BAIRD PARKER AGAR: รองพื้นการเตรียมและการใช้งาน - ชีววิทยา - 2026

วุ้นบาร์ดปาร์กเกอร์เป็นเลือกสื่อที่เป็นของแข็งและวัฒนธรรมที่แตกต่างกัน สร้างขึ้นในปีพ. ศ. 2505 เพื่อใช้ในการตรวจหาและนับจำนวนเชื้อสแตฟฟิโลคอคซิโคอะกูเลสบวก (Staphylococcus aureus)

ประกอบด้วยไฮโดรไลเซตตับอ่อนของเคซีนสารสกัดจากเนื้อสัตว์สารสกัดจากยีสต์ลิเธียมคลอไรด์ไกลซีนโซเดียมไพรูเวตโพแทสเซียมเทลลูไรต์วุ้นและอิมัลชันไข่แดง

Staphylococcus aureus colonies โดยทั่วไปใน Baird Parker agar ที่มา: Daizy John

Baird Parker Agar อาศัยความสามารถของ S. aureus ในการลดเทลลูไรต์และผลิตเลซิติเนส คุณสมบัติทั้งสองสร้างอาณานิคมที่มีลักษณะเฉพาะสำหรับสิ่งมีชีวิตชนิดนี้ ดังนั้นจึงมีประสิทธิภาพสูงในการตรวจหาจุลินทรีย์นี้

อาณานิคมทั่วไปของ S. aureus มีสีดำหรือเทาเข้มโดยมีขอบไม่มีสีและมีรัศมีแสงล้อมรอบทำให้แตกต่างจากจุลินทรีย์อื่น ๆ เชื้อโรคนี้สามารถพบได้ในตัวอย่างทางคลินิกน้ำเครื่องสำอางและอาหารดิบหรือปรุงสุก

การวินิจฉัยหรือการตรวจหามีความสำคัญสูงสุดเนื่องจากความหลากหลายของโรคที่ก่อให้เกิดเช่นอาหารเป็นพิษโรคผิวหนังที่ถูกน้ำร้อนลวกกลุ่มอาการช็อกจากพิษฝีเยื่อหุ้มสมองอักเสบภาวะโลหิตเป็นพิษเยื่อบุหัวใจอักเสบเป็นต้น

รากฐาน

บำรุงกำลัง

Pancreatic casein hydrolysate สารสกัดจากเนื้อสัตว์และสารสกัดจากยีสต์เป็นแหล่งของสารอาหารวิตามินและแร่ธาตุที่จำเป็นสำหรับการพัฒนาจุลินทรีย์ทั่วไปในขณะที่ไพรูเวทและไกลซีนเป็นสารประกอบที่สนับสนุนการเจริญเติบโตเฉพาะของ Staphylococcus aureus

Selective

Baird Parker Agar ได้รับการคัดเลือกเนื่องจากมีสารที่ยับยั้งการเจริญเติบโตของพืชที่มาพร้อมกับการส่งเสริมการพัฒนาของ S. aureus สารประกอบยับยั้งคือลิเธียมคลอไรด์และโพแทสเซียมเทลลูไรต์

ที่แตกต่างกัน

สื่อนี้ทำให้สามารถแยกความแตกต่างของ S. aureus จากส่วนที่เหลือของ Staphylococci ที่เป็นลบ coagulase S. aureus มีความสามารถในการลด Tellurite ให้เป็นอิสระจากโลหะสีดำเทลลูเรียมกลายเป็นอาณานิคมสีดำหรือสีเทาเข้ม

ในทำนองเดียวกันไข่แดงเป็นสารตั้งต้นเพื่อแสดงให้เห็นถึงการมีอยู่ของเอนไซม์เลซิติเนสและไลเปส S. aureus เป็นเลซิติเนสเป็นบวกดังนั้นจะสังเกตเห็นรัศมีที่ชัดเจนรอบ ๆ อาณานิคมซึ่งแสดงว่าเลซิตินถูกไฮโดรไลซ์

ในแง่นี้การปรากฏบนวุ้นของโคโลนีสีดำมันวาวหรือสีเทาเข้มที่มีรัศมีแสงรอบตัวบ่งบอกว่ามี S. aureus

หากพื้นที่ตกตะกอนก่อตัวขึ้นจะบ่งบอกถึงกิจกรรมไลเปส S. aureus บางสายพันธุ์มีไลเปสบวกและอื่น ๆ เป็นลบ

ในกรณีที่ S. aureus เป็นไลเปสบวกจะสังเกตเห็นบริเวณที่ทึบแสงรอบ ๆ อาณานิคมสีดำหรือสีเทาเข้มจากนั้นจะมีรัศมีแสงเนื่องจากการกระทำของเลซิติเนส

อาณานิคมของแบคทีเรียอื่น ๆ ที่ไม่ใช่ S. aureus ที่สามารถเจริญเติบโตบนตัวกลางนี้จะพัฒนาอาณานิคมที่ไม่มีสีหรือน้ำตาลโดยไม่มีรัศมีรอบ ๆ

นอกจากนี้ยังสามารถมองเห็นโคโลนีสีดำที่ผิดปกติโดยมีหรือไม่มีขอบไม่มีสี แต่ไม่มีรัศมีแสง ไม่ควรนำอาณานิคมเหล่านี้มาพิจารณาเนื่องจากไม่สอดคล้องกับ S. aureus

การจัดเตรียม

อิมัลชันไข่แดง

นำไข่ไก่สดล้างให้สะอาดแล้ววางไว้ในแอลกอฮอล์ 70% เป็นเวลา 2 ถึง 3 ชั่วโมง จากนั้นไข่จะถูกเปิดอย่างปลอดเชื้อและสีขาวจะถูกแยกออกจากไข่แดงอย่างระมัดระวัง หลังจากนั้นนำไข่แดง 50 มล. มาผสมกับสารละลายทางสรีรวิทยาที่ปราศจากเชื้อ 50 มล.

โพแทสเซียมเทลลูไรต์ 1% w / v

อาคารพาณิชย์บางแห่งขายโพแทสเซียมเทลลูไรต์ 1% พร้อมใช้งาน จะถูกเพิ่มลงในตัวกลางก่อนที่ตัวกลางจะแข็งตัว

ในการเตรียมสารละลายนี้ในห้องปฏิบัติการจะมีการชั่งน้ำหนักโพแทสเซียมเทลลูไรต์ 1.0 กรัมและละลายในน้ำหนึ่งส่วน ต่อจากนั้นปริมาณน้ำจะครบ 100 มล. น้ำยาต้องผ่านการฆ่าเชื้อด้วยวิธีกรอง

การเตรียมอาหารเลี้ยงเชื้อ

ชั่งของกลางที่ขาดน้ำ 60 กรัมแล้วละลายในน้ำกลั่น 940 มล. ทิ้งส่วนผสมไว้ประมาณ 5-10 นาที

ใช้ความร้อนโดยการกวนตัวกลางบ่อยๆเพื่อปรับปรุงกระบวนการละลาย นำไปต้มสักครู่ ฆ่าเชื้อในหม้อนึ่งที่อุณหภูมิ 121 ° C เป็นเวลา 15 นาที

ปล่อยทิ้งไว้จนได้อุณหภูมิ 45 ° C แล้วเติมอิมัลชันไข่แดง 50 มล. และเทลลูไรต์ 1% 10 มล. ผสมให้เข้ากันแล้วเท 15-20 มล. ลงบนจานเพาะเชื้อที่ปราศจากเชื้อ

อนุญาตให้แข็งตัวสั่งกลับด้านใน plaquers และเก็บในตู้เย็นจนกว่าจะใช้

pH สุดท้ายของตัวกลางที่เตรียมไว้ต้องเท่ากับ 6.8 ± 0.2

ก่อนที่จะเพาะตัวอย่างให้รอให้จานถึงอุณหภูมิห้อง เพาะเมล็ดด้วยการสตรีมหรือโดยการหยอดเมล็ดด้วยไม้พาย Drigalski

สีของตัวกลางที่ขาดน้ำคือสีแทนอ่อนและสีของตัวกลางที่เตรียมไว้เป็นสีเหลืองอำพัน

ใช้

ตัวอย่างทางคลินิก

ตัวอย่างทางคลินิกจะถูกหว่านโดยตรงโดยปล่อยส่วนหนึ่งของวัสดุที่ปลายด้านหนึ่งของจานและจากนั้นก็จะมีริ้วรอยจากความเหนื่อยล้า ฟักตัวเป็นเวลา 24 ถึง 48 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 35-37 องศาเซลเซียส

ตัวอย่างอาหาร

ชั่งน้ำหนักตัวอย่างอาหาร 10 กรัมและทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในน้ำเปปโตน 0.1% 90 มล. จากนั้นเตรียมการเจือจางหากจำเป็น ใส่ปุ๋ยลงในเพลทเป็นสามเท่าด้วยสารละลายที่เตรียมไว้ 0.3 มล. และหยอดเมล็ดบนพื้นผิวด้วยไม้พาย Drigalski ฟักตัวเป็นเวลา 24 ถึง 48 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 35-37 องศาเซลเซียส

วิธีการนี้ช่วยให้สามารถนับโคโลนีทั่วไปที่ได้รับและเหมาะอย่างยิ่งเมื่อสงสัยว่ามี S. aureus สูงกว่า 10 CFU ต่อ g / ml ของตัวอย่าง

หากสงสัยว่า S. aureus มีปริมาณน้อยหรือมีพืชประกอบอยู่เป็นจำนวนมากขอแนะนำให้เพิ่มปริมาณตัวอย่างในน้ำซุปถั่วเหลืองทริปซิเคสที่มี NaCl 10% และโซเดียมไพรูเวท 1% สิ่งนี้จะส่งเสริมการเจริญเติบโตของ S. aureus และยับยั้งการพัฒนาของพืชที่มาพร้อมกับ ท่อขุ่นถูกเพาะบนวุ้นของ Baird Parker

ตัวอย่างน้ำ

ในระบบกรองสุญญากาศที่ผ่านการฆ่าเชื้อจะมีการกรองน้ำที่ใช้ในการศึกษา 100 มล. และต่อมาเยื่อหุ้มไมโครพอรัส 0.4 ไมครอนจะถูกนำออกด้วยคีมที่ผ่านการฆ่าเชื้อและวางไว้บนแผ่น Baird Parker ฟักตัวเป็นเวลา 24 ถึง 48 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 35-37 องศาเซลเซียส เทคนิคนี้ช่วยให้สามารถนับโคโลนี S. aureus ทั่วไปได้

ระบบประกันคุณภาพ

สายพันธุ์ที่รู้จักเช่น Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 หรือ Proteus mirabilis ATCC 43071 สามารถใช้ในการประเมินคุณภาพของวุ้น Baird Parker

ในกรณีของสายพันธุ์ S. aureus ATCC เป็นที่ทราบกันดีว่าสามารถลดเทลลูไรต์ได้และเป็นไลเปสและเลซิติเนสที่เป็นบวก ดังนั้นจึงต้องมีการพัฒนาที่น่าพอใจและขยายโคโลนีนูนโดยมีจุดศูนย์กลางสีดำและขอบที่ไม่มีสีโดยมีรัศมีทึบแสงและรัศมีที่สว่างนอกสุด

ในส่วนของมันคาดว่า S. epidermidis จะพัฒนาได้ไม่ดีในตัวกลางนี้โดยมีอาณานิคมสีน้ำตาลเทาถึงดำโดยไม่มีรัศมีแสง

สำหรับเชื้อ E. coli และ P. mirabilis คาดว่าจะยับยั้งได้ทั้งหมดหรือบางส่วน ในกรณีของการเจริญเติบโตอาณานิคมสีน้ำตาลจะพัฒนาโดยไม่มีพื้นที่ทึบแสงหรือรัศมีแสง

คำแนะนำ

- ไม่ควรให้ความร้อนปานกลางหลังจากใส่เทลลูไรต์และไข่แดง

- การเตรียมอิมัลชันไข่แดงและการเติมลงไปตรงกลางเป็นขั้นตอนที่เสี่ยงต่อการปนเปื้อน ต้องใช้ความระมัดระวังอย่างมาก

- หากมีอาณานิคมทั่วไปของ S. aureus ควรได้รับการยืนยันโดยการติดตั้งการทดสอบ coagulase กับสายพันธุ์ดังกล่าว

- หากมีผลลัพธ์ที่น่าสงสัยเกี่ยวกับ coagulase ควรติดตั้งการทดสอบยืนยันอื่น ๆ

- ระวังอย่าสับสนระหว่างการมีอยู่ของอาณานิคม S. aureus กับอาณานิคมสีดำที่ผิดปกติ

อ้างอิง

1. ผู้ร่วมให้ข้อมูล Wikipedia วุ้น Baird-Parker Wikipedia สารานุกรมเสรี 15 มีนาคม 2017, 19:36 UTC. ดูได้ที่: wikipedia.org/ เข้าถึง 18 กุมภาพันธ์ 2019
2. BD Laboratories Baird Parker Agar 2549 ดูได้ที่: bd.com
3. Britannia Laboratories ฐานวุ้น Baird Parker 2558 ดูได้ที่: britanialab.com
4. ห้องปฏิบัติการ Francisco Soria Melguizo 2552. Baird Parker Agar. ดูได้ที่: http://f-soria.es/Inform
5. Britannia Laboratories โพแทสเซียมเทลลูไรต์ 2558 ดูได้ที่: britanialab.com
6. Alarcón-Lavín M, Oyarzo C, Escudero C, Cerda-Leal F, Valenzuela F. การขนส่ง enterotoxigenic Staphylococcus aureus type A ในรอยเปื้อนช่องจมูกในผู้จับอาหาร Rev Med ชิลี 2017; 145: 1559-1564
7. เวเนซุเอลามาตรฐาน Covenin 1292-89 (1989) ฟู้ดส์ การแยกและการแจกแจงของ Staphylococcus aureus มีจำหน่ายที่: sencamer.gob.ve