คองโกแดง: ลักษณะการเตรียมและการใช้งาน - ชีววิทยา - 2025

คองโกสีแดงเป็นสีย้อม azo โปรตีนที่เกิดขึ้นจากการมีเพศสัมพันธ์เกลือไดอะโซเนียมและหอมแหวนที่ใช้งาน สารนี้สามารถดูดซับรังสีแม่เหล็กไฟฟ้าในสเปกตรัมที่มองเห็นได้ซึ่งเป็นสาเหตุที่ทำให้มีสีเข้ม

มีประจุเป็นลบ ดังนั้นจึงมีความสัมพันธ์กับส่วนประกอบของเซลล์ที่มีประจุบวกเช่นสารโปรตีนบางชนิด สีของมันแตกต่างกันไปตาม pH ในแง่นี้ถ้าตัวกลางเป็นกรด (<มากกว่า pH3) สีจะเป็นสีน้ำเงินเข้ม ระหว่าง pH3 - pH 5.2 เป็นสีบานเย็น (เขตการหมุน) และด้วย> pH 5.2 สีจะเป็นสีแดงเข้ม

สารละลายคองโกเรดและคองโกเรดที่ขาดน้ำ ที่มา: Pixinio.com และ Wikipedia.com

เป็นสารที่มีประโยชน์หลายอย่างเนื่องจากมีประโยชน์หลายอย่าง ถูกใช้เป็นสีในอุตสาหกรรมสิ่งทอและสำหรับเซลล์และผ้า

นอกจากนี้เพื่อสร้างอาหารเลี้ยงเชื้อที่วัดการทำงานของเอนไซม์เป็นตัวบ่งชี้ pH เป็นสารควบคุมในการประเมินการทำงานที่เหมาะสมของเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ในการศึกษาการสร้างฟิล์มชีวภาพหรือในการวินิจฉัยโรคอะไมลอยด์

ในทำนองเดียวกันทำให้สามารถแยกแยะซีโรไทป์ของแบคทีเรียและเชื้อราได้โดยการระบุโครงสร้างเฉพาะในผนังของมัน (ไลโพลีแซ็กคาไรด์)

ลักษณะของสีแดงคองโก

สารนี้ถูกค้นพบโดยBöttigerในปี พ.ศ. 2427 เป็นอนุพันธ์ของไดโซเนียมที่เกิดจากกรดไบ - ไดโซอิกของเบนซิดีนกับกรดนาฟไธโอนิก โมเลกุลสีแดงของคองโกวัดได้ 21 อาร์มสตรองและน้ำหนักโมเลกุลอยู่ที่ประมาณ 8000 กรัม / โมล

สีแดงคองโกมีลักษณะเฉพาะคือสามารถละลายได้ในน้ำและยิ่งไปกว่านั้นในตัวทำละลายอินทรีย์เช่นเอทานอลกลายเป็นสารละลายคอลลอยด์

มันมีความสัมพันธ์กับเซลลูโลสสำหรับเนื้อเยื่ออะไมลอยด์และสำหรับส่วนประกอบของเซลล์ที่มีประจุบวก

การจัดเตรียม

Congo Red เตรียมด้วยความเข้มข้นที่แตกต่างกันขึ้นอยู่กับเทคนิคที่จะใช้ ส่วนใหญ่ใช้สีแดงคองโกที่ 1%, 2%, 0.1% และอื่น ๆ

ตัวอย่างเช่นในการเตรียมสีแดงคองโก 2% ควรชั่งสีผสมอาหารที่ขาดน้ำ 2 กรัมและเติมน้ำกลั่น 100 มล. จากนั้นเก็บไว้ในขวดสีเหลืองอำพัน

การประยุกต์ใช้งาน

เป็นสารทำสีในอุตสาหกรรมสิ่งทอ

ในช่วงเวลาหนึ่งมีการใช้กันอย่างแพร่หลายในอุตสาหกรรมสิ่งทอเนื่องจากมีการตรึงในฝ้าย แต่ปัจจุบันมีการเลิกใช้เนื่องจากเป็นสารก่อมะเร็งและเนื่องจากสีไม่คงที่จึงเปลี่ยนสีโดยการถู

การกำหนดความสามารถในการสร้างฟิล์มชีวภาพ

ความสามารถในการสร้างฟิล์มชีวภาพของจุลินทรีย์แสดงให้เห็นว่าเป็นปัจจัยที่ทำให้เกิดความรุนแรง

ในแง่นี้สีย้อมแดงคองโกใช้เป็นวิธีในการพิจารณาการสร้างฟิล์มชีวภาพ สีแดงของคองโกจับกับเอ็กโซโพลีแซ็กคาไรด์ที่มีอยู่ในฟิล์มชีวภาพ อย่างไรก็ตามเมื่อเทียบกับวิธีอื่น ๆ แนะนำให้ใช้น้อยที่สุดเนื่องจากมีผลลบเท็จที่เกิดขึ้น

วิธีนี้ใช้วุ้นแดงของคองโกซึ่งประกอบด้วยวุ้นเลือดเป็นฐานกลูโคส (10 กรัม / ลิตร) และสีย้อมแดงคองโก (0.4 กรัม / ลิตร) สายพันธุ์ที่จะทำการประเมินจะเพาะในอาหารกลางและบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 ° C จากนั้นนำไปบ่มเป็นเวลา 48 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง

การทดสอบในเชิงบวกเป็นหลักฐานหากสังเกตเห็นอาณานิคมของผลึกที่มีสีดำและลักษณะแห้ง

การควบคุมคุณภาพของเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์

ในการประเมินว่าอุปกรณ์วัดการดูดซับหรือการทำธุรกรรมเป็นไปตามพารามิเตอร์โฟโตเมตริกที่กำหนดโดยกฎระเบียบระหว่างประเทศหรือไม่สามารถใช้เทคนิคง่ายๆในการกำหนดว่าอุปกรณ์ให้ผลลัพธ์ภายในช่วงที่ยอมรับได้หรือไม่

หนึ่งในเทคนิคการประเมินคือการใช้ Congo red ตามจุด isosbestic

จุด isosbestic คือความยาวคลื่นที่คองโกแดงปล่อยการดูดซับเดียวกันโดยไม่ขึ้นกับ pH ความเข้มข้นและอุณหภูมิ ค่าการดูดซับคงที่และสามารถใช้เป็นข้อมูลอ้างอิงได้

จุด isosbestic ตามทฤษฎีของ Congo red เป็นที่ทราบกันดีว่า 541 นาโนเมตร หากค่าที่ได้รับแตกต่างกันเป็นที่ทราบกันดีว่าอุปกรณ์มีปัญหาการเบี่ยงเบนของความยาวคลื่นและจำเป็นต้องได้รับการตรวจสอบโดยช่างเทคนิคเฉพาะทาง

การเตรียมอาหารเลี้ยงเชื้อ

Ortiz et al อธิบายอาหารเลี้ยงเชื้อที่เตรียมด้วยสีย้อมแดงคองโกและคาร์บอกซีเมทิลเซลลูโลสที่เรียกว่า CMC agar เพื่อตรวจหาจุลินทรีย์เซลลูไลท์สายพันธุ์ นั่นคือผู้ผลิตเซลลูเลส (endogluconeses, exoglucanases และß-glucosidase)

สื่อนี้มีสีเข้มข้น สีจะสลายไปโดยการกระทำของเอนไซม์เอนโดกลูคาเนสที่ทำลายโครงสร้างของคาร์บอกซีเมทิลเซลลูโลส สิ่งนี้แสดงให้เห็นปฏิกิริยาเชิงบวก

การลดลงของความหนืดและการดูดซับทำให้สามารถวัดปริมาณกิจกรรมของเอนไซม์ได้ ตัวอย่างเช่นในสายพันธุ์ Streptomyces sp.

การระบุจุลินทรีย์

คองโกแดงมีความสัมพันธ์กับโครงสร้างโพลีแซ็กคาไรด์ของบางสายพันธุ์ดังนั้นจึงสามารถระบุจุลินทรีย์เหล่านี้ได้ ในจำนวนนี้ ได้แก่ Escherichia coli และ Shigella flexneri

นอกจากนี้ยังใช้แผ่นวุ้นสีแดงของคองโกเพื่อให้ได้โคโลนีที่มีลักษณะเช่นเดียวกับกรณีของ Azospirillum sp ซึ่งให้โคโลนีสีแดงแดงและอื่น ๆ

คราบเซลล์และเนื้อเยื่อ

หนึ่งในการใช้งาน Congo red ที่พบบ่อยที่สุดคือประโยชน์ในการวินิจฉัยโรคอะไมลอยโดซิส โรคประหลาดนี้ประกอบด้วยการสะสมนอกเซลล์ของโปรตีนที่ผิดปกติในอวัยวะต่างๆ โปรตีนที่ผิดปกตินี้สร้างขึ้นในไขกระดูกและเรียกว่าอะไมลอยด์

คองโกแดงมีความสัมพันธ์กับสารนี้สูง คุณสมบัตินี้ถูกใช้เพื่อแสดงการมีอยู่ในส่วนเนื้อเยื่อเนื้อเยื่อ Congo Red ใช้ร่วมกับ Hematoxylin / Eosin เพื่อการนี้

การรวมตัวกันของเนื้อเยื่ออะไมลอยด์และสีแดงคองโกเกิดขึ้นผ่านพันธะไฮโดรเจนที่ไม่มีขั้วระหว่างหมู่คาร์บอกซิลและกลุ่มอะมิโน โปรตีนอะไมลอยด์ให้หมู่คาร์บอกซิล (COOH) และคองโกเป็นกลุ่มอะมิโนแดง

เนื้อเยื่ออะไมลอยด์มีสีหลายเฉดตั้งแต่สีชมพูจนถึงสีแดงเข้มเมื่อมองเห็นภายใต้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง ในกล้องจุลทรรศน์ที่มีแสงโพลาไรซ์แบบทวีคูณการเตรียมการเหล่านี้จะสังเกตได้ด้วยการสะท้อนแสงแบบแอปเปิ้ลเขียวที่ก่อโรค

นั่นคือพวกมันนำเสนอ dichroism เนื่องจากเส้นใย amyeloid เป็น anisotropic ข้อสังเกตนี้ยืนยันการวินิจฉัย

การย้อมสีเนื้อเยื่อด้วยสีแดงคองโกเข้ากันได้กับวิธีการวินิจฉัยอื่น ๆ เช่นวิธีการสร้างภูมิคุ้มกันทางภูมิคุ้มกันและยังสามารถเปลี่ยนสีได้

เป็นตัวบ่งชี้ pH

เทคนิคที่เรียกว่าโครโมเอนโดสโคป (Chromoendoscopy)

เทคนิคนี้ใช้สารให้สีและตัวบ่งชี้ pH ที่ช่วยในการตรวจหาพยาธิสภาพบางอย่าง ในหมู่พวกเขาคือการใช้สีแดงคองโกซึ่งสามารถเผยให้เห็นจุดโฟกัสของมะเร็งในระยะเริ่มแรกในเยื่อเมือกในกระเพาะอาหารโดยใช้เป็นตัวบ่งชี้ความเป็นกรด

เทคนิคนี้ขึ้นอยู่กับความจริงที่ว่าคองโกแดงที่ pH ของกรดเป็นสีดำ ดังนั้นหลังจากวางสารละลายคองโกแดงบนเยื่อเมือกในกระเพาะอาหารแล้วบริเวณที่มีความซีดจะถูกเลือกเพื่อนำตัวอย่างไปตรวจชิ้นเนื้อนั่นคือที่ที่ไม่มีการผลิตกรด สิ่งนี้แสดงให้เห็นถึงการมีโฟกัสที่เป็นมะเร็งหรือการสูญเสียเซลล์ข้างขม่อม

อ้างอิง

1. "คองโกแดง" Wikipedia สารานุกรมเสรี 8 พ.ค. 2019 12:13 UTC 16 พฤษภาคม 2019, 04:08 น. es.wikipedia.org.
2. Ortiz M, Uribe D. วิธีการใหม่สำหรับการหาปริมาณของกิจกรรมเอนโดกลูคาเนสโดยอาศัยสารประกอบเชิงซ้อนสีแดงของเซลลูโลส - คองโก Orinoquia. 2554 มิถุนายน; 15 (1): 7-15. มีให้จาก: scielo.org
3. Peña J, Uffo O. การผลิตฟิล์มชีวภาพในจีโนไทป์ของ Staphylococcus aureus ที่แยกได้จากโรคเต้านมอักเสบจากวัวในคิวบา Rev Salud Anim. . 2556 ธ.ค. ; 35 (3): 189-196. มีจำหน่ายที่: scielo.s
4. Fich F, Chahuán M, Farías M, Cárdenas C, Abarzúa A, Araya G et al. อาการทางผิวหนังของ amyloidosis ในระบบเป็นกุญแจสำคัญในการวินิจฉัย: กรณีทางคลินิก รายได้แพทย์ ชิลี 2555 เม.ย. ; 140 (4): 499-502 มีจำหน่ายใน: scielo
5. Duymovich C, Acheme R, Sesini S, Mazziotta D. คู่มือการปรับปรุงเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์และโฟโตโคโลมิเตอร์ Acta BioquímicaClínica Latinoamericana 2005, 39 (กันยายน - ธันวาคม): มีจำหน่ายที่: redalyc.org
6. Marín J, Díaz J และSolís J. Chromoendoscopy ในการติดเชื้อ Helicobacter pylori: เป็นเวลาปฏิกิริยาหรือไม่? Rev Esp Enferm Dig 2012; 104 (1): 1-3
7. Fieser L, Fieser M. 1985. เคมีอินทรีย์. การเปลี่ยนกลับด้านบรรณาธิการ บาร์เซโลนาสเปน มีจำหน่ายที่: books.google.co.ve
8. Murillo M. เทคนิคการย้อมสีเนื้อเยื่อเนื้อเยื่อ. มหาวิทยาลัยกวาดาลาฮาราประเทศเม็กซิโก มีจำหน่ายที่: academia.edu
9. Paillié M. การกำหนดกิจกรรมเซลลูโลไลติกลิกนิโนไลติกและอะไมโลไลติกของแอคติโนแบคทีเรียที่แยกได้จากดินไรโซสเฟียร์ของโคลเวอร์สีขาว (Trifolium repens) 2555 Pontificia Universidad Javeriana คณะวิทยาศาสตร์จุลชีววิทยาอุตสาหกรรมBogotá DC มีจำหน่ายที่: repository.javeriana.edu.co
10. Cárdenas, D, Garrido M, Bonilla R และ Baldani V. การแยกและการระบุ Azospirillum sp. บนหญ้ากินี (Panicum maximum Jacq.) จาก Cesar Valley ทุ่งหญ้าและอาหารสัตว์, 2010; 33 (3): 1-8 มีจำหน่ายใน: scielo.