกตเห็นเนื่องจากต้องใช้เวลา 72 ชั่วโมงในการเจริญเติบโต

วุ้น MacConkey ที่เตรียมด้วยน้ำทะเลที่ 10% v / v

ตัวแปรนี้มีประโยชน์สำหรับการประเมินตัวบ่งชี้สุขอนามัยของแบคทีเรียในการปนเปื้อนอุจจาระรวมถึงโคลิฟอร์มทั้งหมดและโคลิฟอร์มอุจจาระในน้ำเค็มเพื่อการพักผ่อนหย่อนใจ (ชายหาดและอ่าว)

Cortez et al ในปี 2013 แสดงให้เห็นว่าสื่อที่เตรียมด้วยวิธีนี้ช่วยเพิ่มการฟื้นตัวของจุลินทรีย์เหล่านี้ในสภาพแวดล้อมของน้ำเกลือได้อย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับการใช้วุ้น MacConkey ที่เตรียมด้วยน้ำกลั่น

เนื่องจากสารที่ถูกดัดแปลงกระตุ้นการเจริญเติบโตของแบคทีเรียที่มีลักษณะทางสรีรวิทยาในสภาวะแฝง "ทำงานได้ แต่ไม่สามารถเพาะเลี้ยงได้" ดังนั้นจึงไม่สามารถกู้คืนได้ในสื่อทั่วไป

อ้างอิง

Lau SK, Woo PC, Hui WT และอื่น ๆ การใช้ cefoperazone MacConkey agar เพื่อคัดแยก Laribacter hongkongensis J Clin Microbiol. 2003 41 (10): 4839-41.
วุ้น MacConkey Wikipedia สารานุกรมเสรี 4 เม.ย. 2561, 18:16 น. UTC. 29 ธ.ค. 2561, 15:22 น. en.wikipedia.org
Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยาของ Bailey & Scott 12 เอ็ด อาร์เจนตินา. กองบรรณาธิการ Panamericana SA
Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยา (ฉบับที่ 5) อาร์เจนตินาบรรณาธิการ Panamericana SA
Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. ผลของอาหารเลี้ยงเชื้อที่เตรียมด้วยน้ำทะเลต่อดัชนีชี้วัดสุขภาพในน้ำทะเลของสปาใน Chichiriviche รัฐFalcónประเทศเวเนซุเอลา Rev Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). จุลชีววิทยาคลินิกในทางปฏิบัติ University of Cadiz รุ่นที่ 2. บริการสิ่งพิมพ์ UCA

MACCONKEY AGAR: เหตุผลการเตรียมและการใช้งาน - ชีววิทยา - 2025